新疆驴精液低温保存的研究

新疆驴精液低温保存的研究 新疆驴精液低温保存的研究 34 HeilongjiangAnimalScienee andVeterinaryMedicineNo12010 新疆驴精液低温保存研 曾维斌,王艳萍,郭有林 (新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室塔里木大学动物科学学院,新疆阿 拉尔843300) 中图分类号:$814文献标识码:B文章编号:1004—7034(2010)01—0034—03 驴肉营养价值很高,蛋白质,必需氨基酸含量丰 富,素有"天上龙肉,地上驴肉"之美称.驴乳中维生 素C含量为牛奶的4.75倍,必需氨基酸含量比牛,人 乳高,富含钙,硒等微量元素;驴皮经煎煮浓缩制成的 固体阿胶,有补气补血,益肾强筋功效;驴血清是驴产 品中的珍品,可以制成预防多种疾病的生物制品,孕 马血清(PMSG)是重要的生物制剂;驴的脏器(驴肾 脏,驴鞭)有很高的药用价值.近年来,随着人们对 驴产品价值的认可与喜爱,屠宰驴的数量供不应求, 为了更好地扩繁新疆驴的数量,故开展了其精液的保 存研究. 1材料和方法 1.1试验动物 4,5岁新疆驴8只,平均体重250kg左右. 1.2精液的采集 采精员站在公驴右后侧,右手反持假阴道.当公 驴爬跨母驴而阴茎完全勃起时,迅速将阴茎导入假阴 道内,假阴道的方向与公驴阴茎方向一致,并向下倾 斜,以便精液集于杯中.公驴跳下时假阴道随阴茎后 移,当阴茎自然脱出时,应立即将假阴道向上竖起,取 下集精杯并立即送人实验室检查. 1.3精液处理 精液稀释前,经4,6层灭菌纱布将其过滤,并检 查其活力,密度,合格者立即按照1:1的比例,将等温 稀释液缓慢注入精液中进行稀释;按照试验分 组,并在试管上做标记,把这些试管用保鲜膜包裹,棉 花塞紧,然后一起放入一个盛有等温自来水的烧杯 中,烧杯中液面高度要比试管中稀释精液的液面高, 最后将烧杯连同精液仪器放人0—5cC的冰箱中进行 低温保存…,每隔24h观察1次,并记录结果. 1.4稀释液的配制 用电子天平准确称量各种试剂,经双纯化水溶解 并配制,水浴煮沸消毒并过滤,冷却后加入卵黄,并在 搅拌机上搅拌30rain,使卵黄与其他试剂混匀.低温 收稿日期:2009,01一ll 基金项目:新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室项目 (HS20701J 作者简介:曾维斌(1978一),男,讲师,硕士. 保存稀释液的配方如表1. 表1低温保存稀释液的配方 项目葡萄糖EDTA果糖乳糖柠檬酸钠酒石酸钠明胶 稀释液10.10.671.8O 稀释液20.15.00.3 稀释液30.16.00.3 稀释液48.00.1 稀释液58.00.05 稀释液68.00.15 稀释液78.00.2 稀释液84.00.14.0 稀释液92.00.16.0 稀释液1O4.00.14.0 稀释液116.00.12.0 注:每组配方每100mL再各加卵黄20mL,青霉素,链霉素各 1O万IU 1.5统计分析 用SPSS10.0软件对数据进行统计分析,确定差 异的显着性. 2结果与分析 2.14种不同类型稀释液对精液保存的影响(见表2) 表2不同类型稀释液对精子活力的影响 注:表中每列数据肩标字母完全不同者为差异显着(P<0.05). 以下各表表注与表2相同. 从表2可以看出,降温前精子活率,1号,2号, 3号,4号稀释液差异不显着(P>0.05),24,48h 4号稀释液与1号,2号,3号稀释液相比差异显着 (P<0.05),2号稀释液最小.120h4号稀释液与 1号,2号,3号相比差异依旧显着(P<0.05). 从表3可以看出,4种稀释液0.5级保存时间, 4号稀释液与1号,2号,3号稀释液相比差异显着 (P<0.05),最长可存活95d,活率可达0.5.最长存 《黑龙江畜牧兽医》科技版2010年1月(上)35 表3不同类型稀释液对精子保存时间的影响 活时间1号,2号与4号稀释液相比差异显着(P< 0.05),3号与4号稀释液差异不显着(P>0.05). 生存指数4号稀释液显着高于1号,2号,3号稀释液 (P<0.05). 2.2不同EDTA稀释液效果比较(见表4,表5) 表4不同EDTA稀释液对精子活力的影响 从表4可以看出,不同EDTA稀释液,0h各组差 异都不显着(P>0.05),24h7号稀释液与4号稀释 液(对照组),5号稀释液,6号稀释液都差异显着 (P<0.05);48h7号稀释液与4号稀释液和5号稀 释液差异显着(P<0.05);96h4号稀释液,5号稀释 液与6号和7号稀释液差异显着(P<0.05). 表5不同EDTA稀释液对精子保存时间的影响 由表5可知,0.5级保存时间4号稀释液与6号, 7号稀释液差异显着(P<0.05),与5号差异不显着 (P>0.05).最长存活时间,生存指数4号与6,7号 稀释液差异都显着(P<0.05). 2.3不同糖类对精液保存的影响(见表6,表7) 表6不同糖类对精子活力的影响 稀释液0h24h48h72h96Il加h 从表6可以看出,不同糖类稀释液在降温前差异 不显着(P>0.05),24h4号稀释液与9号,lO号, 11号稀释液差异显着(P<0.05),48h9号稀释液与 4号和8号稀释液差异显着(P<0.05),72h各组差 异不显着(P>0.05),96h4号稀释液与9号,l0号 稀释液差异显着(P<0.05),而8号稀释液与9号, l0号,11号稀释液差异显着(P<0.05). 表7不同糖类对精于保存时问的影响 稀释液0.5级以上保存时间/h最长存活时1~7/h生存指数 从表7可以看出,5种稀释液0.5级以上保存时 间8号稀释液显着高于其他稀释液(P<0.05),4, 8号稀释液存活最长,11号稀释液的时间最短.生存 指数8号稀释液与9号,10号,11号稀释液相比差异 显着(P<0.05). 3讨论 3.1不同类型稀释液对驴精液保存效果的影响 葡萄糖稀释液是20世纪70年代我国用于猪人 工授精中的主要稀释液?j.吴炳岩明胶稀释液比葡 萄糖稀释液在低温保存驴精液时生存指数高102.75, 存活时间延长161h;而在常温保存时,其生存指数高 44.35,存活时间延长84.5h,配种受胎率提高了 8.08%.他认为用明胶稀释液作为驴精液稀释液效 果好的主要原因:1)明胶是由动物筋腱精制而成,对 精子有一定的适应性;2)明胶有黏稠性,可以抑制精 子活动,可减少能量消耗;3)配制明胶稀释液时,加 有能自行调节酸碱度的酒石酸,对精子具有保护作 用;4)明胶稀释液可长时间不腐败,可延长精子的寿 命,减少母畜生殖道疾病的发生,从而可提高母驴的 受胎率.但是在本试验中,由葡萄糖8g,EDTA0.1g 组成的稀释液低温保存精液的效果要好于由明胶,柠 檬酸组成的稀释液,故明胶稀释液的效果好坏,还需 要进一步的研究. 3.2不同EDTA对稀释液保存效果的影响 有研究表明,用葡萄糖4g,0.15%EDTA稀释液 保存猪鲜精液的效果最佳,精液存活96h活率仍可 达到60%.在牛精液冷冻稀释液中添加的许多物 质,其中EDTA的冷冻效果最好.因此,有人把它 引入其他动物精液冷冻稀释液中,在前德国和前苏联 应用的效果都令人满意.但也有研究人员的试验证 明,猪精液中加入EDTA,其效果不如牛精液明显-3J. 而在本研究中,在相同葡萄糖的稀释液中,添加0.1% EDTA的精液保存效果比添加其他剂量的要好,其 36 HeilongjiangAnimalScience andVeterinaryMedicineNo12010 波尔山羊与唐山奶山羊杂交三代羔羊俸重和 俸尺龅奎成纷分析 刘铮铸,巩元芳,张香斋,刘厚茹,李付春,房秀敏 (1.河北科技师范学院动物科学系,河北昌黎066600;2.河北省迁西县畜牧水产局, 河北迁西064300) 中图分类号:$827文献标识码:B文章编号:1004—7034(2010)01—0036—03 主成分分析是将多个相关指标简化为少数不相 关指标的分析方法,其能在不损失过多遗传信息的基 础上进行多性状的方向性选择,可提高选择效果,近 年来该方法已经被应用于牛,羊等家畜性状选育工作 中.到目前为止,在羊方面的报道多为对成年羊多个 体尺性状的综合分析.姜加华于2004年对波尔山 羊级进杂交二代羔羊各阶段体重和体尺进行了主成 分分析,而目前对以波尔山羊为父本杂交改良的三代 羊此方面的研究还未见报道.研究采用主成分分析 法,分析波尔山羊与唐山奶山羊的级进杂交三代羔羊 不同年龄阶段4个体尺和体重等共计5个与生长相 关的性状,综合成几个主成分,由此确定衡量波唐三 代羔羊生长发育性状的指标,并探讨评估个体羊的生 长发育状况. 1材料和方法 1.1材料 研究采用的是秦皇岛市波尔山羊杂交繁育中心 收稿日期:2008—12—13;修回日期:2009—07一O8 基金项目:河北省自然科学基金项目(C2007000743);河北科 技师范学院博士基金项目(D20070004) 作者简介:刘铮铸(1968一),男,教授,博士,研究方向为动物 分子遗传. 通讯作者:巩元芳(1966一),女,副教授,博士,研究方向为动 物分子遗传与育种. 波尔山羊与唐山奶山羊(简称波唐)杂交三代羔羊生 长早期不同年龄阶段的体重和体尺性状测定资料,其 中包括羔羊1周龄,1月龄,2月龄和4月龄时的体重 (X),体高(X),体长(X3),腿臀围()和胸围 ().样本量共计8O只. 1.2方法 按照家畜体尺测量的方法测得5个主要生长 性状,应用DPS3.0主成分分析程序,由样本相关矩 阵出发,首先对原始数据进行化处理,然后计算 性状相关矩阵R的特征根和特征向量,同时根据特 征根和原变量个数,计算每个主成分的贡献率和方差 贡献率,以累积方差贡献率达到85%以上的标准筛 选主成分并建立相应的主成分数表达式J. 2结果 2.14个年龄阶段体重及体尺性状问相关系数的估 计(见表1,2.3,4) 由表1,2,3,4可知,波唐杂交三代羊体长和腿臀 围是两个密切相关的性状,各年龄阶段相关系数都超 过0.96.相比较而言,在各年龄阶段体重与另外 4个体尺指标的相关系数都较高,各体尺指标基本上 都是随年龄增长其相关系数逐渐升高.另外,1周 龄,1月龄体高与胸围的相关系数最高,且随年龄增 长相关系数逐渐升高;4月龄时体重和胸围的相关系 数为最高,体高与胸围的相关系数与之接近.体高与 0.5级保存时问可达到95.2h. 3.3不同糖类对精液保存的影响 有人用A配方(葡萄糖5g,柠檬酸钠0.3g, 乙二胺四乙酸二钠0.1g)和B配方(乳糖5g,葡萄 糖3g,柠檬酸钠1.5g),将山羊精液在l4,16?的 条件下进行保存试验,结果0.3级保存时数A配方 为27h,B配方为57h.精子存活指数A配方为 19.6,B配方为36.3,以B配方效果最佳.通过试验 发现在0,5oC保存驴精液时,当糖的总量达到8g 时,效果最好,其中以葡萄糖和果糖各4g,EDTA为 0.1g为最佳,其0.5级以上保存时间可达110h. 4结论 使用葡萄糖4g,果糖4g,EDTA0.1g组成的稀 释液,低温保存驴精液效果最好. 参考文献: [1]徐振军,任康.猪精液常温保存技术的研究[J].黑龙江畜牧兽 医,2007(4):42—43. [2]赵本田,许常龙.葡萄糖,果糖,聚乙烯醇及牛磺酸对山羊精液 保存的影响[J].黑龙江动物繁殖,2007,15(5):9—10. [3]徐平胚胎和合子的低温保存[J].中国实验动物学杂志,2000, 10(4):240—244. [4]陈家振.波尔山羊精液保存影响因素的探讨[J].畜禽养殖, (008)