前列康舒胶囊质量标准的研究

前列康舒胶囊质量的研究 ChineseClinicalMe~cine&Nursing?论着?No.4Apr,2004?15? 前列康舒胶囊质量标准的研究 蔡淑清丁焕民刘春梅刘爱霞 1.吉林省长春中医学院附属医院1300212.中国水利水电第一工程局总医院132200 【摘要】目的:研究中药复方制剂前列康舒胶囊的质量标准.方法:采用薄层层析法对前列康 舒胶囊中 的枸杞子,淫羊藿进行定性鉴别,并应用高效液相色谱法,对制剂中虎杖的主要成分大黄素进 行了含量测定. 结果:对枸杞子,淫羊藿进行的定性鉴别方法专属性强,重现性好,阴性无干扰.所测大黄素的 回收率为 97.78%,RSD为1.96%.结论:通过对制剂中枸杞子,淫羊藿的定性鉴别及对虎杖的主要成分 大黄素的含量 测定,以控制制剂的内在质量. 【关键词】前列康舒胶囊薄层鉴别大黄素高效液相色谱法 StudiesonQualityControlofQianlieIOmgshuCapsule CaiShuqing~,DingHuanmint,Liua衄ei,LiuAix 1TheSubsidiaryHo~italofChangchunCollegeofTCM,JilinChangchun,130021;2TheHeadHo~italofthe FirstEngineerBureauofChineseWaterConservancyandElectricity,132200 [Abstract]Objective:TostudythequalitycontrolofQianlieKangshucapsule.Method:Thequalitativei— dentificationsofWolfberryFruit,EpimediumweredeterminedinQianlieKangshucapsulewasdeterminedby TLC.ThecontentofemodininthecapsulewasdeterminedbyHPLC.Regults:Thespecificitiesandthereap— pearancesofthequalitativeidentificationsaregoodandtheblankexperimentshavenointerference.Thedetermi— nationofthecontentofemodiniswithrecoveryof97.78%andRSDof1.96%.Conclusions:Thequalitativeidenti— ficationsofWolfberryFruit,Epimediumandthedeterminationofthecontentofemodincancontrolthequalityof QianlieKangshucapsule. [I~ywords]QianlieKangshucapsule,qualitativeidentification,emodin,HPLC 前列康舒胶囊是由枸杞子,虎杖,淫羊藿等8味 中药组成的中药复方制剂.具有舒理补气,活血去 瘀之功效,临床上用于治疗急慢性前列腺炎,腰膝酸 软,尿频,会阴涩痛等症状.为控制其制剂质量,采 用薄层层析法对枸杞于,淫羊藿进行定性鉴别,并应 用高效液相色谱法对虎杖中大黄素的含量进行测 定. 1.仪器,试剂及样品 Lc一20l0A型高效液相色谱仪(日本岛津); SPD---10AVP检测器.硅胶G,硅胶GF积,由青岛海洋 化工厂生产.淫羊藿苷,大黄素对照品,枸杞子对照 药材,由中国药品生物制品检定所提供.所用试剂 均为分析纯.前列康舒胶囊,长春中医学院附属医 院自制. 2.薄层鉴别 2.1枸杞子的鉴别 取本品物lOg,加甲醇50mL,加热回流提取 1h,滤过,滤液回收甲醇至干,残渣加水20mL使溶 解,用乙醚萃取2次,每次20mL,弃去乙醚液,水层 用醋酸乙酯提取2次,每次20mL,合并提取液,蒸 干,残渣加甲醇lmL使溶解,作为供试品溶液.同法 制备枸杞子阴性对照溶液.另取枸杞子对照药材 2g,同法制成对照药材溶液.照薄层色谱法(中国药 典2000年版一部附录?B)试验,吸取上述3种溶 液各4uL,分别点于同一硅胶G薄层板上,以氯仿一 醋酸乙酯一甲酸(6:2.5:0.5)为展开剂,展开,取 出,晾干,置紫外灯(365nm)下检视,枸杞子供试品 色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同的 蓝色荧光斑点.枸杞子阴性对照溶液无干扰. 2.2淫羊藿的鉴别 取本品内容物lOg,加甲醇50mL,加热回流提取 1h,滤过,滤液回收甲醇至干,残渣加水20mL使溶 ? l6?中华临床医药与护理?论着?2004年4月第4期 解,用乙醚萃取2次,每次20mL,弃去乙醚液,水层 用水饱和的正丁醇提取2次,每次20mL,合并提取 液,回收正丁醇至20mL,用2%碳酸氢钠水溶液萃取 1次(20mL),弃去碱水液,正丁醇层用正丁醇饱和 的水洗2次,每次lOmL(轻轻振摇).静止分层后, 弃去水液,回收正丁醇至干,残渣加甲醇1mL使溶 解,作为供试品溶液.同法制备淫羊藿阴性对照溶 液.另取淫羊藿苷对照品,加甲醇制成每lml含有 lmg的溶液,作为对照品溶液.照薄层色谱法(中国 药典2000年版一部附录?B)试验,吸取上述3种 溶液各3uL,分别点于同一硅胶G薄层板上,以氯 仿一甲醇一水(65:35:15)的下层溶液为展开剂,展 开,取出,晾干,置紫外灯(365nm)下检视,淫羊藿供 试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同 的暗红色斑点.喷三氯化铝试液,斑点变为橙红,如 喷以10%---氯化铁乙醇溶液,日光下呈相同的蓝绿 色斑点.淫羊藿阴性对照溶液无干扰. 3.大黄素含量测定 3.1色谱条件 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,甲醇一 0.1%磷酸溶液(80:20)为流动相,流速lml/min, 检测波长为254nm.理论塔板数按大黄素峰计算应 不低于2500. 3.2线形关系的测定 精密称取大黄素对照品适量,加甲醇制成每 lmL含7mg的溶液,即得.分别精密吸取大黄素对照 品溶液4.0,8.0,12.0,16.0,20.0uL,注入高效液 相色谱仪,测定,以峰面积积分值为纵坐标,以对照 品的进样量(ug)为横坐标,绘制标准曲线,回归方 程为y=2564.308+1794.678x,r=O.9992,大黄素进 样量在16.352ug一81.760ug范围内,呈良好线性 关系. 3.3供试品溶液的制备与测定 取本品装量差异项下的内容物,混匀,精密称取 0.5g,置锥形瓶中,精密加入乙醇25mL,密塞,称定重 量,加热回流提取lh,放冷,用乙醇补至减少的重量, 滤过,精密量取续滤液lOmL,置锥形瓶中,蒸干,加 3070乙醇一盐酸(10:1)溶液15mL,加热水解lh,立即 冷却,用氯仿强力振摇提取4次,每次15mL,合并氯 仿液,蒸干,残渣用甲醇溶解于25mL容量瓶中,并用 甲醇稀释至刻度,摇匀,精密量取2mL,置lOmL量瓶 中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液.在上 述色谱条件下,精密吸取大黄素对照品溶液和供试品 溶液各20uL,分别注入色谱仪,进行测定.用外标法 计算大黄素的含量.取三批样品(批号为030104, 030108,030114)进行含量测定,结果见表1. 表1样品含量测定结果 批号平均重量(g)大黄素含量(mg/粒)平均含量(mg/粒) 0301040.35612O.5721.O8 0301080.3756 030114O.3812 21.59 21.76 22.75 2O.17 2O.98 22.255 20.575 3.4空白对照溶液的制备与测定 按处方比例取除虎杖以外的各药材,按供试品 溶液的制备方法制备,测定.结果表明阴性样品中 无干扰大黄素的成分. 表2大黄素加样回收率试验结果 3.5稳定性,精密度试验 取同一供试品溶液,与0,2,4,6,8小时分别进 样l0uL,计算结果.结果表明,供试品溶液在8h内 基本稳定,RSD为0.78%.精密吸取同一对照品溶 液,连续进样5次,进样量l0uL,依法测定,计算结 果.RSD为0.35%,结果表明,本方法精密度良好. 3.6重现性试验 取批号为030110的样品,独立按上述色谱条 ChineseClinicalMedicine&Nursing?论着?No.4Apr,2004?17? 件,测定5次,计算结果.RSD为1.80%,结果表明, 本方法重现性良好. 3.7回收率试验 采用加样回收法,精密称取已知含量的同一批 号(030109)的样品0.25g共5份,分别精密加入大 黄素对照品溶液lmL(10.34mg/mL),按照样品含量 测定的方法测定.结果见2.平均回收率为 97.78%,RSD为1.96%. 4.讨论 4.1曾对莪术进行薄层鉴别,莪术的主要有效 成分为挥发油,经薄层层析,紫外光(365nm)下检 视,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上显 相同的明显的绿色荧光斑点,但阴性对照液进行 TLC鉴别,阴性有干扰. 4.2在进行定量指标的确定时,考虑虎杖在处 方中主要药效成分为蒽醌类化合物,大黄素性质较 稳定,能有效反映其内在质量,故选择了方中臣药虎 杖所含的有效成分大黄素作为定量指标. 作者简介:蔡淑清,女,主管药师. 一 氧化氮及其在神经系统中的作用 林晓云王玮 1.福建医科大学护理学系3500042.福建医科大学基础医学院解剖学系 【摘要】近年来发现一氧化氮(N0)广泛分布于生物体内各组织中,特别是神经组织中.它是 一种新型 生物信使分子?,广泛参与机体的生理和病理过程,并与部分疾病的发生有关.本文介绍了 N0的特性,生成, 神经系统中的分布,生理作用及在神经系统疾病中作用的研究现状. 【关键词】一氧化氮神经系统 1980年,美国科学家Furchgott等心在一项研 究中发现血管内皮细胞能使血管平滑肌松弛和血管 舒张,认为此现象是由内皮细胞释放的血管内皮细 胞舒张因子(EDRF)所介导.从此,人们对EDRF的 特性,本质及其功能进行了大量研究,并取得了巨大 进展.1987年,Palmer等[31用化学发光方法证实 EDRF的本质是N0.目前随着N0基础研究的进展, 发现N0的生物学作用涉及到众多学科并参与机体 的多种生理功能,现已成为国内外医学领域研究的 热点和前沿之一.实验证实,N0是一个非常重要的 生理性和病理性因子,并参与了很多疾病的发生和 发展机制.现对N0的特性,生成代谢,神经系统中 的分布,生理作用及在神经系统疾病中作用作一简 介. 1.N0的特性 N0不带电荷,是自由基,极不稳定,半衰期短, 与超氧阴离子(02-)极快地反应生成过氧化亚硝基 阴离子(0N00一),质子化后很快分解生成羟自由基 (OH?),在生物体内还可生成一系列的具有生物功 能的自由基和硝基化合物].02和0H?都属于氧自 由基. 2.NO的生成 用生物化学和分子生物学方法研究了N0的生 物合成.NO在体内经一氧化氮合酶(N0S)的作用 才能生成.NOS以L一精氨酸(L-Arg)和分子氧为底 物,尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)为辅助 因子,形成N0和L一胍氨酸,其中N0S是N0生成的 最主要的限速因子. 3.N0S的结构分型 应用蛋白质生化和分子克隆技术已分离出至少 三种独立的N0S基因,并以组成或以克隆的先后次 序命名为神经型N0S(nNOS),诱导型N0S(iNOS)和 内皮型N0S(eNOS).这三种异构体都可在中枢神经 系统中得以表达. N0S的抑制剂主要有L一单甲基一精氨酸 (L-NMMA),L一硝基一精氨酸(L—NNA),L一硝基一精 氨酸甲酯(L-NAME)及L一氨基一精氨酸(L—N从). 它们的作用机理在于与L一精氨酸竞争N0S的底物