对乙酰氨基酚的鉴定结构确证与含量测定

对乙酰氨基酚的鉴定结构确证与含量测定 1、实验目的 （1）掌握对乙酰氨基酚的鉴定的方法 （2）了解对乙酰氨基酚结构确证的过程 （3）运用仪器分析手段对对乙酰氨基酚进行含量测定 2、实验原理 （1）对乙酰氨基酚（）为白色结晶或结晶性粉末；无臭，味微苦。在热水或乙醇中易溶，在丙酮中溶解，在水中微溶。熔点168-172℃。对乙酰氨基酚是临床常用的解热镇痛药物，且毒副作用小，较适合儿科患者使用。已成为全世界应用最广泛的的药物之一，是国际医药市场上头号解热镇痛药。 （2）以一定浓度的对乙酰氨基酚溶液充分水解全部生成对氨基酚溶液，对氨基酚溶液在碱性条件下与亚硝基铁氢化钠试剂作用，生成蓝色配位化合物。利用721 － 分光光度计测定其波长确定最大吸收，并通过分光光度计进行条件优化，依据比尔定律绘制曲线。通过标准曲线法求得对乙酰氨基酚的浓度，从而求得对乙酰氨基酚的含量。 （3)取对乙酰氨基酚溶解于流动相后于200 ~ 400波长范围扫描, 结果在250的波长处有最大吸收, 故选择此波长作为测定波长。对乙酰氨基酚易溶于热水中, 用温水浴溶解15分钟以上时对乙酰氨基酚已全部溶解。以甲醇- 水- 磷酸( 22 - 78- 0. 1) 为流动相, 能使对乙酰氨基酚得到很好的分离。采用外标法，用对乙酰氨基酚标准溶液作为对照品，求得样品对乙酰氨基酚的浓度，从而求得对乙酰氨基酚的含量。 三、实验过程 （1）鉴定 ①本品的水溶液加三氯化铁试液，即显蓝紫色。 ②取本品约0.1g，加稀盐酸5ml，置水浴中加热40分钟，放冷；取0.5ml，滴加亚硝酸钠试液5滴，摇匀，用水3ml稀释后，加碱性β-萘酚试液2ml，振摇，即显红色。 ③本品的红外吸收图谱应于对照的光谱一致。 （2）结构确证 ①红外光谱图 ②核磁共振氢谱 （3） 含量测定 ①紫外分光光度法 3.1.1溶液的制备 Na2CO3溶液的制备 准确称取Na2CO3 5. 3035 g，置于1000 mL 容量瓶中，加纯水标定至刻度，摇匀。 3.1.2对乙酰氨基酚溶液的制备 准确称取对乙酰氨基酚标准品0. 1023 g，置于100 mL 的烧杯中，加浓盐酸10 mL，纯水10 mL，在70 ℃水浴加热75 min，冷却至室温，将水解液转移到1000 mL 的容量瓶中。用Na2CO3溶液稀释至刻度，摇匀。 3.1.3 显色剂( 1%亚硝基铁氰化钠) 的制备 准确称取Na2CO3 1. 0019 g，亚硝基铁氰化钠1. 0043 g，置于100 mL 容量瓶中加纯水标定到刻度，摇匀。 3.1.4实验方法 先以一定浓度的对乙酰氨基酚溶液充分水解全部生成对氨基酚溶液，对氨基酚溶液在碱性条件下与亚硝基铁氢化钠试剂作用，生成蓝色配位化合物。由图4知当络合时间超过20分钟，吸光度也不会发生较大改变，故定络合时间为20分钟。精确吸取对乙酰氨基酚溶液100 mL，放入1000 mL 的容量瓶中，加水至刻度线，摇匀，定为溶液(Ⅰ)。在752－ 分光光度计上测定波长范围，选择出最大波长利用752 － 分光光度计测定其波长确定最大吸收。在上述条件下，按实验方法改变溶液中对乙酰氨基氨基酚的加入量，测定吸光度并绘制标准曲线。精确取样品对乙酰氨基酚0.1000g，置于100 mL 的烧杯中，加浓盐酸10 mL，纯水10 mL，在70 ℃水浴加热75 min，冷却至室温，将水解液转移到1000 mL 的容量瓶中。用Na2CO3溶液稀释至刻度，摇匀。精确吸取样品对乙酰氨基酚溶液100 mL，放入1000 mL 的容量瓶中，加水至刻度线，摇匀，在752 － 分光光度计下测定其吸光度，由标准曲线求得浓度，从而求得样品对乙酰氨基酚的含量。 ②HPLC法 3.2.1 仪器与试剂 仪器 高效液相色谱仪: 高效液相色谱仪（岛津LC-10A）紫外检测器，N2000色谱工作站，反向键合相色谱柱（150mm×4.6mm），微量注射器（25μl） 试剂及试药 甲醇: 色谱纯; 磷酸: 分析纯; 水: 二次蒸馏水 对乙酰氨基酚对照品(纯度9 . 9 % ) 对乙酰氨基酚样品 3.2.2色谱条件 色谱柱: 反向键合相色谱柱（150mm×4.6mm） 流动相: 甲醇- 水- 磷酸( 22- 78- 0. 1)流速: 1.0ml/min 检测波长: 250nm; 进样量: 50μl 柱温: 35℃。 3.2.3实验方法 精密称取对乙酰氨基酚对照品10mg, 置100ml容量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀。精密吸取10ml与另一100ml容量瓶，加入流动相稀释至刻度，作为标准溶液。精密称取对乙酰氨基酚样品10mg置100ml容量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀。精密吸取10ml与另一100ml容量瓶，加入流动相稀释至刻度，作为待测溶液。在相同的色谱条件下各进两针待测液与标准液，通过峰面积求得待测液的浓度。ω（％）=10×××0.1000×M （ 样品对乙酰氨基酚的色谱峰面积  标准对乙酰氨基酚的色谱峰面积 标准对乙酰氨基酚的的物质的量浓度 M对乙酰氨基酚的相对分子量） 标准对乙酰氨基酚峰面积 样品对乙酰氨基酚的峰面积 第一次测量 第二次测量 参考文献 1.张金磊，李海龙分光光度法测定药品中对乙酰氨基酚含量【J】广州化工第40 卷第18 期2012 年9 月 2.杨静伟刘晓放王瑞红HPLC法测定外用对乙酰氨基酚凝胶中对乙酰氨基酚的含量【J】黑龙江医药VOL. 20 NO. 3 2007 3.朱炯孙会敏岳志华田颂九PL C 法测定对乙酰氨基酚栓剂中对乙酰氨基酚的含量【J】药物分析杂志Chi n J Pharm Anal ,2004 (4) 4.中国药典（2010年版 二卷）中国医药出版社 5.严拯宇分析化学实验与指导（第二版） 中国医药科技出版社 2009年8月第二版 6.郭强胜，石高旗，宋巍，许旭NMR 定量测定片剂中的对乙酰氨基酚分析测试学报【J】第31 卷第1 期2012 年1 月 7.李 锐红外分光光度法鉴别对乙酰氨基酚片中国药事【J】2007 年第21 卷第4 期