【doc】催产素对BALB/c小鼠胸腺细胞增殖的促进作用
催产素对BALB,c小鼠胸腺细胞增殖的促
进作用
ISSN1007.8738细胞与分子免疫掌盘盍i』II皿12QQ!Zil3l
文章编号:1007.8738(2001)02.131.02
催产素对BALB/c小鼠胸腺细胞增殖的促进作用
金亮,王百忍,段晓莉,鞠躬{第四军医大学神经科学研究所.陕西西安710032)
美键词:催产素;胸腺细胞;坩殖;神经免疫调节
中图分类号:11392文献标识码:A
摘要:目的研究催产紊(oxytociil-OT)对离体Balb/c
小鼠胸腺细胞增殖的影响.方法用’H-TdR掺人法.研究
在离体培养状态下不同浓度的0T对胸腺细胞增殖的影响.
结果在1×10g/1至1x10g/1的范围内0T可使胸腺
细胞增殖指数增加,在此范围之外对其增殖指数无明显影
响.结论在一定浓度范围内OT有促进胸腺细胞增殖的作
用.
Theprem~liveeffectof埘岫Oil?leprolif-
eralionoflhyimcrtesfromBalb/clvice.
JIN‰WANGBM-mn,DUANXino?li口lju
Gong
InstituteofNeur~clenee,FourthMilitaryMedicalUniversity,
Xi’aft710032,ShaanxiProvince,China
K目?出:Oxytoein;thymocyte;proliferation;ReuFoimmu—
noelodulation
AlibiAhnTorevealtheeffectofoxytoeinORtheprolifer-
ationof面viJ2othymoeyte0fBalb/cmou.M~thodsStudy
theratesofdifferentconcentt’atlor~ofOTintheproliferationof
thethymoeyteswiththe’H-TdRineo~orationmethod]P.~t.flts
Oxy~oein.withtheconcentrationrangedfrom1x10g/Lto1×
l0.g/Lw日abletoraisetheProliferativeIndex(PI)ofthe
thymoeyteswhileotherconcentrationsofoxytothnhadnDsig-
nillcameffectsORtheproliferation.Omdug~nOxytoclnisable
topromotetheproliferation0fthymoeyteinvitrowithinace~ain
raIeoneentratior~
催产素(oxytocin,OT)是一种小肽分子,由9个
氨基酸构成,相对分子质量(肛)为1007,氨基酸序
收精日期:2000—08—23;俸回日期:2000—10—12
基盒项目:国家自然科学基金资助.No.32830170
作者简介垒竞(1973.),男,浙江湖州市人,硕士生
西安市长乐西蓐17号.Te1.{029)3374489
列为从羧基端至氨基端为Cys-Tyr.Ile.Gin.Asn.Cys.
Pro.Leu.Gly,其中第1和第6位的半胱氨酸间形成
二硫键,使其分子呈环状结构.OT主要合成于哺
乳动物下丘脑的视上核,室旁核等核团的大细胞
神经元中,在背根神经节,交感神经椎旁节和生
殖系统的卵巢,睾丸等部位也有
达.已知OT的
生理功能包括促妊娠期子宫收缩,促哺乳期乳腺
射乳,调节动物母性行为,社会行为及影响动物
的学习,记忆过程等.
近年来许多证据表明,OT还具有调节免疫功
能的作用.OT分子表达于胸腺上皮细胞表面,
和胸腺细胞表面的催产紊受体(oxytoemreceptor,
OTR)结合,可诱导胸腺细胞的分化和成熟.此
外,OT还具有促进淋巴细胞葡萄糖代谢等作用.
我们以Balb/c小鼠胸腺细胞为模型,用H.TdR
掺人法研究了在离体培养状态下OT对胸腺细胞增
殖的影响及其量效关系,结果表明,在一定浓度
范围内OT有促胸腺细胞增殖的作用.
1材料和方法
I.I材料4wk龄Balb/c小鼠购自本校实验动物
中心;细胞培养用96孔板为Ntmc公司产品;无
血清培养液为Hyelone公司产品,RPMI1640培养
基为Gibco公司产品;OT是Sigma公司产品,
H-TdR购自中科院上海原子能研究所.
1.2方法将4wk龄雌性Balb/c小鼠颈椎脱臼处
死,以无菌操作取出完整的胸腺.在无菌状态
下,用玻璃针芯轻研后.用RPMI1640不完全培
养液制成细胞悬液,离心(1000r/rain,10min).
弃上清,用无血清完全培养液(RPMI1640不完全
培养液稀释100倍)重悬,细胞密度为1.6×10
个/L.将细胞悬液加入96孔板中(150wL/孔),
置于37?,50mL/LCOz孵箱中孵育.48h后,
将OT用完全培养液稀释成10g/L至10g/L9
个浓度.取50稀释液加入各孔中,每个浓度
加入3个复孔,设只加50完全培养液作为阴
性对照.置于上述环境中孵育.继续培养12h后
将HTdR按O.5wCi的量加入各孔中,每孔50
“L.继续孵育6b后.用多头细胞收集仪收集孔内
ISSN1007—8738细胞与分子免疫学杂志
{JCeLlMolImmuno1)2001:17(2
样品于”9999”型玻璃纤维滤纸上,在红外烤箱中等物质对实验造成干扰;将小鼠胸腺细胞在无血
烤干后,用Beckman型液闪计数仪计数.清培养液中预培养48h.是为了细胞能适应此培
养环境.
2结果
在培养过程中,细胞生长状态良好.用液闪
计数仪计数10组不同浓度OT处理的细胞增殖水
平,并计算出OT浓度在1×10g/L至1×10g/L
时的均值相对于0g/L时的均值的增殖指数,绘
制OT浓度.增殖指数曲线图,见图1.
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围1~dblc小鼠胸腺细胞在不同OT浓度的增殖曲线
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根据曲线图可看出,随着OT浓度的增加,胸
腺细胞增殖水平缓慢上升,在I×10g/L至1×
10g/L浓度区问迅速上升,并在浓度为1×10
g/L时达到峰值,并随后急剧下降,稳定在基线水
平.
3讨论
本实验中采用无血清培养液培养胸腺细胞,
目的是避免血清中可能存在的OT分子和其他激素
本实验结果表明.低浓度OT未见对胸腺细胞
的增殖有促进作用,而过高浓度的OT对胸腺细胞
的增殖可能又有抑制作用,只有在一个台适的浓
度范围内(1×10一1×10g/L)对胸腺细胞的增殖
有促进作用.此外,有文献报道).胸腺细胞中只
有前T细胞(Pie.Tcel1)膜表面有神经垂体激素受
体存在,包括OTR和v1型精氨酸加压素受体,
但前T细胞在胸腺中所占的比例有限,所以OT可
能只诱导前T细胞这一亚群的增殖.
以往的结果表明0,OT只表达在胸腺上皮细
胞胞膜外基质中,其与前T细胞膜表面的OTR受
体作用后,可诱导其分化,成熟.至今还未有关
于检测游离态的OT对离体培养的胸腺细胞增殖功
能影响的报道.在各类应激条件下”?.下丘脑
可分泌大量的OT,并可通过一定方式作用于包括
胸腺在内的中枢免疫器官和外周血中的免疫细
胞,调节它们的功能.我们采用常规的,H.TdR掺
人法,研究了不同浓度OT对胸腺细胞增殖功能的
影响.对进一步研究OT的神经免疫功能具有一定
的意义.
参考文献:
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