国标-银杏叶聚戊烯醇软膏

国标-银杏叶聚戊烯醇软膏 ICS 65—050 72B LY 共禾口 国林业行业中华人民 1 742—2008LY,T 银杏叶聚戊烯醇软膏 biloba Lof from leaf Polyprenols paste Ginkgo 2008—05—0 1实施2008-03-31发布 国家林业局 发布 1742—2008 LY,T 言 前 本标准由中国林业科学研究院林产化学工业研究所提出。 本标 Vl。 本标准由准由中国林业科学研究院林产化学工业研究所归 本标准主中国林业科学研究院林产化学工业研究所负责起草。 要起草人:王成章、沈兆邦、郑光耀。 1742—2008 LY,T 银杏叶聚戊烯醇软膏 1范围 本标准规定了银杏叶聚戊烯醇软膏的术语、定义、技术要求、试验、检验规则、标志、包装、贮存、 运输及保质期。 本标准适用于以银杏叶为原料，通过非极性溶剂提取、皂化、萃取和浓缩等不同工艺制备的聚戊烯 醇软膏。 2性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文 件，其随后所有 的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB,T 50094 (食品中灰分的测定 GB,T 5009(11食品中总砷及无机砷的测定 GB,T 5009(37食用植物油卫生标准的分析方 GB,T 5009(74食品添加剂中重金属限量法 GB,T 6682分析实验室用水规格和试验试验 方法 3术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 3(1 聚戊烯醇polyprenol 由异戊烯基(isoprenyl)单元聚合构成的直链状同系化合物的总称。亦称聚异戊烯醇(polyisopre—nod。 3(2 biloba from leaf of L(银杏叶聚戊烯酵软膏polyprenol paste Ginkgo 以银杏叶为原料通过非极性溶剂提取、皂化、萃取和浓缩等工艺制备的膏状物，其中总聚戊烯醇含 量要求大于10,。 3(3 from leaf of biloba L( 银杳叶总聚戊烯醇total polyprenols Ginkgo 由一系列异戊烯基单元聚合而成的，具有不同链长的聚戊烯醇(c7。、C，s、Cs。、C8s、C—C9s、C。 oo、 C。)的同系混合物。银杏叶聚戊烯醇具有w-(trans)。-(eis)。一cis(a)结构，其中n一11,18(见图1)。 图1 银杏叶聚戊烯醇化学结构 3(4 carotenoids 总胡萝h素total 与胡萝h素结构相同或相似的所有类胡萝h素的总称。 LY,T 1742--2008 4技术要求 4(1感官要求 棕色油状物或膏状物，有银杏叶挥发的特殊辛辣气味。 4(2理化指标 理化指标应符合表1的规定。 表1理化指标 项 目 指 标 4(0 灰分,, ? 总 200h素含量,(mg,kg) ? 胡萝 10 总聚戊烯醇,, ? 溶剂残留量,(mg,kg) 30 10 ? ? 重金属(以Pb计),(mg,kg) 砷(以 3? As计),(mg,kg) 5试验方法 6682规定的三级水。除特别注明外，本标准所用试剂均为分析纯，所用水应符合GB,T 5(1灰分的测定 按GB,T 5009(4的规定执行。 5(2总胡萝h素含量的测定 5(2(1原理 银杏叶通过正己烷等非极性溶剂或不同比例正己烷一丙酮(体积比)混合溶液萃取，经不同工艺制备 成聚戊烯醇软膏，其中含有口一胡萝h素和类胡萝h素等共轭双健化合物，在451 nm 波长下有最大吸光 度，通过测定样品溶液的吸光度，以标准吸光值(E1)计算出样品中总胡萝b素的含量。 5(2(2试剂和溶液 a) 石油醚(GB,T 15894); b) 丙酮(GB,T 686); c) 正己烷(GB,T 12590); d) 无水硫酸钠(GB,T 9853); e)饱和氯化钠溶液。 5(2(3仪器设备 a)可见分光光度 b)分析天平:感量0(000 计;1 c)石英池(1 cm); g; mL、50 mL、100 d)锥形瓶:25 mL、250 e)分液漏斗:100 ; mLmL、100 mL f)容量瓶:25 ;mL、50 。 mL5(2(4测定 g)银杏叶聚戊烯醇软膏样品于烧杯中，加入丙酮10 mL，充分搅 称取0(1 g,o(2 g(精确到0(001 mL丙酮洗涤两次，合并滤液，转移到50 mL梨形瓶中，在50"C下旋转拌溶解后，过滤。残留物用5 mL正己烷溶解，加适量无水硫酸钠，静置15 min，过滤，残留空浓缩至无溶剂蒸出为止，加入20 真 物用 5 mL正己烷洗涤两次，合并正己烷溶液，然后转移至50 mL容量瓶中，用正己烷稀释至刻度，摇匀，即 2 1742--2008 LY,T 得供测试样品，置阴暗处待用。 nm:J=1 nm波长处取待测溶液，用分光光度计在石英池比色皿中，以正己烷作空白对照，在451 定样品的吸光度，以标准吸光值(E，)计算出样品中总胡萝h素的含量。 测 5(2(5计算 总胡萝h素含量按式 (1)计算: x。=最鼍舢4 式中: X。——总胡萝h素含量，单位为毫克每千克(mg ,kg); E——样品在451 Tim波长下吸光值; nm波长下的吸光值，即2 E1——1,B一胡萝h素标准品溶液在451 500; v，——样品用正己烷定容总体积，单位为毫升(mL); m。——试 样质量，单位为克(g)。 5(2(6重复性 每个试样应取两个平行样进行测定，以其算数平均值为结果。两个平行样测定值相 差不得超过 5,，否则重做。 5(3 总聚戊烯醇含量的测定 5(3(1原理 nm处有强的吸收，选择UV检测器。在HPLC聚戊烯醇由一系列异戊烯基单元构成，在210 中， 不同异戊烯基单元的聚戊烯醇同系物具有相同的响应因子，可以看成一个组分。用HPLC外标 聚戊烯醇标准样品的标准曲线，根据标准蓝线的峰面积和浓度的关系，计算供试样品中总聚戊法绘出 含量。 烯醇的 5(3(2试剂和溶液 a)异丙醇 2892); (HG,T b) 甲醇(GB,T 683); c) 正己烷(GB,T 12590); d)石油醚 15894); (6090GBT e) 乙?,?，, (GB,T 12591); 醚 f) 聚戊烯醇标准样品Dodecaprenol(C6。，Prenol一12)，纯度98,; g)聚戊烯醇标准混合样(c，;、C。C。;、C。。、C。s、Cm、Cm)，纯度95,。 5(3(3仪器设备 a)高压液相色谱仪(HPLC)，配有紫外检测器和 1 b)分析天平:感量0(000 g; 数据处理器; c)ZFQ-85A型旋转蒸发 d)层析柱(CC-25-01); 器;e)lomL容量瓶; f)50mL 锥形瓶; mL、50 mL梨形瓶; g)25 h)10mL吸管; C18 ODSl(150 mmX4(6 i)HPLC分析柱Kromasil mm，5 pm); C18 ODSl(150 mm×10 mm，5 j)HPLC半制备柱Kromasil 。 pm)5(3(4银杏叶聚戊烯醇软膏的纯化 称取15 g左右硅胶，用石油醚湿法装入层析柱，使石油醚在层析柱中的高度高于硅胶吸附柱约 3 1742--2008LY,T 1 cm。称取1(0 g(精确到0(001 g)银杏叶聚戊烯醇软膏样品于50 mL的锥型瓶中，加入10 mL的石油 醚，充分搅拌溶解后，过滤不溶物，残留物用5 mL石油醚洗涤两次，合并滤液，转移到50 mL梨形瓶中， 50"C10 mL 在下旋转真空浓缩至无溶剂蒸出为止，加入石油醚溶解，用吸管转移至硅胶柱，流速3 mL,min，先用石油醚洗脱40 mL，再用10,乙醚一石油醚(体积分数)混合溶液60 mL洗脱，收集 乙醚一石油醚冼脱液50 mL，移至50 10, 梨形瓶，在50?下旋转真空浓缩至无溶剂蒸出为止，制mL 叶聚戊烯醇精制品。 得银杏 5(3(5 HPLC 色谱柱为半制备柱KromasilCl80DSl，柱温为室温，紫制备银杏叶聚戊烯醇标准混合样 210l'lrrl流动相为异丙醇一甲 外检测波长为 醇一正己烷一水(50+25+15+2);流量为2 mL,min。 1 取5(3(4制备的银杏叶聚戊烯醇精制品100 mg，精确到0(000 g，用正己烷溶于25 mL容量瓶 中，用25 pL微量进样器进样，根据HPLC仪信号峰，收集,、Cs。、C—C。。、C。。、C。、C。聚戊 烯醇 流出集分，重复操作，浓缩聚戊烯醇流出集分至干，得到聚戊烯醇标准混合样，即总聚戊烯醇，纯 度大 于95,。 5(3(6 TLC定性分析银杳叶总聚戊烯醇 取少量银杏叶聚戊烯醇软膏样品、聚戊烯醇标准混合样品 Dodecaprenol 和聚戊烯醇标准样品 60 (C。。)，分别用正己烷溶解于1 mL容量瓶中，取TLC薄层层析玻璃板(Silica gel F:。;涂层厚度0(25 mm，5×15 cm)，用玻璃毛细管吸取在TLC玻璃板上点样，将TLC玻璃板在层析缸中展开，展 剂为石油醚一乙酸乙酯(95+5)，取出TLC玻璃板晾干后，放入I。缸中显色，三个样品中具有相同的开 R， 值的点，即为总聚戊烯醇。 5(3(7 HPLC定量分析总聚戊烯醇含量 称取聚戊烯醇标准样品5(0mg，精确到0(000l g，用正己烷溶解，并转移定容至10mL容量瓶， 为配制的标准品溶液。即 C18 HPLC分析条件:色谱柱为分析柱Kromasil ODSl，柱温为室温，紫外检测波长为210 nm;流 (504-254-154-2)1 动相为异丙醇一甲醇一正己烷一水;流量为mL,min。 用10 pL微量注射器分别吸取聚戊烯醇标准样品溶液1 pL、2 pL、3 ffL、4 pL和5 pL，按色谱条件 进样分析，各重复三次，测定相应的峰面积。以标准样品的峰面积为纵坐标，以进样量(rag)为横坐标进 行线性回归，绘制标准曲线，计算回归方程。进样量在0(40 面(4”g范围内，总聚戊烯醇浓度与峰 figs2 积有良好的线性关系。 取2 g硅胶(200目,400目)，用正己烷装入玻璃柱(柱径1(0 cm)，称取银杏叶聚戊烯醇软膏 1 20 mg，精确到0(000 g，溶于2 mL正己烷中，转入玻璃硅胶柱，再用10,乙醚一正己烷溶液洗脱，收 集40 mL洗脱液，旋转蒸发干燥后，用正己烷溶解，并转移定容至10 mLHPLC容量瓶，供分 析。5(3(8总聚戊烯醇含量的测定 取配制好的样品，按5(3(7 HPLC分析条件进样分析，进量5 pL，测总聚戊烯醇的峰面积，以聚 烯醇标准品为对照，计算总聚戊烯醇的含量。 戊 5(3(9总聚戊烯醇的计算 总聚戊烯 (2)。 醇含量的计算见式 X。一垡旦×100, m2 式中: x:——总聚戊烯醇含量，,; c——HPLc中Cts、Cso、Css、C。。、C。s、Cm、Cm聚戊烯醇峰面积的总和对应于标准曲线中总 聚戊 LY,T 1742— 烯醇的质量浓度，单位为毫克每毫升(mg,mL); 2008 v:——供试样品定容体积，单位为毫升(mL); m:——样品的质量，单位为毫克(mg)。 5(3(10精密度的测定 精确吸取样品溶液，重复五次测试，其相对标准偏 (RSD)应小于3,。差 5(3(11加样回收率 1 称取银杏叶聚戊烯醇标准混合样(C7;、Cs。、Css、C，。、C，s、Cm、C-。s)5(0 mg，精确到0(000 g，再 1 ，mL称 取已知总聚戊烯醇含量的银杏叶聚戊烯醇软膏5(0 mg，精确到0(000 g，用正己烷定容至10 五次，测样品中总聚戊烯醇含量，计算平均回收率和相对标准偏差(RSD)，其RSD值应小于3,。 重复 5(3(12重复性试验 取同一批次银杏叶聚戊烯醇软膏，平行测试五次，其 RSD值应小于5,。 5(4溶剂残留量的测定 按GB,T 5009(37的规定执行。 5(5重金属的测定 按照GB,T 5009(74的规定执行。 5(6砷的测定 5009 (11的规定执行。按照GB,T 6检验规则 6(1检验分类 产品检验分出厂检验和 型式检验。 6(2检验项目 6(2(1 出厂检验项目为感官指标、灰分、总聚戊烯醇。 6(2(2型式检验应包括4(1,4(2所有项目。有下列情况之一时，亦应进行型式检验: a)原料、工艺有较大变化，可能影响产品质量时; b)正常生产每年进行一次; c)停产3个月以上， 恢复生产时; d) 国家质量监督机构进行抽查时。 6(3组批与抽样规则 在规定时间内，投料生产的产品组成一个批次。在同一批次产品中，随机从3个 以上的包装单位中 各抽取200 g作为试样。，混合均匀后，取其中的400 g 6(4判定规则 6(4(1 每批产品应经生产单位质量检验部门按本标准检验，检验合格并签发合格证书后方可出厂。 6(4(2产品经检验，如有不合格项目，允许在同批产品中加倍抽样，对不合格项目进行复检，若复检结 果仍有不合格项目，则判该批产品或该次型式检验为不合格。 7标志、包装、贮存和运输 7(1标志 包装上应标明产品名称、标准号、生产日期或批号、保质期、净含量、生产厂名、 厂址。 72 产品内包装材料应符合食品卫生要求，外包装应保证运输和贮存(包装 安全。 LY,T 1742--2008 7(3贮存 产品应贮存在阴凉、通风、干燥、清洁的室内，严禁与有毒、有害、有异味的物品 混贮。 7(4运输 运输工具应清洁卫生，防止日晒、雨淋、受潮，严禁与有毒、有害、有异味的物品 混运。 8保质期 在室温下保质期为一年。超过一年保质期的产品经重新检验合格者，可继续 使用。