Masson染色技术Masson染色技术
一、实验试剂
1. Regaud 氏苏木精:苏木精1g,95%酒精10ml,甘油10ml,蒸馏水80ml。将苏木精加入蒸馏水内加温溶解,冷却后加入酒精和甘油,放数日后即可应用; 2. Masson丽春红酸性复红液: 丽春红0.7g,酸性复红0.3g,蒸馏水99ml,冰醋酸1ml;
3. 0.2%冰醋酸水溶液: 冰醋酸0.2 ml,蒸馏水100 ml; 4. 1%磷钼酸水溶液:磷钼酸1g,蒸馏水100 ml;
5. 苯胺蓝水溶液:苯胺蓝2g,蒸馏水98 ml,冰醋酸2 ml; 6. 1%光绿水溶液:...
Masson染色技术
一、实验试剂
1. Regaud 氏苏木精:苏木精1g,95%酒精10ml,甘油10ml,蒸馏水80ml。将苏木精加入蒸馏水内加温溶解,冷却后加入酒精和甘油,放数日后即可应用; 2. Masson丽春红酸性复红液: 丽春红0.7g,酸性复红0.3g,蒸馏水99ml,冰醋酸1ml;
3. 0.2%冰醋酸水溶液: 冰醋酸0.2 ml,蒸馏水100 ml; 4. 1%磷钼酸水溶液:磷钼酸1g,蒸馏水100 ml;
5. 苯胺蓝水溶液:苯胺蓝2g,蒸馏水98 ml,冰醋酸2 ml; 6. 1%光绿水溶液:光绿 1g,蒸馏水100 ml。
二、操作步骤
1. 石蜡切片脱蜡至水;
2. 铬化处理或去汞盐沉淀(甲醛固定的组织此步可略); 3. 依次自来水和蒸馏水洗;
4. 用Regaud苏木精染液或Weigert苏木精液染核5-10min; 5. 充分水洗,如过染可盐酸酒精分化;
6. 蒸馏水洗;
7. 用Masson 丽春红酸性复红液5-10min;
8. 以2%冰醋酸水溶液浸洗片刻;
9. 1%磷钼酸水溶液分化3-5min;
10. 不经水洗,直接用苯胺蓝或光绿液染5min;
11. 以0.2%冰醋酸水溶液浸洗片刻;
12. 95%酒精、无水酒精、二甲苯透明、中性树胶封固。 结果:胶原纤维、粘液、软骨呈蓝色(如光绿液染色为绿色),胞浆、肌肉、纤维素、神经胶质呈红色,胞核黑蓝色。
三、体会与说明
1. 控制好染色步骤;
2. 组织固定起着很重要的作用,根据不同的固定液可延长或缩短染色时间; 3. 0.2%冰醋酸水溶液洗,可使色调清晰鲜艳;
肌纤维和4. 磷钼酸水溶液对丽春红、酸性复红有分化作用,分化时镜下控制, 纤维素呈红色,胶原纤维呈淡粉红色即可。
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