脓毒血症患者血小板膜糖蛋白的变化及其意义

脓毒血症患者血小板膜糖蛋白的变化及其意义 脓毒血症患者血小板膜糖蛋白的变化及其 意义 ? 2O?中国医师进修杂志2006年9月第29卷第9期内科版ChinJPost~-adMed,Septemberyo1.o1^ 脓毒血症患者血小板膜糖蛋白的 变化及其意义 彭晓东陈骥 ? 临床论着? 【摘要】目的探讨脓毒血症患者血小板功能状态的变化及其意义.方法检测36例脓毒 血症患者外周血中血小板膜糖蛋白cD位cD?以及血浆血栓索B(TXB)和6一酮一前列腺素 Fla(6一keto—PGFla)的变化,并与正常对照组比较分析.并把脓毒血症患者分为器官功能不全 组和器官功能正常组进行比较分析.结果脓毒血症患者CD位和CD63及TXB明显升高,与正常 对照组比较,差异有统计学意义(P均<0.01);而6一keto—PGFla较正常对照组明显下降(P< 0.05).器官功能不全组cDP和cD63以及TXB2均高于器官功能正常组(P均<0.01);而6一keto — PGFla两组比较,差异无统计学意义.结论脓毒血症患者血小板处于高激活状态,容易发生 多器官功能障碍,血小板激活指标可作为判断脏器功能损害的指标之一. 【关键词】脓毒血症;血小板膜糖蛋白;血栓索B;6一酮一前列腺索Fla MeasurementandclinicalimpHcafionofplateletmembraneglycoproteininpafien~withsepsis PENGXiao— dong,CHENJi.DepartmentofEmergency,AffdiatedHospitalofGuangdongMedical College,Zhanj~ng524001,China 【Abstract】 ObjectiveToexploretheclinicalsignificanceofplateletmembraneglycoproteinin patientswithsepsis.MethodsThirty— sixpatientswithsepsiswereenrolled,patientsweredistributed intotwogroupsaccordingtoclinicalpattern:organsdysfunctiongroupandnormalfunctiongroup.The controlgroupconsistedof30healthpeople.TheexpressionofplateletmembraneglycoproteinCD62P,CD63 wereassessedandserumlevelofthromboxaneB2(TXB2)sod6一keto—prosta— glandinFla(PGFlct) werealsoassessed.ResultSignificantincreaseofplateletmembraneglycoproteinCD62P,CD63expres- sionandserunllevelofTXB2wereobservedinpatientswithsepsiswhencomparedwithcontrolgroup(P <0.01).Significantdecreaseof6一keto— PGF1awereobservedinpatientswithsepsiswhencompared withcontrolgroup(P<0.05).TheexpressionofplateletmembraneglycoproteinCD62P,CD63andserunl levelofTXB2inorgansdysfunctiongroupWassignificantlyhigherthanthoseinorgansnormalfunction group(P<0.01).Thesewerenosignificantdifferenceinserumlevelof6一keto— PGF1abetweentwo groups(P>0.05).ConclusionPlateletswerehighlyactivatedinpatientswithsepsiswhichmight contributetoincreasetheriskformultipleorgansdysfunctionsyndome(MODS).Theplatele tactivation mightbeoneofmarkerofMODS. 【Keywords】Sepsis;Plateletmembraneglyeoprotein;ThromboxaneB2;6一keto— prosta— glandinFla 脓毒血症(sepsis)是临床常见病,近几年来,尽 管治疗方法有了很多突破,但脓毒血症,严重脓毒血 症,脓毒性休克所致的病死率仍很高(35%一 70%)…,已成为ICU患者主要死亡原因之一.本 研究通过检测脓毒血症患者外周血中血小板膜糖蛋 白CDCD63以及血浆血栓素A(TXA:)的代谢产 物血栓素B(TXB:)和前列环素的代谢产物6一酮 一 前列腺素F1(6一keto—PGF1)的变化,探讨脓 作者单位:524001湛江,广东医学院附属医院急救中心 毒血症患者血小板功能状态的变化. 对象与方法 1.研究对象:脓毒血症组:2003年3月一2005 年3月我院急救中心ICU收治的脓毒血症患者36 例,均符合美国胸科医师学会(ACCP)和危重病学 会(SCCM)联席会上所定义的脓毒血症诊断, 其中发生一个以上脏器功能不全者(器官功能不全 组)21例,脏器功能正常者(器官功能正常组)l5 例.正常对照组:健康体检者3O例.两组研究对象 中国医师进修杂志2006年9月第29卷第9期内科版ChinJP08t哪 IdMed.September2006.Vo1.29.No.9A?21? 的年龄,性别构成差异无统计学意义. 2.方法:抽取肘静脉血5Hll,分为2ml和3Hll, 分别注人含1%依地酸钠(EDTA,1:9)的2只抗凝 试管中.取抗凝血2ml,800r/min离心5min;取上 层富含血小板血浆(PRP),3500r/min离心15min, 弃去上清液,加磷酸盐缓冲液(PBS),3000Cmin离 心10min,洗涤2次;1%的多聚甲醛固定30min,制 成血小板悬液,置于4?冰箱中待测;剩余的抗凝血 3ml,低温离心(3000~min)20min,分离血浆保存 于一2OcI二冰箱中待测.按文献[2—3]的方法检测 血小板悬液中CD:和CD?.将固定后的血小板悬 液1500r/min离心10min,弃上清液,加人抗血小 板膜受体的相应荧光标记抗体,置室温30min,加入 PBS,1500r/min离心10min,弃上清液,加人1ml PBS将血小板悬浮,上机检测.采用美国Bec~n— Dickinson公司生产的Calibur型流式细胞分析仪, 分选速率为300个/s.PE标记的CDCD荧光 抗体购自美国Phmingen公司;采用双抗夹心免疫 放射分析法检测TXB2和6一ket0一PGF10【,试剂盒 由北京东亚免疫研究所提供. 3.统计学方法:数据用?s表示,组间比较采 用t检验,P<0.o5为差异有统计学意义. 结果 结果见表1,2.脓毒血症患者CD&和CD?及 TXB均明显升高,与正常对照组比较差异有统计学意 义(P均<O.O1);而6一keto—PGF1a较正常对照组明 显下降(尸<0.05).器官功能不全组CD&和c以及 TXB均高于器官功能正常组(P均<O.O1);而6一keto — P(;F1a两组比较差异无统计学意义.脓毒血症患者 36例中死亡ll例,病死率为30.6%. 表l脓毒血症组与正常对照组各检测指标的比较(?s) 注:与正常对照组比较,'P<O.O1.一P<O.05 表2器官功能不全组与器官功能正常组各检测指标的比较(?s) 注:与器官功能正常组比较,'P<O.01 讨论 脓毒血症是一种感染引起的全身性炎症反应状 态,其本质是在原发病的基础上,微生物引起的感染 触发了已被致敏的炎症细胞,这些细胞释放大量的 炎性介质,使炎症反应在体内进一步呈梯级,瀑布样 放大,炎性介质的过度消耗还可引起免疫瘫痪,炎症 反应的严重失调导致了全身性的包括远离感染灶的 组织器官损伤,患者往往死于多器官功能障碍综合 征(MODS).近几十年来,脓毒血症的高病死率并 未明显降低,相反,其发病率还在增高,而且成为 ICU患者的主要死亡原因之一,本研究中患者的病 死率为30.6%. 血小板在正常血液循环中处于"静止"状态,当 血管内皮损伤或某些病理情况下,外界病理或生理 刺激因子可促使血小板过度聚集导致血栓前状态或 血栓栓塞症,引起或加重缺血性组织损伤】.血小 板膜糖蛋白是血小板黏附到血管壁和血小板间相互 作用的关键物质,这些糖蛋白主要包括CD配和 CD?,CD62又称P一选择素,属于选择素家族黏附分 子,表达于血小板一颗粒膜表面,正常情况下不暴 露,不会被特异的单克隆抗体所识别.当血小板活 化时一颗粒迅速与血小板膜融合而在血小板的膜 表面表达,成为血小板活化的特异性标志物J,并 介导中性粒细胞和单核细胞对活化血小板和内皮细 胞的黏附J.CD?为血小板内溶酶体颗粒膜蛋白, 在静止血小板表面仅有极少量表达,血小板活化时 可随脱颗粒反应而大量表达在血小板膜表面,并介 导中性粒细胞对活化内皮的黏附,因此也是检测血 小板活化的理想指标. TXA:与前列环素(PGI:)是花生四烯酸的主要 代谢产物.TXA:可直接引起血小板聚集及二磷酸 腺苷的释放,具有强烈的血小板聚集和血管收缩作 用.而PGI:是体内合成的最强的血小板解聚和血 管扩张物质.保持这一对血小板聚集与抗聚集系统 的平衡,对于维持血液的正常生理状f下转第41页) 匡进修杂盎—2006年9月第29卷第9期内科版 ChinJPostjtradMed.Septerober2006.Vo1.29.No.9A?41? 压控制在正常范围,并在术前2d输液补充血容量. 本组9例术中触动肿瘤时出现不同程度的血压波 动,3例术中血压无明显波动,1例切除后出现明显 低血压.3例术中发现肿瘤与周围大血管关系密 切,不易分离,而切除肾脏,其中1例与下腔静脉关 系密切,长人下腔静脉内,切除肿瘤后修复下腔静 脉.膀胱内肿瘤行膀胱部分切除术. 对于已经发生转移的恶性嗜铬细胞瘤,原则上 应手术切除原发灶和转移灶,但此时患者往往已无 法获得手术根治,可在术后辅以姑息性治疗.本组 1例耻骨后嗜铬细胞瘤复发行盆腔内肿瘤根治性切 除,术后行?I—MIBG放疗.放射性核素治疗是一 种姑息性治疗方法,适用于无法手术或已形成复发 转移病灶的恶性嗜铬细胞瘤,对于术后高血压而考 虑到残留病灶存在时,可使用放射性核素缓解儿茶 酚胺过度分泌和病灶转移产生的症状,如高血压,骨 转移造成的疼痛等,但常无法治愈.临床上通常使 用CVD综合化疗(环磷酰胺+长春新碱+达卡 巴嗪),缓解儿茶酚胺过度分泌产生的症状,也属姑 息性治疗引. 嗜铬细胞瘤不能仅从病理性质确定其是否容易 复发,本组1例耻骨后嗜铬细胞瘤15年后多处复 发,可见术后长期随访的重要性. 参考文献 l李军,赵宏铮,杨春明,等.肾上腺外嗜铬细胞瘤的诊断和治疗.中 国医科大学,2002,31(3):230—233. 2王甘露.刘维藩,杜松涛,等.原发性腹膜后肾上腺外嗜铬细胞瘤 的诊断与治疗探讨(附5例报告).腹部外科杂志,2001,14(3): 159—161. 3钱立新,吴宏飞,眭元庚,等.肾上腺外嗜铬细胞瘤的诊断与治疗. 中华泌尿外科杂志,2005,26(2):79—81. 4范晓明,楼健,赵君康,等.肾上腺外嗜铬细胞癌的超声诊断与治 疗.中国超声学杂志,1997,13(6):54—55. 5LliasI.YuJ,CarrasquilloJA.eta1.Superiorityof6一F—fluoro- dopaminepositionemi~iontomographyVel~U$I—metaiodobenzyl? guanidinescintigraphyinthelocalizationofmetastaticpheochromocy? toma.JClinEndocrinolMetab.2003.88:4083—4087. 6NaoiY,TamakiY,OokaM,eta1.Aca8eofmetastaticpheochromo- cytomawithremarkableresponsetocombinationofcyclophospha- mide,vincristineanddacarbazine.GanToK,~lktlRyoho,2o03,3O (1):145—149. (收稿日期:20o63-l6) (上接第2l页)态具有重要作用.TXA本身很不 稳定,在体液中的半衰期仅为30—60S,然后迅速变 成稳定的代谢产物TXB,故常用TXB反映TXA 的水平.同样PGI的性质也极不稳定,只有通过测 定其代谢产物6一keto—PGF1ct来反映PGI的血浆 水平. 本研究结果显示,脓毒血症患者体内反映血小 板活化的分子标志物血小板膜糖蛋白CD和CD韶 明显升高;反映维持血小板聚集与抗聚集系统平衡 的TXB2明显升高,而6一keto—PGF1ct的水平显着 降低,说明脓毒血症患者血小板处于相对的高激活 状态,是血栓前状态形成的主要原因J.本研究还 发现,脓毒血症患者血小板激活程度与脏器功能损 害程度有关,血小板的活性越高,脏器功能损害就越 严重,提示血小板激活指标可作为判断脓毒血症患 者脏器功能损害的指标之一.综上所述,脓毒血症 患者外周血中血小板膜糖蛋白显着增高,血小板处 于高激活状态,容易发生多器官功能障碍. 参考文献 1ZeniF,FreemanBD,NatansonC,eta1.Antiintlamatorytherapiesto treatsepsisandsepticshock.CfitCareMed,1997,25(7):1095— 1100.. 2UgarovaT.Conformationchangesinfibrinogenelicitedbyitsinterac- tionwithplateletsmembraneGP?b/nla.jBidChem.1993,268: 21080—21087. 3OconnorC.CurbdP.Usefulnessofsolubleandsurface—boundP— selectionindetectingheightenedplatcletactivityinpatientswith CPR.AmJCardiol,1999,83(9):1345—1349. 4GotoS,SakaiH,KedaY.eta1.ARefi~thrombosisinheartfailure. 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