HPLC法测定呋麻滴鼻剂中盐酸麻黄碱及呋喃西林的含量

HPLC法测定呋麻滴鼻剂中盐酸麻黄碱及呋喃西林的含量 HPLC法测定呋麻滴鼻剂中盐酸麻黄碱及 呋喃西林的含量 C—APIT 土 ALMEDICINE国园圃?薯—?—幽 磨廊 ?上海市浦东新区人民医院(201200)金辉王建 摘要目的建立用HPLC法测定 呋麻滴鼻剂含量的.方法用十八烷 基键合硅胶为固定相shimpack—ODS柱, 以0.05M磷酸缓冲液:乙睛(85:15)为流 动相,调节PH值为3.0,检测波长为 254nm.结果盐酸麻黄碱在0.1--,0.8mg/ ml浓度范围内线性关系良好(r: 0.999992,n=7);呋喃西林在2.0~16.6ug /ml浓度范围内线性关系良好(r= 0.999990.n=7);而两者的回收率分别为 101.3%(RSD=0.2%n=5),101.0%(RSD= 0.3%N=5).结论本方法简单,重现性 好,是本品质量和控制很好的方法. 关键词HPLC盐酸麻黄碱呋喃 西林 呋麻滴鼻剂主要成分为盐酸麻黄碱 和呋喃西林,有消炎,收缩血管的作用, 临床上用于鼻炎及鼻粘膜肿胀【l】.目前, 上海市浦东新区人民医院制剂质检用分 光光度法测呋喃西林含量以及用滴定氯 离子法计算麻黄碱含量,存在明显不足 [21 .为进一步提高产品的质量,使制剂品 质更加完善,建立采用HPLC法同时测 定呋麻滴鼻剂含量,取得满意效果. 1.实验对象与方法 1.1试剂与药品 盐酸麻黄碱和呋喃西林标准品由上 海市浦东新区人民医院制剂室提供,乙 腈(美国Tedia公司,HPLC级),磷酸为分 析纯;呋麻滴鼻剂(1%和0.5%)由上海市 浦东新区人民医院制剂室提供,批号分 别为2Oo4o922和20040516. 1.2仪器与色谱条件 岛津LC一10A液相色谱仪(配有 CTO一10A恒温箱,SPD—M10AVP二极管 阵,列检器,SIL一10A自动进样器,计算机 及激光打印机)色谱柱为shimpack—ODS 柱(250mm’4.6mmlD),用十八烷基键合硅 胶为固定相,以0.05M磷酸缓冲液:乙腈 (85:15)为流动相【引,调节pH值为3.0,检 测波长为254nm,柱温为40?. 1.3系统适应性试验 精密称取盐酸麻黄碱和呋喃西林标 准品适量,加流动相溶解并稀释成含量 分别为0.4mg/ml及8ug/ml的溶液, 取20ul进样,呋喃西林在波长254nm及 375nm均有较强吸收,故选择254nm作 为测定波长,得色谱图见附图.从附图可 以看出,盐酸麻黄碱和呋喃西林得到了 良好的分离. 1.4线性及回收率试验 1.4.1线性关系考察 精密称取盐酸麻黄碱标准品0.5g及 呋喃西林标准品10mg,置于50ml量瓶 中,加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀, 作为对照储备液.分别吸取上述储备液 0.5.1.0,1.5,2.0,2.5,3.0,4.0ml置于 50ml量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻 度,摇匀,制成一系列浓度的对照品溶 液.按上述色谱条件,分别进样20ul测 定.以峰面积对浓度进行线性回归,结果 表明盐酸麻黄碱在0.1—0.8mg/ml浓度 回流30min,滤过,滤液于25ml的容量瓶 中加甲醇至刻度,摇匀. 2.2.2吸收光谱的测定 分别参甲醇为空白,用UV265型紫 外分光光度计在200~400nm波长范围内 测定紫外吸收光谱(slit2am,scanspeed— MID),结果见附图2. 3.小结与讨论 3.1在上述实验中,为了获得较好的 色谱分离效果和稳定的紫外吸收光谱, 点样量应严格控制在5ul以内,展距应大 于15em.紫外光谱样品溶液的浓度以每 lml含生药原粉0.02g为宜. 3.2上述实验中的紫外吸收光谱经3 次重复测定,特征峰的波长误差均在? 3nm内,重现性良好. 3.3从上述实验结果可以看出:?滇 豆根的薄层色谱与山豆根和百色苦参的 薄层色谱有着明显的差异,滇豆根的薄 层色谱中无苦参碱,氧化苦参碱和槐定 碱对应斑点,在Rf值为0.3处有一明显 的黄色斑点.?百色苦参与山豆根相比 较,在Rf值为0.6处有一明显的蓝色斑 点.?滇豆根的紫外光谱在200,400nnl 波长范围内几无吸引,山豆根及百色苦 参在236~3nm及355~3nm波长处有两 个明显的特征吸收峰.?山豆根与百色 苦参相比较在287~3nm处有一明显的特 征吸收峰. 3.4上述方法操作简便,快捷,结果 准确,可靠,可作鉴别山豆根及其混淆品 滇豆根及百色苦参的依据. 参考文献 1中华人民共和国药典委员会.《中国药 典》一部.北京:化学工业出版社,2000,21 2云南省药品检验所.《云南省药品标 准》.昆明:云南大学出版社,1996,121 (20o50302收稿) 42 范围内线性关系良好,回归方程为y=- 665.58+858.76X,相关系数r=0.9999;呋 喃西林在2.0—16.6ug/ml浓度范围也成 良好线性关系,回归方程为Y=一 l993.23+73553.54X,相关系数r= 0.99999. 1.4.2回收率试验 精密吸取样品(批号20o4l102)lml ,置于50ml量瓶中,然后分别加入对照 储备液适量,加入量如附表1,再用流动 相稀释至刻度,摇匀,按上述色谱条件, 进样20ul测定含量,计算回收率,结果见 附表1. 1.5方法精密度 取标准对照品溶液连续进样6次, 每次20ul,结果盐酸麻黄碱和呋喃西林 峰面积的RSD分别为0.7%和0.5%. 1.6样品含量测定 精密吸取样品2ml置于50ml量瓶 中,加流动相稀释至刻度,作为供试品溶 液.取系统适应性试验的对照品液与供 试液各20Il1分别进样,用外标法计算,结 果见附表2. 2.讨论 附表1回收率测定结果(n=5) 2.1色谱条件的选择 硅胶具有微酸性,适用于分离酸性 和中性物质,本法使用十八烷基键合硅 皎固定相及乙腈流动相,流动相中磷酸 缓冲液与乙腈的比例为85:l5,如乙腈比 例过小,则出峰速度减慢,如增大比例, 虽然加快出峰速度,但盐酸麻黄碱和呋 喃西林的分离度降低【3141. 2.2流动相pH值的选择 流动相pH值对盐酸麻黄碱的色谱 行为影响较大,本实验宜控制在3.0左 右.PH值过高,则保留时间延长,峰型脱 尼明显;而pH值过低则会损伤色谱柱. 2.3稳定性 盐酸麻黄碱和 呋喃西林都是结 晶性粉末,遇光易 变质,应避光保 存.但两者的水溶 液稳定性相对较 高,从溶液的l2 小时稳定性实验 来看,色谱图的基 线都较稳定,无干 扰性杂质产生. 综上所述,本法测定呋麻滴鼻剂中 盐酸麻黄碱和呋喃西林的含量,具有灵 敏,准确,简便的特点,并消除其他组分 的干扰又可同时测定,实际应用可作为 呋麻滴鼻剂质量标准改进的参考. 参考文献 l中国医院制剂规范,第二版:165 2中华人民共和国药典.20o0版:692 3李珍等.RP—HPI尤法测定血浆中华法 林浓度.上海医院药学,1998;9(2):1~5 4吴琳.HPLC测定鼻炎灵喷剂中4种组 分的含量.【J】中国药学杂志,1996,3l(7): 415~417(2005o40l收稿) {:; 0 f JL 附图盐酸麻黄碱,呋喃西林色谱图