【doc】高效液相色谱法测定秘制橘红痰咳胶囊中柚皮苷的含量

【doc】高效液相色谱法测定秘制橘红痰咳胶囊中柚皮苷的含量 高效液相色谱法测定秘制橘红痰咳胶囊中 柚皮苷的含量 第29卷第lO期 2004年lO月 中国中药杂志 ChinaJournalofChineseMateriaMediea Vo1.29,王se10 October,2O04 2样品中橙皮苷含量测定结果 注:含量单位-丸 定,橙皮苷色谱峰前拖尾严重,理论板数低.经实验探索,流 动相甲醇.醋酸一水的比例为(42:4:54),供试品用甲醇提取后 经流动相稀释,橙皮苷可得到理想分离,且不易受杂质干扰. 1O.2本实验参考《中国药典)2000年版一部"陈皮"项下提 取方法,对第二步甲醇回流提取的时间做了考察,试验结果 为6h以后,供试品含量基本不变,经回收率试验确证,甲醇 回流提取时间6h为宜,其他组分干扰小. 10.3本法测定保和丸中橙皮苷的含量,操作简便,测定结 果准确,重复性好,回收率高,是检测含陈皮复方制剂中橙皮 苷较为理想的方法. [参考文献】 [1]中国药典.一部.2000,532. [2]王宝栗.中成药质量标准与标准物质研究.北京:中国医药科技 出版社,1994,155.399. 【责任编辑李禾】 高效液相色谱法测定秘制橘红痰咳胶囊中柚皮苷的含量 陈晓辉,毕开顺,谭佳昱2,常键2 (1.沈阳药科大学,辽宁沈阳110016; 2.辽宁省测试研究中心,辽宁沈阳110015) 秘制橘红痰咳胶囊是在传统用药的基础上,研制出的中 成药制剂.由化橘红,浙贝母,茯苓,百部,苦杏仁,半夏,自 前,紫菀,荆芥,桔梗等1O味中药组成,具有清肺化痰,止咳 平喘之功能.由于化橘红药材是君药,又有散寒,消炎的作 用,其主要活性成分为柚皮苷1_2J.测定秘制橘红痰咳胶囊 中柚皮苷的含量有助于控制本中成药制剂的质量,确保临床 用药的有效性.鉴于该中成药化学成分复杂,曾采用薄层扫 描法测定柚皮苷的含量,由于本品所含某些化学成分的性质 与柚皮苷相近,分离效果不佳.本研究采用高效液相色谱法 测定秘制橘红痰咳胶囊中柚皮苷的含量. 1仪器和试剂 高效液相色谱仪(美国);P2000泵(美国);UV1000紫 外检测器(美国)超声波发生器(天津恒奥HS) 乙腈(色谱纯,山东禹王有限公司);磷酸(优级纯,北京 化工二厂),甲醇(分析纯,北京化工二厂),柚皮苷对照品(中 国药品生物制品检定所,批号722.200107,经归一化法测定纯 度为99.5%),秘制橘红痰咳胶囊(辽宁省新成子制药集团). 2色谱分析条件及系统适用性试验 2.1色谱分析条件Nova—PakC18色谱柱(4.6mm×25cm, 【收稿日期】2003-08-20 晒讯作者]陈晓辉,Tel:(024)23843711-3363,E.mail exhg8820022002@yahoo.corn.crt ? 10o8? 5,ran);流动相乙腈一水一磷酸(20:80:O.2);检测波长283am, 流速0.8mL?min,,柱温3O?,进样量1O止. 2.2供试品溶液的制备取本品物约0.5g,精密称定, 置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇25mL,密塞,称定重量.加热 回流1h,取出,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量, 摇匀,滤过(O.45/nn微孔滤膜),即得. 2.3系统适用性试验取供试品溶液,在上述色谱条件下 进样,以柚皮苷色谱峰计算,理论塔板数3000,拖尾因子 0.98,且柚皮苷的峰与相邻成分分离度大于1.5,可获得基线 分离.' 3方法学考察 3.1标准曲线的绘制取柚皮苷对照品20.2mg精密称定, 置于100mL容量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,作 为标准储备液,依次从中吸取该储备液1.O,2.0,3.O,4.0,5.0 rnL分别用甲醇定容至1OrrdJ摇匀,进样1O止,以相应浓度为 横坐标,峰面积为纵坐标,进行线性回归,得回归方程为Y= 112091X+1875,,=0.9996,在0.02,0.10rng?lTlL峰面积 与浓度呈良好的线性关系. 3.2精密度试验精密称取柚皮苷对照品适量,加甲醇溶 液制成一定浓度的溶液,连续进样5次.结果RSD为1.7%. 3.3重复性试验照含量测定项下方法,对同一批样品 (020603)分别称取6份,照2.2项下制备供试品溶液,并按 2.1项下测定,计算样品柚皮苷平均含量为1.14,RSD 第29卷第1O期 2004年lO月 中国中药杂志 ChinaJournalofChineseMateriaMedica Vo1.29,1881.1e10 October,2004 为1.2%. 3.4溶液稳定性试验精密称取同一批样品(020601)适量, 按2.2项下制备供试品溶液及2.1项下测定,分别于配置后 0,1,2,4,6,8h依法测定,记录色谱图.求得相对标准偏差 BSD为1.4%.结果表明本品溶液在1个工作目内基本稳 定. 3.5回收率试验采用加样回收法.取已知柚皮苷含量的 秘制橘红痰咳胶囊内容物约0.25g(批号220603,含量1.15 nv,/~)9份,分别加入高,中,低不同量的柚皮苷对照品溶液 (0.164nag?mL),按2.2项下制备供试品溶液及2.1项下测 定,本品平均回收率为97.7%,RSD为2.4%. 3.a样品的测试分别吸取对照品溶液和供试品溶液10 进样测定,按外标一点法计算秘制橘红痰咳胶囊中柚皮 苷含量,分别测定3批秘制橘红痰咳胶囊中柚皮苷含量,每 粒分别为1.15,1.24,1.18nag(n=3). 4讨论 4.1检测波长的选择取柚皮苷对照品适量,加氯仿溶解 后,加甲醇稀释成适当浓度,于200,400nln波长扫描,结果 表明本品在(282?1)nm波长处有最大吸收.故以283nln为 本品测定波长. 4.2提取溶剂的选择据文献报道柚皮苷溶于甲醇,乙醇, 丙酮【3l4j.因此选择了甲醇为溶剂.曾用索氏提取,溶剂回 流提取及超声波振荡提取法进行比较,用甲醇回流提取法, 柚皮苷提取的完全,可实现在色谱分离时所产生的杂质峰不 干扰柚皮苷的准确定量,又做到其溶解度满足实际样品分析 的要求. 4.3专属性试验取秘制橘红痰咳胶囊阴性液(按处方量 除去药材化橘红外的溶液)在上述色谱条件下进样在柚皮苷 出峰处(=l8.7fnjn)无其他峰干扰,因此本方法专属性强, 处方中其他成分对柚皮苷的含量测定无干扰. 秘制橘红痰咳胶囊中柚皮苷的含量测定用甲醇回流提 取法,用高效液相色谱法定量分析,方法简便,快速,准确度 高,重现性好,可作为该产品含量检测方法. [参考文献] [1]苗明三,李振国.现代实用中药质量控制技术.北京:人民卫 生出版社,2O00.218. [2]中国药典.一部.2000.38. [3]田南卉,杨国红,张绍来.炮制骨碎补及制剂中柚皮苷的高效 液相色谱法的测定.药物分析杂志,1992,12(6):358. [4]黄美声,沈玉刚.反相高效液相色谱法测定化橘红中柚皮苷的 含量.中草药,1990,21(5):15. [责任编辑袁桂京] 薄层扫描法测定胃得康片中延胡索乙素的含量 董莹,魏献春2 (1.国家药典委员会,北京100061; 2.佛山冯了性药业有限公司,广东佛山528000) 胃得康片是佛山冯了性药业有限公司生产的中药成方 制剂,由延胡索,佛手,鸡骨香,白及,枯矾,石菖蒲6味药组 成,具有行气止痛的功效,用于气滞胃痛,胃及十二指肠溃疡 疗效较好.为更好地控制该产品的质量,作者采用薄层扫描 法对其处方中的君药延胡索中所含主要成分延胡索乙素进 行含量测定.实验结果表明,该方法操作简便,结果可靠,能 有效控制产品的内在质量. 1仪器与试药 岛津CS一930双波长薄层扫描仪.延胡索乙素由中国 -9004.胃得康片由佛山 药品生物制品检定所提供,批号726 冯了性药业有限公司生产.试剂均为分析纯. 2方法与结果 【收稿日期]20o4-o1.15 【通讯作者]董莹,Tel:(010)67154488106 2.1对照品溶液的配制取延胡索乙素对照品适量,精密 称定,加甲醇制成每1mL含1nag的溶液,作为对照品溶液. 2.2供试品溶液的配制取本品30片,研细,取约5g,精密 称定,置锥形瓶中,加乙醚40mL,浓氨溶液2mL,混匀,放置 24h后超声处理15min,滤过;药渣用乙醚洗涤3次,每次10 mL,合并滤液及洗液,用10%醋酸溶液振摇提取4次(15,10, 10,10rnL),酸液用浓氨溶液调节pH值至1011,再用氯仿 振摇提取3次,每次15mL,合并氯仿提取液,水浴蒸干,残渣 加甲醇使溶解并定容至1mL,作为供试品溶液. 2.3薄层色谱条件薄层板:用1%氢氧化钠加0.3%羧甲 基纤维素钠溶液制备.展开剂正己烷一氯仿一甲醇(7.5:4:1). 显色剂稀碘化铋钾试液. 2.4薄层扫描条件单波长反射法锯齿色谱扫描,狭缝0.4 ITflrl×0.4rlm'n,线性化参数Sx=3,灵敏度中等,测定波长510 ? l009?