多不饱和脂肪酸对多巴胺能神经元保护作用

多不饱和脂肪酸对多巴胺能神经元保护作用 Ch in J P ubl ic H ealth Aug 2010 Vol. 26 N o. 8 中国公共卫生 2010年 8月第 26 卷第 8期 1075 5 Eu rope M ed ia M on itor. M ed ica l Informat ion S ystem [ DB /OL ] . 9 维基 媒 体 基金 会. 2008 年 中国 奶 制 品 污 染事 件 [ DB /OL ] . [ 2009- 03[ 2009 - 08- 11] http: / / press. jrc. it/ overview. htm #l m ed isys. - 12 ] h ttp: / / zh. w ik ip ed ia. org /w ik.i 6 W i lson JM, Polyak MG, B lake JW, et a.l A h euristic ind icat ion and 10 中国互联网络信息中心. 第 23 次中国互 联网络发 展状况统 计 w arn ing stag ing m odel for detection and assessm ent of b iological e [ DB /DL] . [ 2009 - 03- 12 ] http: / /www. cnn ic. net. cn / in vents[ J] . J Am M ed In form A ssoc, 2008, 15( 2 ) : 158- 171. dex /0E /00 / 11 / index. htm. 7 Polgreen PM, C hen Y, Pennock DM, et a.l U sing internet searches 11 CDC. Sw ine in fluen za A ( H 1N 1) infection in tw o ch ildren Southern for in flu enza su rveillan ce[ J] . C lin In fect D is, 2008, 47( 11) : 1443 C aliforn ia, M arch- A pril 2009[ J] . M orb M ortalW k ly R ep, 2009, 58 - 1448. ( 15) : 400- 402. 8 E ysenbach G. In fodem iology: t rack ing f lu related searches on the 收稿日期: 2009 12 11 (孔繁学编校 ) w eb for syndrom ic su rveillan ce[ J] . AM IA A nnu Sym p Proc, 2006, ( 2006 ): 244- 248. 文章编号: 1001 0580( 2010 ) 08 1075 02 中图分类号: R 151 3 文献标志码: A !论 著 ? * 多不饱和脂肪酸对多巴胺能神经元保护作用 刁欢, 王枫, 王晓慧, 骆文静, 于芳, 侯祥红, 蔡同建, 张建彬, 季爱玲 摘 要: 目的 研究饮食补充 n- 3多不饱和脂肪酸 ( PU FA ) 对脂多糖 ( LPS )诱导 的多巴 胺神经 元损伤 的保护 作 分为对照 用。方法 将雄性 SD 大鼠随机 组 , LPS组, LPS + 30% , 60% 鱼油 组, 鱼油组基 础饲料 中添加 30% 和 60% 鱼 油; 黑质内注射 LPS 5 g 只, 对照组注射 生理 盐水 5 L /只, 14 d后, 观 察大 鼠旋 转行 为及 检测 黑质 酪 氨酸 羟化 酶 / ( TH )含量。结果 对照组 无明显行为异常, L PS组大鼠旋 转圈数 ( 114 # 36)明 显大于 30% 鱼油 组 ( 42 # 22)和 60% 鱼油组 ( 18 # 13) ( P < 0 05); 与对照组比较, LPS组 TH 阳 性细胞 数明显减 少 ( P < 0 05), 30% , 60% 鱼油组 与对照 组 比较 TH 阳性细胞数差异无统计学意义。结论 通过膳 食补充 n- 3 PU FA s(鱼油 ), 对多巴胺 能神经元有 一定保护 作 用。 关键词: n- 3多不饱和脂肪酸 ( n- 3 PU FA s); 脂多糖; 多巴胺神经元 E ffec t of n 3 PUFA s in LPS indu ced substan tia n igra dopam inergic n euron s in ju ry D IAO H uan, W ANG Feng, W ANG X iao hu,i e t a .l D epa r tm en t o f Nu tr ition and F oo d Hyg iene, Scho o l o f P reventiv e M edic ine, the F our th M ilita ry M ed ica l U n iver sity (X i an 710032, China ) Abstract: Ob jective T o investiga te the pro tective e ffec t o f dietary intake o f n 3 po lyun sa tura ted fa tty acid( PU FA ) on lipopo ly saccharide( LP S) induced dopam ine neuron in jury. M eth ods T he m ale SD rats w e re random ly div ided in to no r m a l sa line( N S) contro l g roup, LP S g ro up, L PS + 30% f ish o il g roup, and L PS+ 60% fish o il g ro up. T he skim ba sed feed o f tw o f ish o il g roups w as added w ith 30% and 60% o f f ish o i.l T he rats w ere adm in istered w ith L PS by stereo tax ic in jec tion a t the do se o f 5 g / ra.t T he N S g roup w a s in jected w ith N S 5 l / ra .t Fo uteen day s after the in jec tions, the ro ta tional be hav io r o f the ra ts w a s observed and im m uno fluorescence m ethod w as adopted to de tect the change o f rate lim iting enzym e ty ro sine hydroxy la se( TH ) in the do pam ine substan tia nigra neuro ns. R esu lts T he rats in N S con tro l g roup show ed no o b v ious abno rm a l behav io r. T he num bers o f turn ing around o f the ra ts in LPS g ro up w ere o bv iously large r than that o f the rats in tw o diet g ro ups( P < 0 05). C om pared w ith the N S contro l group, the num be r o f TH po sitiv e cells in LPS g ro up w as sig n ificantly reduced( P < 0 05) . B ut com pared w ith the N S g ro up, the num ber o f TH po sitive ce lls in the f ish o il group s show ed no sign ificant d ifference. Conc lu sion D ie ta ry supplem en ts o f n 3 PU FA s o r fish o il have pro tectiv e effect on do pam inerg ic neuron s. K ey word s: n 3 PU FA s; L PS; dopam inerg ic neuron 5 帕金森病 ( P ark inson s d isea se, PD )是 一种常 见的神 经退 ( n- 3 PU FA s) 与降低 PD 的风险有 关 。本实验以 SD 大 鼠 行性疾病, 其主要病理特征 为黑质 多巴胺 能神经 元损失 和脑 为动物模型, 观察 n- 3 PU FA s在 LP S诱 导的 多巴胺 能神 经 元损伤中的作用。 内出现特征性 L ew y s小体。研究发现, 小胶质细胞介导 的脑 1- 2 。脂 多 糖 内炎症 反应 可 能是 导 致 PD 发 生 的病 因 之一 1 材料与方法 ( lipopo ly sacchar ide, LP S) 是 革 兰 阴 性细 菌 内 毒 素的 有 效 成 1 1 试剂与仪器 LPS、阿 扑 吗 啡 ( A PO ) (美 国 S igm a 公 分, 可导致小胶质细胞激 活, 释 放炎性 因子, 从而导 致多巴 胺 司 ), n- 3 PUFA s 中 二 十 碳 五 烯 酸 与 二 十 二 碳 六 烯 酸 占 3- 4 能神 经 元变 性 。多 不 饱 和脂 肪 酸 ( po lyun satura ted fatty 60% , TH 抗体 (# 2792) (美国 C ell S ignaling 公司 )。 ac ids, PU FA s)是重要的膳 食成分, 研究 发现摄 入高 剂量鱼 油 1 2 实验动物 健康雄性 SD 大鼠 (第四 军医大学 实验动 物 中心 ) 40只, 体重 180~ 220g, 行为测试无异常, 实 验开始前 常 * 基金项目: 国家自然科学基金 ( 30700667) . 规饲料适应喂养 7d。 作 者单位: 第四军医大学 军事预防医学系 营养与食品卫 生学教研 室, 陕西 西安 710032 1 3 分 组 与处 理 按体 重随 机分 为对 照组, LPS组 , LPS + 作者简介: 刁欢 ( 1983 - ) , 女, 重 庆荣昌人, 硕士在 读, 研究 方向: 30% 、60% 鱼油组, 每 组 10只。鱼油组喂食含鱼油基 础饲料, 营养素与神经退行性疾病关系研究。 分别含 30% 和 60% 鱼 油, 另 外 2 组喂 食基础 饲料。喂 食 7d通讯作者: 季爱玲 C hin J P ubl ic H ealth Aug 2010 Vol. 26 N o. 8 1076 中国公共卫生 2010年 8月第 26 卷第 8期 后, 采用立体定向技术选择 黑质致 密部用 微量注 射器向 右侧 为 ( 71 66 # 7 08)个, 与对照 组 ( 174 33 # 16 95 )比较 明显 减 注射 5 g /只 L PS, 给药 速 度 1 L /m in, 注射 完 毕 后 留针 5 少, 仅为 对照组的 41% ; 而 30% , 60% 鱼 油组 TH 阳 性细胞 数 m in; 缓慢退针缝合皮肤。对照组注射 5 L 生理盐水, 注 射后 是对照 组 的 89% 和 90% , 分别 为 ( 156 5 # 7 86 ) 和 ( 157 # 14 d, 进行行为学观察及酪氨酸羟化酶检测。 17 81)个。 1 4 行为学观察 经腹 腔按体重 0 5 mg /kg 注射 A PO, 记录 大鼠 30 m in内旋转圈数及旋转方向。 1 5 酪氨酸羟 化酶 ( TH ) 检测 2% 戊巴比妥钠 麻醉大鼠, 经 左 心室插管, 4 ? 4% 多聚甲醛 400 mL 灌注固定, 断头, 取脑, 梯度脱水, 冰冻切 片 ( 20 m ) 。免疫 荧光 法检 测黑 质 TH 达, 黑质多巴胺神经元计 数, 每 只大鼠 阅 3张切 片, 荧光显 微 镜下认定结构, 由第三者 盲法于 10 % 视 野下计数 TH 阳性 细 胞数。 1 6 统计 采用 SPSS 12 0统计软件 进行方差 分析, 以 P < 0 05为差异有统计学意义。 LPS+ 60%鱼油组 ( 10 % ) 图 4 果 2 结 3 讨 论 对照组 注射生理 盐水后 未出现 明显行 为 2 1 行为学观 察 PD 是一种神经系统退行性疾病, 黑质多巴胺能神经元 缺 学变化。 LPS组大鼠在注射 A PO 5~ 10 m in后 开始出现 转圈 失、多巴 胺减少 是 PD 发 生 的主 要 原因。 本 研究 结 果表 明, 行为, 伴有前肢抬 举性 震颤动 作, 大鼠身 体向 右侧 (注 射侧 ) APO 诱导后, 对照组 大鼠未出现明显的行为变化, LPS组大 鼠 曲成环状, 头尾衔接, 以右侧 后肢为支点 向右侧旋 转。 30 m in 出现旋转行为, 并伴 有 明显 前肢 抬举 性震 颤, 表明 LPS 定 位 内, LPS组旋转 ( 114 # 36)圈; 30% , 60% 鱼油 组平均旋转 圈数 注射导致了多巴胺能神 经元的 损伤, 而鱼油 组大鼠 旋转圈 数 分别为 ( 42 # 22) , ( 18 # 13)圈, 明显低于 LPS组 ( P < 0 05)。 明显少于 LPS组 ( P < 0 05), 表 明鱼油 对于 LPS 所致 大鼠 多 2 2 中脑黑质 TH 变化 ( 图 1- 4) L PS组 TH 阳性细胞数 巴能神经元损伤具有一定保护作用。 研究表明, n - 3 PU FA s对 中 枢神 经 系统 疾 病有 防 护 作 用, 在灵 长类帕金森 动物模 型中, 二 十二碳 六烯 酸 ( DHA ) 对 6 多巴胺有关的 运动 功能 有直 接作 用 。在 神经 毒性 诱导 的 PD 动物模 型中, 膳食补 充 n - 3 PU FA s能够 抑制黑 质 TH 阳 7 性神经元的减少, 产生神经保护作用 。这 可能与 n- 3 PU FA s能够通过多种方式 影响炎 症反应, 从 而抑 制炎症 及免 疫 的作用有关。 参考文献 1 H errera A J, Tom as M, V enero JL, et a.l In flamm atory process as a 图 1 对照组可见大量 TH + 神经 ( 10 % ) determ inan t factor for the degeneration of substant ia n igra dopam in ergic n euron s[ J]. 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