【doc】苯诱发小鼠外周血中性粒细胞核突与骨髓嗜多染...
苯诱发小鼠外周血中性粒细胞核突与骨髓
嗜多染...
第27卷第2期华中师范大学(自然科学版)Vol?27No?2 1993年6月JOURNALOFCENTRALCHINANORMALUNIVERSITY(Nat.Sci.)Jun.1993
苯诱发小鼠外周血中性粒细胞核突与骨髓
与一27嗜多染红细胞微核的比较观察
.李红清罗勋进
(生物系):
摘要小鼠外周血中性粒细胞核突与骨髓嗜多染红细胞微核都随苯诱发而增加,且两者增加
呈正比.研究结果进一步验证了可利用外周血中性粒细胞核突作为对环境污染,药物中毒等的一
项新的生物学检测指标.
关键词细胞鬯墼寸性卡重粤.,乡l,月五'幸
外周血中性粒细胞核突与癌症有关,国内外已有资料报导.近年来也有报导应用中性
粒细胞核突早期诊断流行性出血热.我们对中性粒细胞核突与环境污染的关系,也作过多次
报导.为了阐明中性粒细胞核突也可作为一项生物学指标,我们进行苯诱发小鼠外周血中
性粒细胞核突和骨髓嗜多染红细胞徽核的比较观察,探讨两者的变化规律,结果如下.
1材料与方法
实验动物:昆明种小白鼠,150只,雌雄各半,体重15~30g(实验中23只因个体过小而死
亡或相互咬死).
实验药品:苯(北京五二九五二化工厂出品).
实验方法:把小鼠分为实验组与对照组.
实验组:80只,先编号后进行外周血常规涂片,再每隔24h按2.5mL/kg苯进行皮下注
射,连续5d.
对照组:70只,编号和外周血常规涂片,每隔24h按0.5mL/kg只生理盐水进行皮下注
射,连续5d.
在第5天注射后24h进行外周血涂片和股骨的骨髓涂片,自然干燥,甲醇固定.外周血
涂片用Giemsa染色,骨髓涂片用1?1的Giemsa与瑞氏液的混合液染色,磷酸冲液(pH=
6.4)缓冲.
油镜下观察外周血100个中性粒细胞,计算阳性细胞数,核突数;观察骨髓1000个嗜多染
红细胞的微核数和i000个中性分叶粒细胞的核突数,微核与核突的鉴定
见文献[6,7].
2结果
(1)对照组处理前,处理后和实验组处理前的小鼠外周血中性粒细胞核突均值分别为
24.9,23.9和23.3,三者比较无显着性差异.但三者分别与实验组处理后核突均值 (40.6)比较,有高度显着性差异(表1).
收稿日期:1992-09—25
华中师范大学(自然辩学版)第27卷
表1小鼠外用血中性粒细胞棱突出现率
阳性细胞率核突均值对照组与苯处对照组苯处理前分组刷倒数标准差 理前相互比较别与苯处理后比较
对处理前6420.824.97.69
照
组处理后642523.9l0.32
P>0_05P<001
实处理前6320.123.al1.1l
验
组处理后6332.440.6l1.74
(2)小鼠外周血中性粒细胞核突与骨髓嗜多染红细胞微核都随苯处理而增加,两者增加
呈正比.分别与对照组比较也有高度显着性差异(表2). 袭2小鼠外周血中性粒细胞棱突与骨髓嗜多豢红细胞徽棱出现率 外周血中性粒细胞核突骨髓嗜多染红细胞徽核
组刷倒数
X?(%)两组比较X士SE(‰)两组比较
对照组
6423.9士l0.327.29士8.2l
(生理盐水处理)
P<O.001P<O.001
实验组
6340.6士l1.74l6.a8士14.05
(苯处理)
(3)苯处理后小鼠骨髓中性分叶粒细胞核突均值158.2‰,与生于是盐水处理后的均值
54.7‰比较,也有高度显着性差异(表3).
表3小鼠骨髓中性分叶粒细胞棱突出现率
3讨论
(1)苯的空气污染,可以诱发中性粒细胞核突,表l可见,经皮下注射苯后的小鼠外周 血中性粒细胞核突有明显增加,与处理前及对照组比较都有高度显着性差异,进一步
了苯
对机体的毒害,可以从外周血中性粒细胞核突表现出来,验证了应用外周血中性粒
细胞核突作
为一项新的生物学检测指标的可信性.
(2)微核率的增高可以部分地反映染色体畸变情况,是众所公认的.有资料报导,苯能【
起染色体畸变0.表2可见,经苯处理后的小鼠骨髓嗜多染红细胞徽核率明显增高,与资料报
导一致.外周血中性粒细胞核突率的增加与骨髓嗜多染红细胞徽核率的增加呈正比.可见苯既
?
第2期胨丽玑等荤诱发小鼠卦周血中性粒细胞棱突与骨奠嗜多染豇细胞微棱的比较观寨227
可诱发微棱叉可诱发核突.微核是由于各种诱变因子诱发染色体受损时所出现的无着丝点断
片或环,在进入闻期所形成的圆形或椭圆形的核块结构.而核突形成也可能与染色体受损伤有
关,据从电镜初步观察结果发现核突为核内异染色质块贴近核膜并连同核膜一起向外突起而
成(另文发表),对核突形成的机理尚需进一步探讨.我们认为馓核测定有其优越性,但应用外
周血中性粒细胞核突作为一项生物学检测指标,也有其独特的优点,如方法简单,取材方便,不
需特殊仪器,设备,只要用外周血一滴即可,且可重复性强.中性粒细胞对诱变剂的作用敏感性
高,计数多,因而在计数上准确性可靠性高,且在显微镜下核突清晰,易于辨认.因此,利用外
周血中性粒细胞核突率作为对环境污染,辐射损伤,药物中毒和食品检验等的一项新的生物学
检测指标,有实用价值.
(3)表3可见,苯处理后的小鼠骨髓的中性分叶粒细胞的核突也有明显增高,表明在进行
骨髓嗜多染红细胞微核测定计数时,也可同时进行骨髓的中性分叶粒细胞核突计效,两项指标
同时获得,提高了检测的准确性和可靠性.因此,骨髓的中性分叶粒细胞的核突率也可作为一
项新的生物学检测指标加以应用.
致谢生榜系学生董艾运,魏珊虹,殷春涛,汪少日月参加了部分I作,特此致谢 参考文献
1JohnstonB.MahoodME?ArthurTE.Malnancyrelatedchangesinperlpheralbloodsmears.
Acts
Cytologica?1967?11(4)I304~307 2JohnstonB,Brady】.Malignancyrelatedchangesintheperipheralbloodafanimalsfollowi
ngtransplant
oftumors.ActsCytologica?1969?13(8):443~446
3人民解放军163层院检验科.中性多形棱白细胞棱突数量与恶性肿瘤关系的初步观寨.新医学,1973.4
(6)t281,282
4福建龙岩地区医院病理科,解放军178医院检验科病理室.自细胞棱突在恶性肿瘤诊断上的探讨.新层
学,1976,7(12):583,584
5柴文硬,张林,田琪等.应用粒细胞棱突计数法早期诊断藏行性出血热.中华医学杂志.1988,6s(8):
439
6弥丽玑.利用人体周血中性粒细胞棱突检测机体对环境污染,反应的研究.中国环境科学.1989.9(1):15
,
l9
7弥丽玑,彭晓辉,刘世旺等,人体周血中性粒细胞棱突与环境污染的关系——357
例污染区农民棱突的检
测.环境科学.1990.10(1):Il8,123
8阵丽玑,彭晓辉,龚彩霞等.环境污染与人体周血中性粒细胞棱突的关系——78倒
染料化工厂,农药厂工
人棱突的检测.华中师范大学(自然科学版),1990,24(1)t82~86
9弥丽玑,傅明.李平等.^体外周血中性粒细胞棱突与环境污染的关系——炼焦工
人棱突的检测.城
市环境与城市生态,199Q,3(4),24,27
10钟宝珍.唐琪蝇.铷云利等.苯,甲苯二甲苯细胞遗传学效应的比教研究;微棱试验
——骨奠嗜多染红细
胞截棱的测定.华中师范学院生物系编.微棱铡定资料,第1集.1980.1274~77}84,
86
l1弥丽玑.祝春华,孔春宝等.苯的空气持染诱发小鼠周血中性粒细胞棱突的观察.
华中师范大学(自然
科学版),1991.25(2)I26~219
华中师范大学(自然科学舨)第27卷
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(DepartmenrofBiology,CentralChinaNormalUniversity,Wuhan)' AbstrmetInthisthesis,miceperipheralbloodneutrophilnuclearexcrescenceand marroWpolychromaticerythrocytemlcronucleusisreportedtoincreaseindirect proportionwithbenzeneinducement.Itispracticallyvaluableinthatithasfurther verifiedanewbiologicaltestingindestotheenvironmentpollution,drugpoison- img,etc.withtheusofperipheralbloodneutropilnuclearexcrescence. Keywordscell{nuclearexcrescence;mlcronucleus