【doc】人绒毛膜促性腺激素和切除颌下腺对小鼠附睾头部附睾管影响的体视学研究

【doc】人绒毛膜促性腺激素和切除颌下腺对小鼠附睾头部附睾管影响的体视学研究 人绒毛膜促性腺激素和切除颌下腺对小鼠 附睾头部附睾管影响的体视学研究 兰揠2003sep,v.l37N0.jiJF uanMedUnivV…V295 人绒毛膜促性腺激素和切除颌下腺 对小鼠附睾头部附睾管影响的体视学研究 吴全民,何为民.,高学勇.,谢美容.,周瑞祥. 摘要:目的探讨人绒毛膜促性腺激素(HCG)与颌下腺对附睾头部附睾管结构的影响.方法ICR系小 鼠分成四组:假手术组,去颌下腺组,去颌下腺给药组,假手术给药组.应用体视学对切除颌下腺和给予HCG前后 的小鼠附睾头部附睾管形态变化进行观察比较.结果颌下腺切除后,附睾管上皮主细胞数密度减少,细胞核直 径,体积变小,比表面增大,细胞高度变小.附睾管的管壁截面积减小,管腔周长和管腔比表面减少.与假手术组相 比,切除颌下腺的小鼠给予HCG后,附睾管上皮主细胞数密度增加,细胞核直径,体积变大,比表面减小,细胞高度 变大.附睾管的管壁截面积增大,管腔周长和管腔比表面增大.结论切除颌下腺能抑制附睾上皮的合成分泌功 能;HCG能增强附睾上皮的合成分泌功能. 关键词:促性腺激素,绒毛膜;附睾;上皮 中图分类号:R322.64;R697.22文献标识码:A文章编 号:1672—4194(2003)03—0295.03 附睾是精子获得前向运动和受精能力的场所, 其形态和功能受雄激素影响[1].小鼠颌下腺分泌许 多细胞因子,研究证实颌下腺表皮生长因子(EGF) 参与调节精子发生,切除小鼠颌下腺可以建立少精 症动物模型[3].绒毛膜促性腺激素(HCG)在结构 与功能上和黄体生成素(LH)相似,可刺激睾丸间质 细胞分泌睾酮,治疗隐睾症或少精症病人.本课题采 用体视学方法观察切除颌下腺并给予HCG后小鼠 附睾头部附睾管的形态结构变化. 1与方法 1.1材料选用12---,13周龄清洁级ICR雄性性成 熟小鼠(中科院上海实验动物中心),体质量约为 35,42g.实验动物分4组,各8只:(1)假手术组; (2)去颌下腺组;(3)去颌下腺给药组;(4)假手术给 药组.用1O氨基甲酸乙酯(100---120mg/100g体 质量)经腹腔麻醉后,手术切除双侧颌下腺并经石蜡 切片染色显微镜下观察证实.假手术组只做双侧颌 下腺分离,而不切除.给药组在术后立即每2日下午 5点腹腔注射HCG10U至术后35d. 1.2方法手术后35d,用1O氨基甲酸乙酯经腹 腔麻醉,取左侧附睾入改良Bouin液固定过夜,逐级 酒精脱水,苯透明,石蜡包埋.沿附睾纵切面5pm连 续切片;每隔25张取一张切片作苏木精一伊红染色, 共取5张. 1.3测试方法在OlympusCHK显微镜目镜内 置放方网测试系统.测试附睾管的有关参数在1O倍 物镜下进行,总放大倍数为100倍.测试附睾上皮主 收稿日期:2003—02—27修回日期:2003.05.30 基金项目:福建省卫生厅青年基金资助项目(9624) 作者单位:福建医科大学,福州3500041.教务处外总教研室, 2.解剖学与组织胚胎学系 作者简介:吴全民(1968,),男.实验师. 细胞及细胞核的有关参数在4O倍物镜或100倍物镜 下进行,总放大倍数400倍或1000倍.方网测试系统 每小格所代表的真正长度--_0.133mm,每小格的 面积a-----1.7689×10mm.. 每组动物8只,每只取5张切片,每张切片随机 选择6个视场测试.附睾管体视学参数以镜下整个 附睾组织为参照系,分别测试击中附睾管管壁的测 试点数(),击中附睾管管腔的测试点数(QP),附 睾管管腔与测试线的交点数(Q).细胞和细胞核体 视学参数以镜下测试系统内的附睾管为参照系,分 别测试击中主细胞的测试点数(P),主细胞与测试 线的交点数(1),主细胞的细胞核数(CN),主细胞高 度(HL),主细胞核长轴,主细胞核短轴.以主细胞的 细胞核数代表主细胞数.求出主细胞的细胞核轴比, 然后按表查出相对应的形状系数B值嘲. 1.4体视学参数的选用及计算 附睾管的参数: ?Tf-1 ?CNad (5)主细胞数密度;NV=卫 4DPx/ J f-l ?HLxi (6)主细胞高度:H;z×L=一 ?Nxi 1.5统计处学理以上所有测定值均以均值士标 准差表示.采用SPSS软件包对以上全部数据进行单 因素方差分析处理,以P<0.05为有显着性意义. 2结果 2.1小鼠附睾头部附睾管形态特征小鼠头部附 睾管上皮是假复层柱状上皮.附睾上皮主要含有主 细胞和基细胞.主细胞高柱状,顶部伸至管腔面,游 离面有较多微绒毛(图1)).主细胞之间界限不清.主 细胞具有较强的吸收,合成和分泌功能. 2.2小鼠附睾头部附睾管及其上皮内主细胞的体 视学参数变化见表1,2. 表1附睾头部附睾管的体视学结果 与假手术组相比,#P<0.05I与去颁下腺组相比,*tP<0.05(下表同). 表2附睾管上皮主细胞的体视学结果 3讨论 3.1切除颌下腺对附睾头部附睾管的影响鼠颌 下腺的颗粒曲管合成分泌多种生物活性多肽,这些 多肽物质分泌入血或可能随唾液进入消化道,由胃 肠吸收进入门脉血管,如神经生长因子,表皮生长因 子等[63.已证实神经生长因子(NGF)和表皮生长因 子(EGF)与精子发生有密切关系[3,EGF能调节 睾丸内睾酮的生物合成[8].雄鼠在切除颌下腺后,睾 丸,附睾,精囊腺质量降低,睾丸生精细胞与附睾精 子数量减少,附睾精子顶体酶活力降低,血或睾丸的 睾酮,EGF减少[4,9-1o].切除颌下腺雄性小鼠的交配 率降低,与其交配的雌鼠妊娠率也显着减少ct]. 在附睾管上皮主细胞内,睾酮通过5a-还原酶作 用形成双氢睾酮,后者活性比睾酮强,而且是附睾内 起主要调节作用的雄激素[1].附睾内5a一还原酶在附 睾头部的表达量最高[113.此酶活性依赖于来自睾丸 的雄激素结合蛋白(ABP)调控,而ABP合成也受雄 激素影响[13.结扎附睾输出小管明显降低附睾头部 5a一还原酶活性[1].作者的研究表明切除颌下腺后,附 睾管上皮主细胞的细胞核数密度减少,提示主细胞 数量减少,细胞核直径,体积变小,比表面增大,细胞 高度变小,表明细胞合成功能减弱.附睾管的管壁截 面积减小提示附睾管合成功能减弱,同时附睾管的 管腔周长和管腔比表面减少表明附睾管分泌功能减 弱.推测导致以上生理变化的主要原因是切除颌下 腺使鼠体内的EGF等与颌下腺相关的多种生物活性 多肽减少,抑制睾丸睾酮合成,由睾网液循输出小管 进入附睾的睾酮及ABP减少,抑制5a一还原酶活性, 减少双氢睾酮合成[3o],导致附睾合成分泌功能减 弱,影响精子的成熟.附睾上皮分布EGF等多种生长 因子,并分布多种生长因子的受体[2.,因此切除 颌下腺使附睾局部EGF等与颌下腺相关的多种生物 活性多肽变化,可能是直接导致附睾合成分泌功能 减弱的原因之一. 3.2HCG对附睾头部附睾管的影响有文献报道 附睾上皮细胞分布HCG/LH受体[1.HCG通过 HCG/LH受体调节附睾纤溶酶原激活因子活性表 达,从而调节附睾内蛋白水解过程[13].作者以往研究 表明HCG促进颌下腺EGF合成,使血,睾丸,附睾 吴全民等:人绒毛膜促性腺激素和切除颌下腺对小鼠附睾头部附睾 管影响的体视学研究297 EGF水平升高,增加睾丸内睾酮含量L1...本研究表 明与假手术组相比,切除颌下腺的小鼠给予HCG 后,附睾管上皮主细胞的细胞核数密度增加,提示主 细胞数量增多I细胞核直径,体积变大,比表面减小, 细胞高度变大,表明细胞合成功能增强.附睾管的管 壁截面积增大提示附睾管合成功能增强,同时附睾 管的管腔周长和管腔比表面增大表明附睾管分泌功 能增强. HCG可增强附睾上皮合成分泌功能,其可能的 作用机制是HCG促进睾丸睾酮和EGF等生长因子 合成分泌[10,12],通过一系列作用机制增加附睾上皮 内的双氢睾酮含量IHCG也可以通过分布在附睾上 皮的HCG/LH受体直接调节附睾上皮功能如增加 附睾局部EGF等.(图1见封三) 参考文献: [1] [23 [3] [4] RobaireB?VigerRS.Regulationofepididymalepithelialcell functions[J].B/o/Reproduc.1995,52(2)I226—236. HuY?ZhouZ.XuC.a1.Androgendown—regulatedandre- gion-specificexpressionofgermcellnuclearfactorinmousee— pididymis[J].Endocrinol.2003.144(4)I1612—1619. TsutsumiO.KurachiH?OkaT.AphysiologicalroleofEGFin malereproductivefunction[J].Science.1986.233(4767)I975— 977. ReyesAB,WakasugiN.Longterminfluenceofsialoadenec— tomyonreproductiveperformanceofmalemice[J].JReprod F~rt/l,1995,105(Z)I279—285. [5]郑富盛.细胞形态立体计量学[M].北京北京医科大学,中国 协和医科大学联合出版社,1990.59—60. [6]成令忠.组织学[M].第2版.北京人民卫生出版社,1992. 1055—1058.. [7]Ayer—LeLievreC.OlsonL.EbendalT.eta1.Nervegrowthfac— totmRNAandproteininthetestisandepididymisofmouse andrat[J].ProcNailAcadSd.1988.85(8)l2628—2632. 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StereologicalStudyoftheEffectsofHUmanChOriOgOnadOtrOpinand SialoadnectomyontheEpididymalDuctintheMouseEpididymisCaput wuQuan—min,HEWei—min.,GAOXue—yong.,XIEMei—rong.,ZHO URui—xiang. 1-DepartmentofSurgicalGeneralization,2.DivisionofAnatomy,HistologyandEmbryology. FujianMedicalUniversity?Fuzhou350004,China ABSTRACT:ObjectiveToinvestigatetheeffectofhumanchoriogonadotropin(HCG)andsiaload. enectomyonstructureoftheepididymalductinthemouseepididymiscaput.MethodsMiceofICR strainweredividedintofourgroups:shamoperation,sialoadenectomy,sialoadenectomycombinedwith HCGgiven,shamoperationwithHCGgiven.Severalstereologicalparametersforepididymalductand principalcellsinepididymalepitheliumweremeasuredunderthemicromeasuringrulerbeforeandafter sialoadenectomyandHCGinjection.ResultsAftersialoadenectomy,thestereologicalstudyshowedas follows;thenumericaldensityandheightofprincipalcellweredecreased(P<0.05),thediameterandvo1. umeofnucleusofprincipalcellweredecreased(P<0.05)butthespecificsurfacewasincreased(P< 0?05),thewallsectionarea,cavitydiameterandcavitysectionareaoftheepididymalductwerereduced (P<O?05).Comparedwiththeshamoperationgroup,insialoadenectomizedmiceafterHCGadministra. tion,showedamarkedincreaseincellnumericaldensity,cellheight,nucleusdiameterandvolume(P< 0?05)Iaconcomitantincreaseinthewallsectionarea,cavitycentimeterandcavitysectionareaoftheeDi. didymalductwasfound(P<0.05).ConclusionSialoadenectomycaninhibitthesynthesisandsecretion ofepididymalepithelium.HCGcanenhancethesynthesisandsecretionofepididymalepitheliumafter sialoadenectomy. KEYWORDS:gonadotropins,chorionicIepididymisIepithelium 黄扬等:p16,p53J~c—erbB一2蛋白在胃癌的表达及l临床意义(正文 见第266页) (sP染色×400)’ 图1p16蛋白在胃癌的阳性表达1112c—erbB一2蛋白在胃癌的阳性 表达 黄循镭等:面神经切断对神经元存活和c—jun基因表达的影响(正文 见第277页) 减少(×40)(×40) 吴全民等:人绒毛膜促性腺激素和切除颌下腺对小鼠附睾头部附睾 管影响的体视学研究 图1小鼠附睾头部附睾管 主细胞(‘),附睾管(?) } ‘ 二I’??:?.., ? ? ?.一.===‘??’ ?. ? ? ??? ?碜 - I?1. t-.-一?’.?. (正文见~-,295页) (正文见g354~-) LSM患者中性粒细胞阳性呈黑色(苏丹黑B染色 4oo)图3对照组中性粒细胞未见桔红色,胞核为蓝色(油红0染色 ×400)图4LSM患者中性粒细胞内见桔 红色颗粒(油红O染色×400) 毫毒嚣:...t矗蕊‰一吩,鼍叠 纛 _.I.l1._ .,