【精品】一 肾小球早期损伤检测和滤过功能评价79

【精品】一 肾小球早期损伤检测和滤过功能评价79 肾脏疾病的生化，免疫检测技术 一 肾小球早期损伤检测和滤过功能评意前带现象，以防假阴性结果的出现。 价 mAlb和TF测定应用最多的领域是糖 1。肾小球早期损伤的检测:早期肾小球尿病肾病的早期诊断与治疗监测。还用于高损伤主要表现为肾小球滤过膜的屏障作用血压肾病，药物性肾毒作用检测以及子痫前受损，在尿中可检出微量中分子量蛋白。目期肾损伤的筛查和疗效评估，这两个指标与前研究最多的是尿微量白蛋白(mAlb)和尿反映肾小管损伤的尿NAG酶组合，应用于转铁蛋白(Tf)。 人群健康普查以筛选出亚临床肾脏疾患将 正常尿中蛋白质以白蛋白为主，而分子具有重要的临床价值。 量低于50 000的蛋白质大部分被肾小管重。肾小球滤过功能评价:肾小球滤过率2 吸收，而尿中含量极微。健康人尿中(GFR)是反映肾脏功能的一项重要指标。反mAlb95%可信限<30mg/24h。当尿中mAlb映GFR的金指标为菊粉清除率，但测定方排出量在30~300mg/24h或排出率法复杂。血清尿素(Urea)、肌酐(Scr)、肌酐20~200μm/min时，称为微量白蛋白尿。如清除率(Ccr)在反映GFR的灵敏度方面分别排出mAlb>95%可信限，即为早期肾小球损约为50%、58%、69%。当GFR下降到正常伤。这类患者处于疾病早期，及时检出进行的1/2~2/3时，Urea、Scr才会出现异常，不治疗，可阻断病情向不可逆蛋白阶段发展，能灵敏地反映GFR。慢性肾功能衰竭因肾小对提高病人今后的生存质量和减轻社会医管代偿性排泌增加而造成Ccr对GFR的高疗经济负担具有重大意义。为此，进十年来，估;服用西咪替丁、三甲氧苄嘧啶等药物及mAlb检测方法经过放射免疫法，酶免疫法酮症酸中毒时，随着肾功能减退程度增大，和免疫浊度法3个阶段，已逐渐成熟起来。Ccr也会假性偏高，但偏高程度与GRF之间目前，免疫浊度测定技术已得到推广。速率无明显相关关系。老人或其他肌肉容量下降散射浊度法灵敏度，准确度，精密度均较好，的患者，还可出现Ccr很低，Scr无明显升但需用高质量的特种蛋白分析仪。而透射比高的不一致现象。常用的肌酐酶法和苦味酸浊法则可用于各种自动化分析仪，具有速度法测定也有其固定的局限性。尽管如此，Ccr快、省试剂、适于批量检测的优点。 仍不失为一个简便、客观的指标。 Tf是一种肝脏合成的结合金属的糖蛋Cystatin C(CC)曾称为γ-痕迹球蛋白白，电泳分类为β1-微球蛋白，由676个氨或后y-球蛋白，属胱氨酸蛋白酶抑制剂超家基酸组成，主要生理功能适运输铁。TF是族。为含120个氨基酸的非糖基化小分子蛋一种急性时相蛋白，通过与细菌竞争摄取铁白，分子量13 359，PI9。3。由有核细胞恒而抗感染，发挥重要的免疫功能。 TF正常定产生，存在与血液、脑脊液、精液、乳汁情况下不能通过肾小球滤过膜。大量的研究等液体中。CC可自由通过肾小球滤膜，且证明，早期肾损伤时肾小球基底膜内外疏松被近曲小管重新吸收及完全代谢，无肾小管层硫酸肝素糖蛋白含量减低，使负电荷位点分泌。血中浓度不受性别、年龄、饮食、炎明显减少。 TF和mAlb一样，都是带负电症、血脂水平和肝脏疾病等干扰。近年来血荷的循环中分子蛋白。前者分子量77 000，浆和血清CC测定作为GFR的评价参数已 逐渐被临床确认。大量研究证实CC为优于分子直径3。8nm;后者分子量66 000，分子 直径3。6nm。由于TF的等电点为5。7(白Scr的内源性标志物，它与菊粉清除率和各蛋白为4。9)，对于电荷屏障更为敏感，使种放射性核素标志物的清除率相关性很好。其在某些肾小球损伤患者的尿中出现较白Tian等的研究均证实CC判定GFR减退的蛋白更早。故TF也是早期肾小球损伤的指敏感性优于Scr，对轻中度肾损害CC的阳标之一。 TF测定主要采用免疫浊度法，无性检出率高于Scr，甚至在Ccr处于参考范论采用散射还是透射免疫比浊测定，必须注围低限时，就可观察到CC的改变。这在老 年肾的研究中极有价值，老人由于肌肉萎由淋巴细胞和肝细胞合成，广泛分布于人体缩，Scr、Ccr均不能准确反映GFR的变化，各种体液中，正常人血浆含量恒定。α1-MG60岁以上的30%的老人CC超过参考范围。在血液中有两种形式:游离型α1-MG和与同样，在衡量小儿GFR方面CC也有独到IgA结合的结合型α1-MG。游离α1-MG能之处。由于肌酐随年龄，性别而有变化，故自由通过肾小球滤膜，并在近曲小管被重吸评价儿童肾功能有一定困难。正常儿童出生收和降解，而结合型α1-MG不能透过滤膜，后到四个月内CC明显高于5个月以上小故尿中仅可检测游离的α1-MG。由于尿α儿;随着肾小球滤过功能的成熟，1岁左右1-MG稳定且在正常尿中含量比β2-MG高接近成人水平。故可直接测定CC而不经体1个数量级，采用免疫浊度法可以很方便地表面积换算来反映GFR的改变。CC也被用在自动化仪器上分析，准确度高、精密度好。于糖尿病肾病GFR早期损伤评价、血液透尿α1-MG与NAG具良好的相关性，二者析患者肾功能改变、透析膜的充分性与其清同时测定即可反映肾小管重吸收功能，又可除低分子量蛋白质的功能评估，及肿瘤化疗反映肾小管损伤程度，为敏感反应肾小管损中肾功能的监测。目前国外已有CC免疫散害的一对组合。视黄醇结合蛋白在酸性尿中射和透射浊度法商品试剂盒出售。 的稳定性也优于β2-MG，在中草药肾病的 二 肾小管损伤的检测 研究中有多篇报道。 肾小管-间质性肾病(TIN)的重要性日 尿轻链检查常作为多发性骨髓瘤的益受到关注，而TIN的早期诊断在很大程度辅助诊断指标。由于免疫球蛋白两种轻链在上依赖于肾小管标记蛋白。肾小管标记蛋白血中的含量不同，k约为λ的2倍，而正常可分为3类，即肾小管上皮细胞的各种酶(通尿中排出的λ大于k，所以当肾小管受损时，称尿酶)、各阶段肾小管脱落的抗原性物质首先出现k升高，随着病情加重，λ而出现和低分子量蛋白(LMWP)。 升高;治疗好转后λ的下降也较k明显。这 1。尿酶:80年代以来应用于临床研究的 种现象也被用于肾脏病的疗效观察。 尿酶有十多种，经过一段时间的评价，有些 肾小管标记蛋白近年来广泛用于糖尿病已退出临床应用。当前用于诊断的肾小管标肾病的检测，我们采用mAlb和NAG联合记酶主要来自肾小管上皮细胞的二个部位，检测监控糖尿病合并肾病，发现糖尿病所致即细胞内溶酶体和细胞表面刷状缘。如N-的肾小管病变可早于肾小球病变。由药物毒乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(NAG)、β-半乳糖性导致的TIN包括氨基糖苷类抗生素、化学苷酶(β-GAL)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)、合成药物造成的肾损害，特别是近年来服用丙氨酸氨基转肽酶(AAP)、γ中性刷状缘马蔸铃酸植物所致的中草药肾病(CHN)都肽链内切酶(NEP)等。 可以通过检测肾小管标记蛋白被早期发现。 2(低分子量蛋白:LMWP通常指分子 量低于50000的蛋白，如β2- 微球蛋白(β 2-MG)、Cystatin C、Protein-1(clara细胞蛋 白)、视黄醇结核蛋白(RBP)、α2- 微球蛋 白(α1-MG)、Ig轻链和β2糖蛋白-1。它 们通过肾小球滤膜后95%~99%在近曲小管 重吸收，尿中排出量很小。当肾小管重吸收 功能受损时LMWP排除增加，故尿LMWP 也可作为早期肾损伤标志物。 β2-MG应用较早，由于其在酸性 (pH<6)尿中很不稳定，加之含量低，需 放射免疫法测定而有被α1-MG取代的趋 势。α1-MG是分子量为30000的糖蛋白，