清火消痤颗粒的开发性研究

清火消痤颗粒的开发性研究 学 学院代号 号墅垫竺 专业代码 密趣堡 陕西中医学院硕士学位论文 清火消痤颗粒的开发性研究 黄 伟 学位申请人 称 中药学 专 业 名 医学硕士科学学位 申请学位类型 王西芳 指导教师姓名 庞来祥 课教师姓名 年月 论文提交日期摘要 中药颗粒剂是秉承了传统汤剂的优点,在中医药理论指导下开发的一种较传 统汤剂 更为方便的剂型。在临床应用上克服了传统饮片煎煮、服用不便等问题,具有巨大的优 势和市场『景。本课题是在中医药理论指导下,依据各药物的性质和特点,在保留原药 材有效成分的基础上,利用现代制剂技术和工艺,结合药效学试验,对其颗粒制备工艺、 质量、初步稳定性以及药理药效学进行了较系统的研究。探讨中药颗粒剂代替传统 汤剂的可行性、科学性以及存在的问题,为颗粒剂进一步产业化和广泛应用提供科学依 据。 清火消痤颗粒是由麦冬、生地、丹参、夏枯草等多味中药组成的复方制剂,本方属 于解放军第医院的临床协定处方,按照药物性味、归经和组方原则,结合现代中药 研究成果和临床实践经验,精心配制而成。具有清热泻火,养阴生津,祛瘀散结的功效, 临床主要用于痤疮的治疗。 。本研究采用正交试验的设计方法,以多指标综合评分筛选出清火消痤颗粒的最佳及 最合理的提取、纯化工艺,对结果进行统计分析,最终确定工艺参数;此外还对成型工 艺进行了研究和筛选,以堆密度,休止角、溶化性、吸湿性等指标,确定了矫味剂、稀 释剂和润湿剂的种类和用量,从而制定出了半成品的质量标准。 以确定的工艺参数为标准,试制了三批中试样品,根据中试样品制定了清火消痤颗 粒的质量标准,从而为大生产提供合理可靠的技术参数。通过试验建立了麦冬、丹 参、夏枯草的薄层色谱鉴别方法,采用高效液相色谱法对丹参的有效成分丹参酮进 行了含量测定,结果表明本研究所建立的方法适用与清火消痤颗粒的生产及质量控制。 并参照《药品注册#管理#》试行及颗粒剂要求,以铝塑复合膜袋包装,对该配方 颗粒进行了初步稳定性研究。 研究表明,清火消痤颗粒制备工艺合理可行,质量标准可控,成品质量基本稳定。 参照资料对清火消痤方进行了急性毒性实验和部分药效学实验,实验证明:本方安 全性高,毒副作用小,抗炎作用好。 关键词 清火消痤颗粒;工艺优选;质量标准;初步稳定性;高效液相色谱法;丹 参酮,.., . , ,, ,, ,, , . , , . , , , ,,, 嘶 . ,印 , ,,, , , ; , , ,弱 , ?., ,. ,仃, ,. , , , 《 谢 . , ’, ., , ,. :; ; ;; . : : 陕西中医学院学位论文独创性声明及使用授权声明 学位论文独创性声明 本人郑重声明: 所呈交的学位论文,是个人在导师的指导下,独立进行研究工作 所取得的成果,无抄袭及编造行为。除文中已经特/以注明引用的内容外,本论文不 含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个 人和集体,均已在文中以明确方式标明并致谢。本人完全意识到本声明的法律结果并由 本人所承担的法律责任。 学位论文作者签名 日期: 年 月 日 关于学位论文使用授权的声明 陕西中医学院有权保留使用本人学位论文,同意学院按向国家有关部门机构送 交论文的复印件和电子版,允许被查阅和借阅。本人授权陕西中医学院可以将本学位论 文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或其他复印手段保 存和汇编本学位论文。可以公布包括刊登论文的全部或部分内容。 保密论文在解密后应遵守此规定 袭衫. 论文作者签名 期:谚年牛月弓日 论文导师签名 诎期:沙缉明争弓日 课题导师签名 日期: 年 月清火消痤平痤颗粒的开发性研究 引 言 痤疮研究概况 痤疮 是一种青春期常见的毛囊皮脂腺的慢性炎症性疾病,表现 为粉刺、丘疹、脓疱、结节、囊肿和瘢痕,好发于面、背、胸等富含皮脂腺 的部位。 该病为临床常见的皮肤病,病程缓慢,易于复发,多见于青少年,给患者带来 较大 . 的不便。【 痤疮的流行病学研究 有研究显示有近%的~岁的学生既往患过痤疮,同时发现~岁青年 的既往痤疮患病率男生高于女生。比较首发痤疮年龄在男女生之间的差异发 现,于 岁首发痤疮女生多于男生,而这种情况在、和岁三组发生逆转。说明了 女生开始长痤疮的年龄早于男生,但总体来说男生患病率高于女生,与等 的研究结果基本一致。而且随着人民生活水平的提高,食入饮食营养的增加,座疮 的发病在青少年中也所提前,女孩~岁,男孩一岁即出现。另外随着女 性外用化妆品的增加,及妇科疾病如多囊卵巢综合征发病率的提高,痤疮在中年女 性的发病率也大大增加。据美国的一些调查研究报告在青春发育期,痤疮的发生率 女孩可达.%,男孩可达%痤疮的发生率和严重程度与青春期发育的相关性大 于年龄的相关性。 痤疮的社会心理学研究 痤疮主要发于面部,严重影响了病人的面部美观,由此给患者的心理造成很大的 负担,进而影响患者的生活、学习和工作。有研究表明患过痤疮的人中因痤疮 而情绪低落人,发生率为.%:患过痤疮的学生中因痤疮而感到尴尬人, 发生率.%。痤疮患者常有自卑、自尊心差、抑郁、害羞等表现。国外研究表明, 患严重痤疮的病人的学习成绩差;另一研究表明在失业人群中患严重痤疮的人明显 比同性别年龄的无痤疮发作者多,一项包括例病人的研究表明,男性痤疮患者 失业率为.%,而控制期男性仅为.%。女性痤疮患者失业率为.%,而控制期 的女性仅为.%。 痤疮的病因病机研究 痤疮的发生与雄激素过高,皮质腺分泌增加,毛囊口上皮角化亢进,痤疮丙酸杆 第页共页陕西中医学院届硕士学位论文 菌和遗传因素有关。【】 .雄激素与皮脂腺功能亢进痤疮与雄激素关系的研究表明,多数学者认为痤 疮在青春期的发病率高与此期肾上腺功能活跃,雄激素分泌多有关,青春期后痤疮 患者,多数为无痤疮病史的成年人。的总体调查表明,此期患者多数为职业 女性,推测慢性紧张刺激垂体一肾上腺轴,导致肾上腺源性雄激素分泌增多,进而促 使痤疮的发生。其它研究还发现,少见绝经后痤疮与雌激素水平下降,雄激素相对 增多有关。婴儿痤疮的发生与胎儿性腺和肾上腺产生的雄激素有关,表现为痤疮发 生时间与血清中雄激素水平增高一致,一般个月到岁可消退。痤疮的发生与血 清雄激素水平关系,及水平的升高与初发痤疮特别是与粉刺的发生明显有关, 而雄激素在女性痤疮的发病中起着更重要的作用。虽然血清雄激素水平影响 着痤疮 的发生、发展和持续状态,但并非唯一原因。痤疮的发生与性激素受体有关系 及与毛囊皮脂腺单位水平升高或与和之间的比例失调或与对正常血清 雄激素水平的敏感性增加有关。】 .毛囊皮脂腺单位中微生物的作用 痤疮患者致病因素中,细菌感染是主要原 因之一,而痤疮丙酸杆菌则是主要的致病菌。毛囊皮脂腺单位中有多种微生物存在, 有痤疮丙酸杆菌,贪婪丙酸杆菌,颗粒丙酸杆菌及球菌属白色葡萄球菌和卵圆形 糠秕孢子菌等,当发生痤疮时,毛囊皮脂腺单位中这些细菌明显增多。 .炎症与宿主的免疫反应近年来,有关免疫学致病机制的研究发现,本病患 者的体液中血清水平增高,并随着病情加重而增加,此外痤疮丙酸杆菌在患者 体内产生抗体,参与了早期的致病过程。同时这种细菌能激活补体导致毛囊皮脂腺 管内的炎症,而此菌介导的细胞免疫反应可能增加了座疮的炎症。组织学己证实, 主要是炎症前的细胞因子参与,%粉刺中出现高水平,经研究用的 注入志愿者真皮则足以促发炎症。 .毛囊皮脂腺导管的角化过度毛囊漏斗部细胞角化在终末阶段发生障碍,角 朊细胞间粘着性增加,漏斗部导管角化细胞不断崩解脱落,而且细胞更替速 度加快, 结果导致毛囊漏斗部导管角化加快,形成微粉刺,当黑素沉积时即为黑头粉刺。导 致角化过度形成的原因可能有以下几种::表皮游离胆固醇/硫酸胆固醇比值下降; :痤疮患者皮肤表面脂质角鲨烯的含量比正常增加,兔耳试验证实角鲨 烯是致粉刺的物质,其角化过度的程度与脂质浓度相关;:局部维生素缺乏;: 毛囊上皮亚油酸缺乏。 第页共页清火消痤平痤颗粒的开发性研究 此外,化妆品使用不当造成毛囊口皮脂腺的堵塞,精神因素所致的内分泌紊乱, 烟、酒及辛辣食物的刺激、食入过多的糖、脂肪、药物性雄激素等均可为加重或促 发的因素,某些微量元素如锌的缺乏及季节的变化也与痤疮的发病有关。 祖国医学对痤疮的认识及治疗 痤疮,中医称“肺风粉刺、“酒刺、“风刺、“粉刺等,常发于颜面及胸背部, 初起为小丘疹和脓疮,病因多为热邪偏盛,严重者为血瘀痰结。现代医学认为,痤 疮是一种与性腺、内分泌功能失调有关的毛囊、皮脂腺慢性炎症性皮肤病。【】 风火毒瘀痰为标:“风行于上,“风先伤于皮毛”,故痤疮多发于头面、背部。初 起多有痒感,忽隐忽现,大而成疮,小而成疹,,因此痤疮发病多与风邪有关。风邪 分外风内风,外风伤表多见“风刺”“风疹,邪自外至里,病浅;内风多因气血热 盛所化,邪自内向外发,病深,但往往内风外风相合而发病。诸疮皆为火毒郁结营 血而致血败肉腐所生,而痤疮多为脏腑功能失调火热上炎所致。内火分上焦心肺火, 中焦脾胃湿火,下焦阴虚火炎或阴阳失调虚火上炎。火热轻重,病情急缓,病程长 短,应以上、中、下三焦辨之。【 痤疮急则红肿起脓,缓则暗红结节、囊肿、瘢痕,此乃风火灼伤津液而生痰,营 血离经而成瘀。发病时血败肉腐而成疮:缓时痰瘀互结久久难退。痰瘀不退风火时 起,风火起又常生痰瘀。总之,风火痰瘀毒互为因果,互结为病,共为痤疮标证。 脏腑功能失调为本:“诸痛瘁疮皆属于心,心属火,主血脉,其华在面。心火内 炽,血脉失调,营血热盛肉腐,发于肌肤而生疮疡。肺主气,主皮毛,凡皮毛病不 离肺。心肺同居上焦,火盛炎上,不仅心肺之火上炎能成痤疮,凡中下焦脏腑功能 失调,均能通过心肺表现为气血热盛郁结于皮毛而成痤疮。阳明脉布颜面,痤疮不 已,根深脓头深达肌腠,病在脾胃。《外科正宗》:“粉刺??又有好饮者,胃中糟粕 之味,熏蒸肿脏而成。过食辛辣肥腻,胃存积滞,脾虚聚湿,大肠热结,运化失调, 皆能化火循经上扰而成痤疮。又有痤疮久久不愈,反复发作,清热祛风、?血散瘀、 化痰散结诸法用尽而病不解者,并伴有月经失调,四肢厥冷,手足汗出,上热下寒 者,当责之肾精亏损,冲任失调。冲任失调有虚实,虚则为肾精亏损,肝血不足, 郁而化火;实则为挟寒,挟热,挟湿,日久经脉不畅,血行瘀滞。故痤疮久不愈者, 当调补肾精,或滋阴?血,通达血脉,引热下行为治则。】 .中药内治 第页共页陕西中医学院届硕士学位论文 ..辨证施治辨证施治是中医学的一大特色,对痤疮进行辨证治疗,疗效可 靠,复发率低。因此,各医家对此研究较多,具体有如下几种证型:风热袭肺型: 多见毛囊性丘疹,红肿疼痛,伴瘙痒,丘疹量不甚多,芝麻或绿豆大小,刺破见少 量白色脓液或无脓,伴口微渴大便干,舌边尖红或尖部芒刺,舌苔薄黄,脉数或略 浮、或弦.艾军以银翘散加减治疗,药用金银花、连翘、菊花、荆芥、白花蛇舌草、 薄荷、牡丹皮、蒲公英、炒栀子、蝉蜕、僵蚕、山楂等水煎服;肺胃蕴热型:青少年 发病者较多,好发于颜面、前额,皮损以丘疹、黑头粉刺、白头粉刺为主,颜面光 亮兼见口干渴,大便秘结,小便黄舌红,苔薄黄。脉弦滑,相当于现代医学丘疹性 痤疮。沈冬等治疗以清肺降火、泻胃除热为法,治以七叶汤加减,药物为枇杷叶、 桑叶、侧柏叶、荷叶、竹叶、大青叶、金银花、连翘、重楼、大黄、白花蛇舌草、 生山楂、生石膏为主。热毒夹瘀型:多见中青年期发病者,分布在颜面、胸背,以脓 疱、炎性丘疹为主者局部有疼痛,多伴有口干渴、口臭、心烦、大便干、小便黄、 舌红、苔黄燥、脉滑,痤疮经久不愈,相当于现代医学脓疱型痤疮。沈冬等认为, 此型患者热毒较重,已入里,壅遏气血形成瘀症,故治疗须重用清热解毒药物,佐 以活血化瘀之品,以三黄石膏汤或五味消毒饮化裁。方用黄芩、黄柏、黄连、栀子、 石膏、野菊花、金银花、蒲公英、紫花地丁、当归、桃仁、红花。此外,徐爱琴等 认为,部分病人辨证属肝经郁热型,多见于脓疱性痤疮或月经前痤疮,并兼见心烦 易怒、乳房胀满,治以疏肝解毒之法,以丹栀逍遥散加减。吴成山经临床观察发现 一些病人皮疹以颊颏部为主,丘疹点不大,但常会连成片状,分界不明显,色暗红, 脓疱较少或无,经期症状常加重,可伴五心烦热,颧红,舌红、少苔,脉细数。辨 证为阴虚火旺型,治疗宜滋阴清热,方选知柏地黄汤加减。 ..专方验方针对女性痤疮,张小梅认为女子以肝为先天,肝肾同源,肝阴 不足,肝火偏旺,郁于表皮而发痤疮。同时肝肾阴血不足则冲任失养不调,出现痛 经、经前乳房胀痛、经期及周期失调等,并伴随面部痤疮随月经周期而发”治疗以疏 肝滋阴、调节冲任兼以清肺?血之法。基本方以柴胡疏肝散和二至丸加减,药物组 成为柴胡,郁金,知母,白芍,女贞子,旱莲草,牡丹皮, 生地,鱼腥草,甘草.熊晓刚用自拟痤疮煎治疗寻常痤疮例,药物为 金银花、连翘、桑白皮、黄芩、茵陈、虎杖、丹参、赤芍、山楂各,蒲公英、白 花蛇舌草各加减;油脂较多者加生薏苡仁,生白术、泽泻各:脓疱多者 加紫花地丁、野菊花、大青叶各;大便干结者加大黄:伴痒者加地肤子、苦参 ‘ 第页共页滑火消痤平疰颗粒的开发性研咒 各;女性月经失调者加香附,益母草:有囊肿结节瘢痕者加夏枯草, 桃仁、红花各,穿山甲,每日剂,水煎分次服,周为个疗程,连续服 药疗程后复查并判定疗效。结果:治愈例.%,好转例.%,未愈 例.%,总有效率为.%。嗍 .中药外治 痤疮病变部位主要在皮肤,痤疮的外治药物多具有清热解毒,?血化瘀,祛风杀 虫,消肿散结等功效,涂于患处,可使药力渗透肌肤,直达病所。因此中药外治治 疗痤疮,具有疗效确切、使用方便且副作用小等优点,目前外治剂型主要有: ..洗剂可应用于各种类型皮肤.黄霖用自拟如意洗剂外治痤疮例,药 物选用如意草、毛麝香、大叶桉、金银花、薄荷等,经煎煮、浓缩,加减,制成浴 液状外洗剂,入瓶备用。方法:用与体温相仿的温水将局部清洗,取如意洗剂适量 倒在手心上,充分摩擦于脸部、背部、胸部等痤疮发生部位至起泡沫,揉擦约, 再用温水冲洗局部泡沫和污垢,后用冷水将局部冲洗后擦干,外搽“连石散黄 连、 炉甘石、薄荷、冰片、密陀僧等研末调糊状,早、晚各次,总有效率为%。 ..面膜游曦闽治疗痤疮例,用大黄、白芍、赤芍、马齿苋、浙贝母、 硫黄、土茯苓及三七研末,制成面膜敷面,每周次,有效率.%。 ..软膏适用于敏感或干性皮肤,冯永芳等采用自制寻常痤疮膏治疗寻常痤 疮例,有效率为.%。痤疮膏中含有大黄、苦参、黄连、白芷、僵蚕、白及、 桃仁、茯苓等,按软膏制备工艺制成后备用。 .。霜剂宋延生等用自制天然抗粉霜治痤疮例,主要成分为丹参酮、紫 草素、牡丹皮酚、多糖、白僵蚕提取液,按霜剂工艺制作。早晚各次外涂患 部, 连用周,总有效率.%。 ..凝胶此剂型稳定性、涂展性、保湿性较好,适用于油脂较多的痤疮。管 英等用自翻痤疮凝胶,治疗例,其中非炎性痤疮例,炎性痤疮例。结果非 炎性痤疮总有效率为.%,炎性痤疮总有效率为.%。 ’ .内外兼治 王国安用自拟中药方内服配合外洗的方法治疗痤疮例,方药为白花蛇舌草、 金银花、丹参各,黄芩、苍术各,苦参,连翘,水煎服,前煎早 晚各服次,第煎搽洗热敷患处约,后加热重复次.结果:痊愈例, 占.%:显效例,占,%:好转例,占.%:无效例,占.%。 第页共页陕西中医学院届硕士学位论文 西医对痤疮的认识及治疗 痤疮,俗称粉刺,是一种常见的毛囊、皮脂腺慢性炎症疾病,好发于青春期。 其发病因素很多,一般认为主要是青春期雄性激素分泌增多,引起皮脂腺肿大,同 时使毛囊、皮脂腺导管角化栓塞,皮脂淤积于毛囊形成脂栓,即人们所说的粉刺。 在无氧环境下,痤疮丙酸杆菌等厌氧菌大量增生、繁殖,产生溶脂酶,分离皮脂产 生游离酸,刺激毛囊引起炎症,致使毛囊壁损伤破裂,淤积的皮脂进入真皮内,从 而引起毛囊周围程度不等的炎症反应。此外,遗传、内分泌障碍、多脂多糖及刺激 性饮食、高温及某些化学因素,对其发生、发展也有一定作用。 .维酸类治疗维酸具有角质溶解作用,不仅可以清除成熟粉刺,而能抑 制微粉刺,预防复发维持痤疮缓解状态:有中度抗炎作用能治疗炎性皮损:能提高 其他合用抗痤疮药物的穿透性。口服颐维酸有严格的使用指针,研究表明间隙 给予中等量的顿维酸可提高痤疮患者的依从性及减少药物用量,是对有选择的 成人痤疮患者中剂量疗法的经济替换疗法,但应用时应注意其新发现的副作用精神 错乱和对骨的影响。外用维酸一线治疗药物,阿达帕林达芙文凝胶是轻中度 粉刺性痤疮和炎症痤疮的首选药物。但应注意当早期应用,除单独使用外,对于, 级痤疮,常与外用抗生素联合治疗。外用局部药物的刺激性也是不可忽视的。从理 论上讲限制药物移人表皮深层可减少全反式维酸的刺激,而目前使用的,%全 反式维酸凝胶刺激性比较小。 .抗微生物治疗主要通过抗菌,抗炎和免疫调节来实现其作用。内服药米诺环 素是治疗痤疮的最有效的抗生素之一,但其也有潜在的危险。包括:大脑假瘤、色 素沉着、自身免疫性肝炎、血清病性反应、药物性狼疮;内服药阿奇霉素是红霉素 的一甲基衍生物,与特非那丁及茶碱类药物无相互作用,胃肠道副作用小,引起念 珠菌性阴道炎的发生率低,具有较高的安全性,阿奇霉素已成功地用于治疗痤疮; 用于痤疮的外用抗生素有过氧苯甲酰、红霉素、克林霉素、四环素,但应与维酸 类药物同用,不宜单独使用,不应与口服抗生素同用。 .激素治疗诺孕脂一决雌醇是首先经过同意的用于治疗痤疮的低剂量口服 避孕药,口服避孕药明显的副作用为头痛、恶心、出血、体重增加及胸部触痛,少 见严重的副作用包括高血压、血栓性静脉炎及肺栓塞。雄激素在痤疮发病过程中起 重要辅助作用,并可使病情加重,但不是根本原因。研究表明,抗雄激素的系统口 第页共页清火消痤平痤颗粒的开发性研究 服疗法适用于严重或顽固性痤疮患者,尤其是对系统应用抗生素或一顺维酸疗效 不明显或不耐受的患者,或伴有月经不调、多毛、雄激素原性秃发的患者。但因系 统用药在男性可引其难以接受的副作用,故目前多限于应用在女性。研究表明,抗 雄激素局部外用制剂多为雄激素受体的抑制剂或拮抗剂,适用于中、轻度痤疮的治 疗,具有特异性强、副作用小之优点。另外,小计量的糖皮质激素,如泼尼松/, 可抑制肾上腺皮质功能亢进造成的雄激素过高产生的痤疮。糖皮质激素短期口服用 于聚合性痤疮或爆发性痤疮。 .光疗 联合应用蓝一红光照射可通过光动力学破坏痤疮丙酸杆菌及减轻炎症反 应而对痤疮有较好的疗效且可避免的潜在放射性危害。研究显示联合应用蓝光一 红光疗效优于单纯应用蓝光。研究表明,理论上蓝光是激活痤疮丙酸杆菌主要内源 性卟啉成分的最有效的可见光波长,但其穿透深度不足,红光激发卟啉的作用较差, 但穿透组织更深,此外,灯源价格便宜,每日照射分钟,无须服药,无毒,刺激 性轻微,易被患者接受。其作用机制可能是抗菌及抗炎两者的综合,除光动力学损 害痤疮丙酸杆菌外,该治疗可能直接减轻炎症反应。【】】 .联合治疗联合治疗针对座疮的不同环节,起效快,疗效强,适用于粉刺性 痤疮和炎症性痤疮。轻中度患者一般外用维酸与外用克林霉素或过氧苯甲酰等抗 生素联合使用,中重度患者为外用维酸与口服抗生素联用。实验证明,阿达帕林 可增强过氧苯甲酰对皮肤刺激,耐受性明显优于传统维酸类药物。 .对痤疮治疗不利的药物大致可分为三类::激素类:同化激素、雄激素、 皮质激素全身用和局部用、仅含孕激素的避孕药;:卤素类:溴化物、造影剂、 碘化物、含碘的液、海藻;:其它:卡马西平、水合氯醛、达那唑、丹曲林 钠、氟哌啶醇、异烟肼、锂剂、苯妥英钠、利福平、曲唑酮,这些药物可诱发或加 重痤疮的发生。【】 课题研究的依据和意义 我国开发利用中药资源的历史悠久,渊源深长;千百年来,对中华民族的生存 繁衍、兴旺发达起到了巨大的促进作用。中药资源是中国人民防治疾病、康复保健 的重要物质基础,具有很高的实用价值和丰富的科学内涵,是祖国医药学宝库的重 要组成部分。中药资源的开发、保护和利用研究,既是社会主义的经济事业,也是 人民卫生保健事业,具有明显的社会效益、经济效益和生态效益。 中药资源开发利用研究是以探求、发现、开发新药资源,利用新药资源为人类 ’第页共页陕西中医学院届硕士学位论文 防治疾病、康复保健服务的科学研究活动。中药资源开发利用从研究层次上分为: 以开发中药材与中药原料药源为主的初级基础研究;以开发中药制剂及其他天 然副产品为主的二级研究;以开发天然化学药品为主的深层次研究及利用废弃物开 发出其他有用药物和产品的综合利用研究。其涵盖了基础研究和应用研究两大范畴, 反映了中医药科学研究的基本规律和方法。本文以清火消痤颗粒为例,简述中药资 源的二级应用性研究一中药制剂的开发。 清火消痤颗粒是中国人民解放军第医院的临床经验方,一直以汤剂应用, , 通过基础研究筛选而来,由麦冬、生地、丹参、夏枯草等多味中药组成。具有清热 泻火,养阴生津,祛瘀散结的功效,经过多年临床治疗验证,能有效治疗痤疮,且 毒副作用小。得到广大患者的一致好评。纵观目前临床上所使用的治疗上述疾病的 中药制剂,品种较多、疗效也较好的是丸剂和颗粒剂,但丸剂因有一定的苦味和不 适,病人的依从性差,且使用不太方便。另外,丸剂口服后,由于其溶出时间长, 药物在溃疡面上滞留时间短,生物利用度较低,难以发挥持久的药效,需反复多次 给药。而颗粒剂具有设备简单、生产方便、成本低、生物利用度高、质量易于控制 等优点。有鉴于此,我们认为非常有必要开发既能克服诸多西药之缺陷,又能弥补 同类中药之不足的新一代口服良药。 本课题选题角度独特,具有一定的科学性、创新性、可行性及效益性。处方组 成精练,药材易得,为研究提供了坚实的物质基础。总而言之,该项目不但为临床 上提供一种安全高效的治疗痤疮疾病的中药新药,又由于病员广阔,临床需 求量大, 还可以带来巨大的经济效益,并且可使祖国医学对该病的认识理论得到进一 步的提 高和验证。 第页共页清火消痤平痤颗粒的开发性研究 第一部分处方组成和文献参考 、处方 生 麦 冬 地 丹 参 夏枯草 等多味中药 共制成颗粒 功效:清热泻火,养阴生津,祛瘀散结。瞄床主要用于痤疮的治疗。 、组方药物的研究状况 .麦冬 中药麦冬是百合科沿阶草属植物麦冬 . .的干燥块根,始载于《神农本草经》,列为上品,历代本 草都有记载,亦是历版《中国药典》收载的品种。根据产地命名,产于浙江的 麦 冬为杭麦冬浙麦冬,产于四川的麦冬为川麦冬,两者栽培年限有一定差别。中 医理论认为该药味甘、微苦,微寒,归胃、肺、心经,具有养阴生津,润肺清心 之功效,临床上常用于肺燥干咳,虚劳咳嗽,津伤口渴,心烦失眠,内热消渴, 肠燥便秘等病症。 麦冬含多种化学成分,自年报道麦冬块根中含维生素类化合物以来,先 后从麦冬中分离出糖类、皂昔、黄酮等化合物。国内外研究表明,麦冬主要化学 成分为甾体皂苷、高异黄酮类、多糖、氨基酸等。药理作用研究表明,麦冬具多 种药效功能,主要表现为对中医“血瘀”证的内皮细胞的保护作用,并同时抑制平滑 肌细胞的增殖;抗心肌缺血、抗血栓形成、耐缺氧、抗衰老、抗肿瘤、免疫调节、 降血糖等方面。【】麦冬对药理作用主要有:?对心血管的影响:麦冬提取物具有 明显的抗心肌缺血作用,并呈现一定的量效关系【】?免疫调节作用:麦冬多糖能 显著增加小鼠脾重量、增强小鼠碳粒廓清作用,刺激血清中溶血素的产生,对抗 环磷酰胺和钴照射引起的白血球下降【 。?降血糖作用:麦冬多糖对正常小鼠和 试验性高血糖均有降低作用,药效持久无副作用【】?抗疲劳、抗衰老作用:小鼠 游泳试验表明麦冬氨基酸和多糖具有一定的抗疲劳作用。麦冬水煎剂能明显提高 模型大鼠的红细胞活性,血清蚺及红细胞免疫功能,显著降低血清含量, 表明麦冬具有一定的抗衰老作用。 第页共页,一陕西中医学院届硕士学位论文 .生地 生地黄又叫干地黄,为玄参科植物地黄 的干燥块根。始载于《神农本草经》,列为上品,为常用的补益中药,临床 应用极为广泛,历代本草都有记载,亦是历版《中国药典》收载的品种。主产于河 南省,以河南温县,博爱、孟县等地产量最大,质量最佳。秋季采挖,除去芦头及 须根,洗净鲜用者习称“鲜生地;将鲜生地徐徐烘焙,至内部变黑,约八成干,捏 成团块,习称“生地”。中医理论认为鲜生地性大寒,味甘、苦,清热?血,润燥生 津;生地性寒,味甘、苦。清热养阴,?学止血。 传统医学认为地黄具有滋阴、补血、生津的功效,现代药理学实验发现它几乎 可以作用于人体的各个系统。生地黄活性成分几乎全在其水提物中,主要活性部位 为具有改善心血管系统功能作用的环烯醚萜苷类和增强免疫功能作用的地黄多糖。【】 【】 地黄含有多种苷类成分,其中以环烯醚萜苷类为主,现在已分离鉴定了二十多 种苷,如梓醇、二氢梓醇、乙酰梓醇、桃叶珊瑚苷,密 力特苷,筋骨草苷、地黄苷、、、等。环烯醚萜类在鲜地黄、干地黄及熟地 黄中含量差异显著。环烯醚萜苷类成分为主要活性成分,也是使地黄变黑的成分。 此外,地黄中还含有糖类,如水苏糖、棉子糖。葡萄糖毛蕊花糖及地黄多糖。 .是地黄中兼具免疫与抑瘤活性的有效成分。水苏糖含量最高,为.%. %,并含有余种氨基酸和多种无机离子及微量元素。【】 .丹参 化学成分 丹参为唇形科植物丹参 .的干燥根及根茎。味 苦,性微寒,归心、肝经,具有活血化淤、清热解毒、除烦、镇痛、通经、镇静安 神、?血消肿之功效;现代医学认为,丹参具有扩张冠状动脉,增加冠状动脉血流 量,防止心肌缺血和心肌梗死,加快微循环血流,促进毛细血管网开放,抑制心肌 收缩,减少能量消耗,扩张血管,降低胆固醇、血脂,抑制凝血,激活纤溶,稳定 红细胞膜,提高缺氧耐受力,增加肝脏血流量,保护肝损伤细胞,抗肝纤维化,抑 制中枢神经系统以及消炎抗菌等作用。 丹参的化学成分分为脂溶性和水溶性两部分,前者为丹参酮类,主要有丹参酮 、丹参酮 、丹参酮、隐丹参酮、羟基丹参酮、丹参羟基酯、二氢丹参酮以 第页共页 。? ? 清火消痤平痤颗粒的开发性研究 及异丹参酮、异丹参酮、异隐丹参酮、二氢异丹参酮;后者主要为酚酸类,包括丹 参素、原儿茶醛和丹参酸甲、乙、丙。 脂溶性成分最主要的有三种:丹参酮、丹参酮 和隐丹参酮,其中丹参酮 含量相对较高,约为药材的.~.%。丹参中水溶性成分为原儿茶醛、丹参素和 丹酚酸等。其中丹酚酸活性最强,丹酚酸的含量约为:丹参药材的.~.%; 丹酚酸的含量较高,可达%,为丹参水溶性成分中最主要的活性成分。 丹参药理作用有:抗心肌缺血:丹参用于治疗冠心病心胶痛有明显疗效。实 验研究表明,用丹参制备的煎剂、注射液、丹参素等对垂体后叶素引起的家兔或大 鼠心肌缺血均有不同程度的保护作用, 能改善心电图缺血性变化。丹参中有效成 份丹参酮 磺酸钠可扩张侧支血管,改善缺血区血流量,可抑制心肌收缩力,降 低窦房结的自律性,能明显缩小心肌梗死范围。丹参抗心肌缺血作用主要通过:? 扩张冠脉, 增加心肌血氧供应;?减慢心率, 抑制心肌收缩力,扩张外周血管, 减轻心脏负荷, 降低心肌耗氧量。?抗自由基,抗脂质过氧化,保护心肌。 抗脑缺血:丹参对缺血后脑组织有明显的保护作用,使缺血后脑组织及线 粒体、粗面内质网等超微结构的病理改变明显减轻。据刘庆新等对丹参功效的观 察, 得出结论:丹参对血管内皮细胞有保护作用,可以减少脑出血后脑水肿。丹 参抗脑缺血可能与其降低脑组织的生成,抑制缺血时脑组织兴奋性氨基酸释 放, 改善脑组织微循环等作用有关。 抗血栓:丹参抗血栓形成与其抗凝血及抑制血小板聚集等作用有关。实验 研究表明,丹参中的有效成份丹参酮 磺酸钠、丹参素能抑制体外血栓形成,通 过抑带诱导的血小板聚集,使血小板黏性降低。通过抑制磷酸二酯酶的活力, 增加血小板中从而抑制血小板的聚集。 . 改善微循环:现代医学研究表明,丹参有增快血流的作用,能使外周血管 血流加速,毛细血管网开放数目增加,扩张收缩状态的肠系膜微动脉,加快血流 流速,消除肠系膜的血液瘀滞,促进侧支循环的建立,并能抑制凝血、激活纤溶。 进一步研究表明,丹参是通过影响脯氨酸和赖氨酸羟化酶的活性来抑制人体皮肤 成纤维细胞合成胶原的, 但不影响及非胶原蛋白的合成,丹参对胶原合成的 抑制率与剂量呈正相关。 促进组织的恢复与再生:丹参促进肝组织的恢复与再生作用尤为显著。丹 参通过降低。肝损伤的血清谷丙转氨酶,明显减轻肝坏死和炎症反应,减轻 第页共页陕西中医学院届硕士学位论文 。所致肝细胞膜流动性降低、抑制脂质过氧化反应,促进肝细胞再生时的 合成的细胞分裂增殖过程,具有一定的促进肝细胞再生作用。丹参素通过降低肠源 性内毒素水平,改善肝脏微循环障碍,从而减轻急性重型肝损伤。丹参促进骨折愈 合的作用环节包括:促进骨折组织中钙沉淀,骨折部分骨痂形式提前,骨生成细胞 分布部位及数量增加;成纤维细胞除有外形改变外,细胞的蛋白质合成更为旺盛, 细胞的正常变性过程也加快,细胞外胶原纤维增多,并进入成纤维细胞的胞质内,增 多的破骨细胞出现在不同的骨痂部位,促进骨的改建。丹参能促进骨细胞样细胞成 熟,分泌胶原性物质的碱性磷酸酶,并使钙盐在胶原基质上的沉积,形成骨小结节。 丹参还有促进皮肤切中愈合的作用。 镇静、镇痛:丹参能抑制丘脑后核内脏痛放电,表明其有一定的镇痛作用。 丹参水提液能明显抑制小鼠自主活动,其作用与剂量大小成正比,与眠尔通和氯丙 嗪合用能增强抑制效果,能增强戊巴比妥钠的催促效果,由此可见,传统医学认为 丹参具有清心除烦的功效确有一定道理。 抗肿瘤作用:丹参中的有效成份丹参素在无血清培养液中,可显著抑制胃腺 癌细胞株的生长及繁殖,其机制可能与阻断肿瘤细胞内胆固醇合成有关。丹参 酮是丹参的主要抗肿瘤活性成份,通过对各种肿瘤细胞杀伤、诱导分化及诱导调亡 等机制发挥抗肿瘤作用。诱导分化治疗恶性肿瘤与传统化学治疗的根本区别在于它 不杀伤肿瘤细胞,而是诱导肿瘤细胞分化成为正常细胞或接近正常细胞,对正常细 胞无杀伤作用,且少有骨髓抑制等副作用。丹参酮抗肿瘤作用可能是诱导肿瘤细胞 分化,同时诱导凋亡或诱导肿瘤细胞分化成熟,最终走向凋亡。 .夏枯草 夏枯草英文名为,为唇形科夏枯草属植物夏枯草 .的干燥果穗。始载于《神农本草经》,列为下品,因“此 草夏至后即枯”得名,别名有乃东、铁色草、麦夏枯、灯笼头:大头花、棒槌草、 燕面等,是传统中药之一,一般取其干燥果实入药。夏枯草属植物全球有种,广 泛分布于欧亚的温带地区、非洲西北部及北美洲,我国产种及变种,主产于江 苏、安徽、河南等省。中医理论认为其昧苦、辛,性寒、有清热明目、泻肝火、清 热散结等功效。可用于治疗头痛眩晕,口眼歪斜,筋骨疼痛,目赤肿痛,畏光流泪 乳腺炎,乳癌,高血压有降压、利尿作用,淋巴结核,浸润性肺结核,单纯性甲 状腺肿,腮腺炎,急性黄疸型传染性肝炎血崩,带下,猪、牛、羊传染性结膜炎、 第页共页清火消痤平痤颗粒的开发性研究 角膜炎等。另外对痢疾杆菌也有抑制作用。瞄】 夏枯草含有多种化学成分:三萜类化合物:夏枯草属植物中含有多种三萜类 成分,主要为齐墩果烷型、乌索烷型和羽扇烷型三萜。这些三萜类化合物在夏枯草 中以齐墩果酸和熊果酸的含量最高,夏枯草的药理作用与这些成分有明显的相关性。 甾醇类化合物。黄酮类化合物:等从夏枯草属植物中分离到个黄酮类化 合物,主要为黄酮、黄酮醇、花青素及其苷。苯丙素类化合物:该化合物在夏枯 草属植物中的报道较少,除顺式咖啡酸、反式咖啡酸和年日本学者奥拓南等分 离得到的迷迭香酸外,王祝举等从夏枯草中还分离到了甲基迷迭香宁、乙基 迷迭香 宁、一丁基迷香宁、一丁基迷迭香宁等多种化学成分瞄】。香豆素类化合物:从 该属植物中分离到的香豆素类成分较少,目前只有前苏联学者从夏枯草中分 得个香豆素类化合物,经理化常数测定及紫外、红外光谱分析推断为伞形花内酯、 莨菪亭和七叶亭。有机酸:夏枯草所含的有机酸类成分主要有酚酸和长链脂肪酸。 挥发油:主要成分为,一桉油精、一蒎烯、月桂烯、乙酸芳樟酯、一水芹烯 及芳樟醇,其中,一桉油精、一蒎烯占总挥发油含量%以上。糖及其他成 分:夏枯草中尚含有维生素、、、,水溶性无机盐%是氯化钾、生物碱、 树脂、苦味质、脂肪油等。 夏枯草的药理作用主要有: 降压及降血脂作用:临床上,夏枯草复方制剂用于治疗高血压病取得了良好的 效果。李宇航采用正常家兔、大鼠急性实验性肾型高血压大鼠观察三草降 压汤夏枯草、益母草、龙胆草的降压作用。结果表明:该方药对家兔降压作用 肯定,并初步表现出一定的量效关系.,对大鼠用药前后的血压比较, 降压作用有显著的统计意义.,,能明显抑制的血压升高,与生理盐水对 照组对比,具有统计学意义.或.。另有报道指出,夏枯草还可防止动 脉粥样硬化。梁兴伦通过乳幼大白鼠、糖尿病家兔模型,观察四安胶囊夏枯 草、 水蛭、黄连等对血脂代谢的影响,发现四安胶囊可调节多种动物血脂比例,有降 血脂作用。 抗菌、抗病毒作用:夏枯草水煎剂有广谱抗菌活性。体外实验表明,夏枯草 煎剂对痢疾杆菌、伤寒杆菌、副伤寒杆菌、霍乱弧菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、变形 杆菌、鼠疫杆菌、炭疽杆菌等革兰氏阴性杆菌及葡萄球菌,或溶血性链球菌、 白喉菌、肺炎双球菌、入型结核茵等革兰氏阳性球菌有较强的抑制作用、其水 第页共页陕西中医学院届硕士学位论文 煎剂:在体外对革许兰氏癣菌、奥杜盎氏小芽孢黄癣菌等皮肤真菌均有不同程度 的抑制作用,同时对结核杆菌亦有抑制作用。 抗炎及免疫抑制作用:蒋岩等研究发现,用夏枯草注射液皮下注射,可使动物 胸腺、脾脏明显萎缩,肾上腺明显增大,腹腔注射后,,血浆皮质醇水平显著升高。 此表明夏枯草可能是一种免疫抑制剂,对某些由于免疫过程引起的病理损伤可能具 有潜在的治疗意义。马得恩动物实验结果表明,夏枯草对早期炎症反应有显著的抑 制作用,其抗炎作用与肾上腺皮质中糖皮质激素合成、分泌的加强有密切的 关系。 夏枯草除了能抑制炎症反应的非特异性免疫机能外,对特异性免疫也表现出相当强 的抑制作用。 降糖作用:刘保林等通过实验证明,夏枯草醇提取物可降低正常小鼠和四氧嘧 啶糖尿病模型小鼠血糖水平,并可改善糖耐量,增加肝糖元合成,其机制可能与修 复细胞,使胰岛素分泌正常或增加组织对糖的转化利用有关。冯玛莉等研究发现 夏枯草醇提取物能显著降低糖尿病大鼠尿蛋白、血清尿素氮、肌酐含量,其机制可 能通过抑制肾脏醛糖还原酶活性,减少持续性高糖造成的山梨醇蓄积和肌醇丧 失,以维持组织细胞的正常生理功能。】 抗肿瘤作用:夏枯草的抗肿瘤作用研究由来已久。等】研究发现, 夏枯草属植物对苯并芘,【】、,一二硝基苯并芘,一 ,,一和,一二硝基荧葸,,, 一的致癌、致突变作用有明显的拮抗作用。有体外癌细胞凋亡实验提示,单 味药夏枯草经水煎醇提法制成夏枯草注射液能诱导癌细胞的凋亡。有体 内抑瘤实验提示,夏枯草中所含的熊果酸及其衍生物对、和人体肺肿瘤 细胞一均有显著细胞毒作用。另有研究表明,将夏枯草注射液由静脉给药改 为 胸腔内注射,研究其治疗癌性胸水和抑制胸水再生的机理,结果显示其能有效地促 进胸腔纤维化形成,抑制胸水再生。周荣耀等应用夏枯草注射液胸腔内注射治疗支 气管肺癌胸水患者例,结果疗效优于榄香烯,明显优于顺铂和化疗组 .,且夏枯草组副作用明显小于榄香烯和化疗组.。【】 ?其他作用:经药理研究证明,%夏枯草煎剂可使离体兔肠蠕动增强,以十二 指肠最为敏感。夏枯草还可使家兔离体子宫出现强直收缩。此外,其对 疾病早老性痴呆也有一定的疗效。 第页共页清火消痤平痤颗粒的开发性研究 第二部分清火消痤颗粒制备工艺实验研究 剂型选择 清火消痤颗粒是中国人民解放军第医院的临床经验方,一直以汤剂应用, 经过多年临床治疗验证,能有效治疗痤疮,且毒副作用小。具有清热泻火,养阴生 津,祛瘀散结的功效,得到广大患者的一致好评。由于汤剂口服剂量大,服用疗程 长,且贮存、携带不便,不适应现代生活的需要,须根据临床用药的需要及方中药 味的性质来选择合适的剂型。 因本方日服剂量相当于原生药材克,不含有挥发性和毒性物质的药材,服用 量也适中,可考虑制成硬胶囊、普通片剂和颗粒剂等。首先做预试,将原处方药物 分两部分提取:一部分醇提,离心除杂;另外一部分水煎,醇沉除杂,合并、浓缩 干燥后,求得其出膏率为.%。患者每日服用的浸膏量:.%.。以 ./每片粒计,每天需服用:.?.?.片粒,在没添加任何辅料的情 况下已经服用量过大,故转而考虑颗粒剂。若将服用法定为每天两次,一次一袋, 每袋克,则还有:..可作为添加的辅料重。若采用喷雾干燥、干 法制粒的新技术,则完全可以将辅料用量控制在要求的范围内。所以,最后将剂型 确定为颗粒剂。 并且根据临床上用药特点和处方药味较多,药物的有效成分及作用机理研究不 够完善的特点,我们选择了颗粒剂剂型。这样既能够保持中医药的传统用药特色, 又能最大限度的提求和保留处方中药物的有效成分,发挥有效成分的综合治疗作用、 确保临床疗效。而且颗粒剂还具有以下优点: 、药物吸收快,生物利用度较高。 、加入矫味剂后,掩盖了药物的苦味.便于服用。 、固体剂型,药品稳定性高;体积较小,妥善包装后稳定性较好。有利于运输、 储藏、携带。 、与片剂、胶囊剂等其他常用固体剂型相比,容纳药物的量较大。 制备工艺路线的拟定 。主要参照颗粒剂工艺进行拟定,基本工艺路线如下: 中药饮片三提取液二竺药液?竺浓缩液二三浸膏粉竺翌 第页共页陕西中医学院届硕士学位论文 颗粒竺兰竺兰成品 药物分组提取的依据 从处方中的有效成分来看,既有水溶性成份,又含脂溶性成分,文献又表明各种 成分均具有与疗效相关的药理作用。如下: 脂溶性成分:丹参中的丹参酮类、夏枯草中的萜类及其苷类和麦冬中的皂苷等 多种脂溶性成分。 水溶性成份:丹参中的丹参酚酸类、生地黄中的环烯醚萜苷类和多糖类等多种 水溶性成分。 由于方中的有效成分中生地等药含有水溶性成份;丹参、麦冬和夏枯草等药含有 脂溶性的成分,其中丹参和麦冬中又含有水溶性的成分。根据处方中各药材功能主治 和有效化学成分的理化性质,既要保持中医药的传统用药特色,又最大限度 的提取和 保留处方中药物的有效成分、发挥有效成分的综合治疗作用,确保临床疗效 将药材分 成两组,采用不同的工艺处理,以适应剂型、生产和临床需要。 生地等药采用水提法。 丹参、夏枯草、麦冬等药采用醇水双提法。 药材的鉴定与前处理 药材饮片由解放军第医院中医药研究所提供,均经过生药鉴定。选择无虫蛀 霉变的新鲜干燥品,全符合《中国药典》版一部项下相关规定。 提取工艺条件筛选 .醇提药材吸醇率试验 按日服用的生药量称取醇提药材:丹参、麦冬和夏枯草等共份,.加%乙醇 倍量,密闭,每半小时观察一次,至药材透心,滤过,则前后两次乙醇的体积差 除以 药材总重即为醇提药材的吸醇率。结果见表; 表醇提工艺吸醇率试验 ’从上表可知,醇提药材平均吸醇率为%约为倍,因此,第一次回流提 . 取时应多加倍量的醇。 第页共页清火消痤平痤颗粒的开发性研究 .醇提工艺条件筛选 由于丹参、麦冬和夏枯草等药中的有效成分在水中难溶,而可溶于乙醇中, 故采 用乙醇回流的提取工艺,选用“正交试验表,考察乙醇浓度、提取次数、乙醇用 量及提取时间个因素的影响,见表; 表乙醇提取的因素~水平 ..样品的制备 按处方量称取丹参、麦冬、夏枯草等药共份,分别按表条件进行回流提取, 收集醇提液,减压回收乙醇,清膏加蒸馏水溶解并定容至,备用。 ..评价指标 根据处方药物的成分及剂型要求,选用丹参酮 含量和浸膏得率为评价指标, 进行综合评价。 浸膏得率作为选择剂型的参考指标,影响除杂方法的选择,是颗粒剂日服量、单 服量及包装规格确定的依据。因此,必须以干膏收率作为评价指标之一,但其与疗效 强度不成量效关系,故综合评价时作为次要指标;而丹参中丹参酮为其指标性成 分,作为主要评价指标。. 浸膏得率:精密吸取正交各样品液,分别置于已干燥至恒重的蒸发皿中,水 浴挥干,残渣于干燥小时,取出,置于干燥器中放置半小时,称重’计算即 得。 丹参酮 的含量测定:按照高效液相色谱法《中国药典版一部附录 有关规定进行测定。 色谱条件:色谱柱 ,.;柱温:室温;流速: /;最大吸收波长: 流动相:甲醇.水:。理论板数以丹参酮 ?峰计算不低于。. 对照品溶液的制备:精密称取丹参酮对照品批号:..‘. 第页共页陕西中医学院届硕士学位论文 用甲醇定容于棕色量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,得到浓度为./ 的溶液。 供试品溶液的制备:取正交各样品液,加甲醇定容至,摇匀即得。 检测波长的选择:取丹参酮 的水溶液于紫外分光光度计上绘制紫外吸收光 谱,波长范围~,根据测定结果,最大吸收波长为。 标准曲线及线性范围:分别精密吸取对照品溶液,, ,, 进样, 按上述色谱条件测定峰面积,结果见表。 表标准曲线结果 峰面积 丹参酮 . 锏蹦贷 四 . 舛善熨 莩 . ?饼轮猫朋陀 . 侈啪? 舶 . 冯槲临沁乃玎 以峰面积为纵坐标,丹参酮 含量为横坐标计算回归方程为: .,相关系数.,线性范围为. 。标准曲 线见图。 图 丹参酮标准曲线及线性范围 测定法:精密吸取供试品,对照品各注入液相色谱仪,测定,即得。 ..试验结果,见表。 表醇提工艺条件的正交试验表 第页共页清火消痤平痤颗粒的开发性研究. . .. .. . . .. .. .. . . . . . . ‘ . . 丹 参 . . . . 酮 . . . . 含 且 里 . . . . 。 . 。 。 . . . . 浸 膏 得 . . . . 率 . . . . 表醇提工艺正交试验丹参酮 含量方差分析表 表醇提工艺正交试验浸膏得率方差分析表 变异来源 误差 . 。 第页共页陕西中医学院届硕士学位论文 . ., 由表可知,将离差平方和最小的列作为误差估计,影响丹参酮 含量因素 顺序为,因素有显著性差异。影响有效成分丹参酮 收率的主要因 素中,,,。组合的提取液 丹参酮含量最高; 由表可知,将离差平方和最小的列作为误差估计,影响浸膏得率因素顺序为 ,因素有显著性差异。影响浸膏得率的主要因素中, , , 。组合的浸膏得率最高; 综合来看,由于、因素对醇提影响经统计学处理无显著差异,考虑到生产中 节约能源、降低成本、缩短生产周期的原则,选择醇提工艺为:,即取醇提 药材加%乙醇倍量,回流提取次,首次,第次和第次各.。 ..提取工艺验证 为了考察优选出的工艺的合理性,以最佳提取工艺提取制备供试药材, 采用丹参酮和浸膏得率为指标进行考察。测定方法,同..项 测定结果见表。 表 工艺验证结果 从表验证结果可知,验证结果与最佳工艺结果基本一致,说明醇提工艺条件 基 本稳定,具有重现性。 .水提药材吸水率试验 按一同服用的生药量称取水提药材:生地等药份,加水倍量浸泡,每半小 时观察一次,至药材透心,滤过,则前后两次水的体积差除以药材总重即为水 提药材 的吸水率。结果见表: 第页共页清火消痤平痤颗粒的开发性研究 表水提工艺吸水率试验 从上表可知,水提药材平均吸水率为%约为倍,因此,第一次加水煎 煮提取时应多加倍量的水。 .水煎煮工艺条件筛选 由于醇提药材中仍含有水溶性的有效成分,故采用合并两药渣,水回流的提取工 艺。选用正交试验表,考察提取次数、加水量、提取时间个因素的影响, 见表。 表药材水煎工艺的因素一水平 ..样品的制备 按处方量称取水提取和醇提后药材共份,分别按表条件进行回流提取,收 集水提液,减压浓缩并定容至,备用。 ..评价指标 根据处方药物的成分及剂型要求,选用梓醇和浸膏褥率为评价指标,进行综合评 价。 浸膏得率作为选择剂型的参考指标,影响除杂方法的选择,是颗粒剂日服量、单 服量及包装规格确定的依据。因