碳酸氢根(HCO3-) PEP-C法

碳酸氢根(HCO3-) PEP-C法 -项 目 碳酸氢根(HCO) 3 方 法 PEP-C法 目 录 1. 检测原理 2. 标本采集与处理 2.1 受检者的准备 2.2 静脉采血 2.3 抗凝剂 2.4 标本处理 3. 试剂 3.1 试剂 3.2 校准血清 3.3 试剂与校准血清的稳定性 4. 仪器 5. 操作 6. 计算 7. 操作性能 7.1 精密度 7.2 准确度 7.3 灵敏度 7.4 可范围 7.5 特异性 7.6 干扰 8. 参考值 9. 临床意义 附录A: 参数 1. 检测原理 2+PEPC+Mg -PEP + HCO ------------------------ 草酰乙酸 + HPO 324 MDH + --------------+草酰乙酸 + NADH + H 苹果酸 + NAD 2(标本采集与处理 2.1 受检者的准备: 病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况。孕妇应在产后或终止哺乳3个月后检验。此外，有无服用影响的药物以及采血的季节都应做相关记录。 2.2 静脉采血: 除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。 在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。 2.3 抗凝剂: 血浆使用肝素作为抗凝剂。 2.4 标本处理: 血标本室温放置30min,45min后离心分离血清或血浆，在两小时内检测完毕;如两小时内不能检测完毕，将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖2-8?保存。 3(试剂 3.1 试剂: 本科使用湖南永和阳光科技责任公司CO2试剂盒，为液体单一试剂，各组分如下: 组 成 试剂浓度 Tris缓冲液 25mmol/L，PH=6.5 Phosphoenolpyruvate(PEP) 6.3 mmol/L NADH 0.45 mmol/L PEPC 200U/L 2+Mg 8.0 mmol/L >600U/L 苹果酸脱氢酶 (MDH) 3.2 校准血清: 使用湖南永和阳光科技责任公司提供的40项校准血清。 校准频次: 空白定标:每日需做试剂空白定标。 全点定标:试剂换批号使用时或质控结果超过规定的?2SD范围，需要全点定标。 3.3 试剂与校准血清的稳定性: 原原包装试剂储存在2-8?至标签所示失效日期。试剂开瓶后，在仪器中至少可保存30天。 试剂储存在18-22?稳定28天，试剂应避免污染。试剂颜色为浅黄色，当试剂变色，按照试剂失效处 理。 多项校准血清在2-8?储存至标签所示失效日期，复溶后-20?保存，可稳定一个月，只可冻融一次， 避免反复冻融。参见校准血清。 试剂盒配备的水液在2-8?储存至标签所示失效日期，开瓶后2-8?储存避免污染，可稳定2个月。 4(仪器 KONELAB 30型号仪器。 性能:波长405nm，仪器测定吸光度的灵敏度应达到0.001ABS以上。 5(操作 样品为血清或肝素/EDTA抗凝血浆。本法为终点法。参数见后附，附录A。 试剂参数设置、定标操作以及样本检测常规操作，见仪器操作。 6(计算 A 测定 C = ———— × C o A 标准 式中:c—— 测定二氧化碳浓度，mmol/L; A—— 标本管吸光度; 测定 A—— 标准管吸光度; 标准 C—— 校准血清二氧化碳浓度，mmol/L; O 7(操作性能 7.1 精密度: 批内CV?8.0%，批间CV?10.0%。 7.2 准确度: 检测结果的相对不准确度??10%。 7.3 灵敏度: 二氧化碳浓度为:25mmol/L时，吸光度为1.3625,1.4750。 7.4 可报告范围: 血清与试剂用量之比为1:100时，测定上限为50.0g/L。 7.5 特异性: 测量值在给定值的90%-110,范围内。 7.6 干扰: 内源性干扰物为Hb1000mg/ml、TG 2000mg/ml、BIL 30mg/ml、VitC 300mg/ml对测试结果无明显 影响。 8(参考值 20.0,29.0mmol/L。 9(临床意义 碳酸氢根测定试剂盒用于定量测定人体血清中碳酸氢根的含量。通常与pH测定同时进行，用于诊断 代谢性与呼吸性的酸中毒和碱中毒。 附录A: 参数