孕妇中期唐氏筛查联合外周血游离胎儿DNA检测的临床意义.doc

孕妇中期唐氏筛查联合外周血游离胎儿DNA检测的临床意义.doc 孕妇中期唐氏筛查联合外周血游离胎儿DNA检测的临 床意义 【摘要】 目的:探讨孕妇中期唐氏筛查联合外周血游离胎儿DNA检测的临床意义。方法:用时间分辨免疫荧光法对15,20+6周的孕妇进行中期血清学筛查，并对筛查为高危的孕妇采用大规模平行测序法对母体外周血中游离胎儿DNA进行染色体非整倍体检测。结果:产前血清筛查10 065例，筛查出高危孕妇752例，其中678例高危孕妇进行了游离胎儿DNA检测，共检出10例染色体数目异常，结构异常4例，共14例异常，对14例异常孕妇提供了免费的羊水染色体核型，其余664例回访，其中2 676/678)。结论:例结果不一致;游离胎儿DNA检测总准确率为99.7%( 唐氏筛查和外周血游离胎儿DNA检测联合检测，可预防和减少唐氏儿及其他缺陷儿的出生，对提高国民素质十分重要。 【关键词】 唐氏筛查; 游离DNA检测; 联合筛查 中图分类号 R715.5 文献标识码 B 文章编号 1674-6805(2014)12-0057-02 The Clinical Significance of Combined Detection of Down’s Screening and Free Fetal DNA Investigation/SUN Hong-yue， YUAN Lu， XU Guang-li.//Chinese and Foreign Medical Research，2014，12(12):57-58 【Abstract】 Objective:To investigate the clinical significance of combined detection of the interim of Down’s screening in pregnant women and blood free fetal DNA screening. Method: Pregnant women in 15-20+6 weeks were test of Down’s syndrome by time resolved immunofluorescence. High-risk groups were further tested of free fetal DNA from mother’s blood by gene sequencing.Result:10 065 pregnant women received Down’s screening， and 752 cases were estimated to be high-risk.At last 678 cases received the fetal DNA gene sequencing.14 cases were confirm chromosome abnormalities， including 10 number abnormal and 4 cases of structure abnormalities.The total 14 cases were detected of chromosome analysis from amniotic fluid cells，the other 676 cases were followed up，the results showed that two cases were not according with the NDA investigation，the total accuracy rate was 99.7% (676/678).Conclusion:Combined detection of Down’s screening and mother blood free fetal DNA test is effective in reducing the birth defects. 【Key words】 Down’s screening; Free fetal DNA screening; Combined detection First-author’s address:Zhengzhou Maternal and Infant Health Hospital，Zhengzhou 450012，China 唐氏综合征又称21-三体综合征或先天愚型，是人类最常见的一种染 色体病，发病率为活婴的1/600,1/800[1-2]。其主要特征为先天性的智 力障碍、特殊面容，常伴有先天畸形。孕妇游离胎儿DNA检测主要被用来进行染色体非整倍体疾病的产前检测，包括21-三体、18-三体、13-三体。 1 资料与方法 1.1 一般资料 2012年10月-2013年9月来笔者所在医院门诊就诊的孕妇，孕周15,20+6进行母血清生化标志物AFP和F-βHCG测定，共筛查孕妇10 065例。年龄17,41岁，平均28.3岁，筛查出高危孕妇752例，其中678例高危孕妇在知情同意情况下进行了游离胎儿DNA检测。 1.2 试剂和仪器 中期血清测定仪器为泰莱时间分辨免疫荧光测定仪，试剂均由广州丰华公司提供。孕妇游离胎儿DNA血清由美国Illumina公司大规模平行测序仪进行检测。 1.3 方法 抽取孕妇静脉血2,3 ml，室温4 h内务必分离血清，-80 ?冰箱保存待测，采用时间分辨免疫荧光法检测血清中甲胎蛋白(AFP)、游离β-人绒毛膜促性腺激素(F-βhCG)，检查结果用中倍数倍数(MOM)表示，同时结合孕妇年龄、民族、体重、是否患有胰岛素依赖性糖尿病、是否有过21-三体不良孕史、是否吸烟、是否多胎等因素，采用配套软件计算唐氏风险率。唐氏高危切割值为1?270。对筛查出的高危孕妇进行遗传咨询，建议进行游离胎儿DNA检测或羊水穿刺，在孕妇签署知情同意后同意进行游离胎儿DNA检测，抽取其外周血10 ml到专用采血管(Cell-Free DNA BCTTM)、混匀后，在4 ?条件运送至检测中心(贝瑞和康)检测;对检测 异常孕妇行遗传咨询、随访，建议行羊膜腔穿刺羊水细胞染色体核型分析确诊，确诊后终止妊娠。 1.4 随访 随访方式主要为电话随访为主，住院分娩病历随访为辅。 2 结果 唐氏筛查高风险孕妇产前诊断，产前血清筛查10 065例孕妇中，筛查出高危孕妇752例，筛查阳性率7.47%。在752例高危孕妇中，678例进行了游离胎儿DNA检测，检测率90.1%;57例高危孕妇进行了羊水穿刺，总检测率98%，而其余15例由于经济和别的原因放弃了下一步检查。在对678例进行了游离胎儿DNA检测时，发现10例染色体数目异常，结构异常4例，又对14例异常孕妇提供了免费的羊水染色体核型分析，其余664例随访，其中2例结果不一致;游离胎儿DNA检测总准确率为99.7%(676/678)。 3 讨论 唐氏综合征是5000多种遗传病中发病率最高者之一，病因尚不明确，迄今对这种疾病无有效的治疗手段，必要的产前筛查和精确的产前诊断是避免唐氏综合征的有效手段。在对678例进行了游离胎儿DNA检测时，发现10例染色体数目异常，结构异常4例，又对14例异常孕妇提供了免费的羊水染色体核型分析，其余664例随访，其中2例结果不一致;游离胎儿DNA检测总准确率为99.7%(676/678)，与文献[3]报道一致。对孕中期女性进行血清学唐氏筛查，是一种成熟的、有效的、经济的方法，现在世界上已广泛应用[4]。而孕妇游离胎儿DNA检测，是检测可能来源于以下三种途径的DNA:即母体血浆中的胎儿有核细胞[5];凋亡的胎儿组织细胞 和胎盘滋养细胞[6-7]。由于游离胎儿DNA约占母体血浆总游离DNA的10%以上[8]，并且半衰期短[9]、DNA分子长度相对较短[10]，且在孕5周后 随孕周增加，其浓度也不断升高[8];故适合大规模平行测序检测，胎儿 游离DNA用于无创产前诊断已成为近年来的研究热点，并迅速应用于临床， 并通过1年有效的随访，高危孕妇无创检测率90.1%，高危孕妇进一步综 合检测率高达98%，而和孙宏跃等[11]做的回访有了很大的提高。但孕妇 游离胎儿DNA检测在我国开展时间尚短，大多孕妇对其不了解，需医务工 作者进行进一步的研究、推广。 总之，唐氏筛查和外周血游离胎儿DNA检测联合检测，可预防和减少 唐氏儿及其他缺陷儿的出生，对提高国民素质十分重要，需大力开展。 参考文献 [1] Binkert F， Mutter M， ScbinzeL A，et al. 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