尿核基质蛋白22在膀胱移行细胞癌诊断及术后复发监测中的应用

尿核基质蛋白22在膀胱移行细胞癌诊断及术后复发监测中的应用 医学论文-尿核基质蛋白22在膀胱移行细胞癌诊断及术后复发监测中的应用 【摘要】 目的: 探讨尿核基质蛋白22:NMP22:检测对膀胱移行细胞癌诊断及术后复发监测中的应用价值. 方法:采用酶联免疫法:ELISA:检测45例膀胱癌、30例非膀胱癌泌尿系疾病、20例健康志愿者尿中NMP22水平并进行比较. 结果: 膀胱癌组NMP22平均为38.7×103U/L高于非膀胱癌泌尿系疾病组:8.7×103U/L:和健康志愿者组:7.1×103U/L, P<0.05),复发病例 :30.7×103U/L:高于未复发患者(6.1×103U/L, P<0.05). 结论: 尿NMP22对膀胱移行细胞癌具有高灵敏度和无创伤性,是检测膀胱移行细胞癌的有效标志物,并可用于判断术后有无复发. 【关键词】 尿核基质蛋白22;癌,移行细胞;膀胱肿瘤;诊断;复发监测 0引言 膀胱移行细胞癌是我国泌尿系统最常见的恶性肿瘤,其中70%为浅表肿瘤,且有易复发的特征,5 a内复发的可能性为50%~70%,大多数肿瘤在1 a复发,1,. 早期发现,定期术后随访,检测复发是膀胱肿瘤成功治疗的关键. 目前临床上常用的诊断及复查方法为膀胱镜检查、尿脱落细胞检查及B超检查. 膀胱镜检查具有侵袭性,许多患者难以接受;尿脱落细胞检查及B超检查虽非侵入性,但灵敏度不高,2,. 近年来随着分子生物学的发展,尿核基质蛋白22:NMP22:成为临床研究较多的指标之一,3,. 我们对自膀胱移行细胞癌患者进行了尿NMP22的检查,并进行手术后的复发与未复发的动态观察. 1对象和方法 1.1对象收治膀胱癌组患者45例,男35例,女10例;年龄29~81:平均55.7:岁. 其中行膀胱部分切除术12例,TURBT32例. 膀胱癌术后随诊3 mo~2 a. 术后20例复发,25例未复发,复发率44.4%. 均有血尿,行膀胱镜检+活检诊断为膀胱移行细胞癌,所有复发病例均经病理证实. 非膀胱癌泌尿系疾病30例,男16例,女14例. 年龄30~85:平均47.8:岁. 其中尿石症10例,泌尿系感染:单纯:6例,前列腺增生伴出血8例,前列腺癌1例,肾癌4例,尿道狭窄1例. 健康志愿者20例,男13例,女7例,年龄35~69:平均53.5:岁. 1.2方法所有尿样均在行膀胱镜检、导尿等腔内操作前于08:00~12:00一次性收集. 标本分2份: 1份查NMP22,1份行尿脱落细胞学检查. 查NMP22的尿样标本收集后避光保存,立即转入含有防腐剂的尿样收集瓶500 r/min离心15 min后取上清夜转入塑料试管中3~20?保存. 实验 NMP22试剂盒由美国Matritech公司生产,严格按试剂盒说明书操作,采用双抗体夹层免疫酶标法用酶标仪测得吸光度,建立标准旮线,取得样品NMP22的测定值:单位U/L:. 统计学处理:参照文献以10.0×103 U/L为NMP22检测临界值,所有数据采 用SPSS统计软件包处理. 尿NMP22各组之间比较采用非参数秩和检验. P<0.05为有统计学差异. 2结果 2.1NMP22含量45例膀胱癌NMP22为7.9×103~158.0×103U/L,非膀胱癌泌尿系疾病MP22为2.1×103~17.1×103U/L,健康志愿者NMP22为 1.4×103~10.3×103U/L,膀胱癌患者尿中NMP22浓度高于非膀胱癌泌尿系疾病和健康志愿者:P<0.05:. 2.2NMP22与尿脱落细胞学以10.0×103U/L为NMP22检测阳性临界值,NMP22与尿脱落细胞学诊断膀胱癌的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值有一定差异:表1:,NMP22敏感性高于尿脱落细胞学检查:P<0.01:,但特异性稍低. 表1NMP22和尿脱落细胞学敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值:略: 2.3NMP22在膀胱癌术后复发中的检测45例膀胱癌术后复发20例患者尿 NMP22中位数为30.7×103U/L,25例未复发患者尿 NMP22中位数为6.1×103U/L:P<0.01:. 以10.0×103U/L为最适临界值,复发病例NMP22?10.0×103U/L者15例,NMP22<10.0×103U/L者5例;未复发病例NMP22?10.0×103U/L者5例,NMP22<10.0×103U/L者20例,敏感性75%,特异性80.0%. 3讨论 核基质蛋白:nuclear matrix protein, NMP:是核基质的重要组成部分,有多种结构和功能,并且有较强的组织器官特异性,4,,最早于由Berezney等,5,报道. NMP22属于核基质蛋白的一种,又称为有丝分裂器蛋白. 是构成细胞核网状结构的一个组成部分,与DNA的复制、转录、RNA合成及基因表达的调控有关. NMP22为核有丝分裂装置蛋白:NuMAP:的一个亚单位. NuMAP与有丝分裂期间纺锤体的形成有关,其主要供能为在细胞有丝分裂末期使染色体正确、均匀地分配到子代细胞,6,. 因此,NMP22与细胞增殖活跃的组织关系密切. 据报道,体外培养的膀胱癌细胞内NMP22浓度较正常膀胱移行上皮细胞至少增加25倍,7,. 由于膀胱癌中NMP22在细胞凋亡中以可溶性复合物片断形式随尿排出,而这个被释放的片断可通过双单抗酶联免疫法予以测定,检测限达到pg级,这使得尿的NMP22成为膀胱肿瘤的特有标记物. Carpinito等,8,报道移行细胞癌患者组尿中NMP22浓度明显高于良性泌尿外科组和健康人群,初步认为NMP22作为一种筛选膀胱癌的瘤标在临床上是可行的. 我们用同样的方法检测了45例膀胱癌患者尿中NMP22浓度为 38.7×103U/L,明显高于非膀胱癌泌尿系疾病组的8.7×103U/L和正常对照组的7.1×103U/L,结果再次证明NMP22是尿液中诊断膀胱移行细胞癌的良好标记物. 等,9,对187例血尿患者进行NMP22检测,以10.0×103U/L为最适临界值诊断膀胱癌的敏感性、特异性分别为61.2%和89.9%,而细胞学检 查敏感性为35.4%. 本组NMP22检测采用10.0×103U/L为最适临界值敏感性与 文献报道相似. 本研究表明NMP22具有较高的敏感性,明显高于尿脱落细胞学 检查,可作为膀胱镜检查的辅助手段,对膀胱癌患者的筛查十分有利. 但其特 异性偏低,其原因可能为某些感染、结石、异物、创伤等可引起尿路上皮损 伤,引起细胞破损导致尿中NMP22升高,并且以10.0×103U/L这一标准为临界 值亦使特异性有所下降. 因此相对于传统的尿脱落细胞学检查,尿NMP22的检 查具有较高敏感性,但缺点是特异性不如尿细胞学检查,因此在临床上NMP22 检测不可能完全替代细胞学检查,但可弥补细胞学检查对膀胱癌敏感性过低的 不足,二者结合可提高临床早期诊断膀胱肿瘤的能力. 目前比较公认的临界值是Soloway等,10,提出的10.0×103U/L,以这一 临界值监测膀胱肿瘤术后复发敏感性为70.0%,特异性为79.0%. 本试验以 10.0×103U/L为临界值检测术后复发结果与Soloway等,10,的试验结果接近. 本研究结果显示尿NMP22可作为膀胱肿瘤术后复发的常规监测方法. 根据膀胱 肿瘤术后高复发特点,NMP22>10.0×103U/L者应及时膀胱镜检查,避免漏诊. NMP22<10.0×103U/L者可协同B超及尿脱落细胞学检查密切观察随诊. 我们研究表明,与尿脱落细胞学和膀胱镜检查相比尿NMP22测定具有较高 的敏感性和预测性,又是定量非侵入性的检查方法,因此我们认为检测尿液中 NMP22含量可作为膀胱癌诊断及监测复发的较好指标之一. 【参考文献】 ,1, Abel PD. Prognostic indices in transitional cell carcinoma of the bladder,J,. Brit J Urol, 1998, 62:103. ,2, of urinary cytology in the diagnosis of primary and recurrent bladder cancer ,J,. Acta Cytol, 1993, 37:163. ,3, Droller MJ. Evaluation of the clinical value of urinary NMP22 as a maker for screening and surveillance of transitional cell carcinoma of the urinary bladder ,J,. J Urol, 2002, 168(2):857-858. ,4, Yang ,J,. J Cell Biol, 1992, 116:1303-1304. ,5, Berezney R, Coffey DS. Identification of a nuclear protein matrix ,J,. Biochem Biophys Res Commun, 1974, 60(4):1410-1417. ,6, Compton DA, Cleveland DW. NuMA is required for the proper completion of mitosis ,J,. Cell Biol, 1993,120(4):947-957. ,7, Keesee SK, Briggman JV, Thill C, et al. Utilization of nuclear matrix proteins for cancer diagnosis,J,. Crit Rev Eukaryot Gene Expr, 1996,6(2):189-214. ,8, Carpinito GA, Stadler WM, Briggman JV, et al. Urinary nuclear matrix proteinas a marker for transitional cell carcinoma of the urinary tract,J,. J Urol, 1996, 156(4):1280-1285. ,9, utia M, Silva JM, et al. Comparative predictive values of urinary cytology, urinary bladder cancer antigen, CYFRA21~1 and NMP22 for evaluating sympotomatic patients at risk for bladder cancer,J,. J Urol, 2001,165(5):1462-1467. ,10, Soloway M S, Briggman J V, Carpinito G A, et al. Use of a new tumor marker. Urinary NMP22. in the detection of occult or rapidly recurring transitional cell carcinoma of the urinary tract following surgical treatment,J,. J Urol, 1996, 159:363-367.