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rp-hplc测定尿液中阿魏酸哌嗪的含量

2017-09-27 3页 doc 14KB 13阅读

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rp-hplc测定尿液中阿魏酸哌嗪的含量rp-hplc测定尿液中阿魏酸哌嗪的含量 RP-HPLC测定尿液中阿魏酸哌嗪的含量 RP-HPLC测定尿液中阿魏酸哌嗪的含量 作者:高秀蓉 许小红 廖昌军 廖丽云 【摘要】 目的 建立 尿液中阿魏酸哌嗪含量的测定方法。方法 采用RP-HPLC法,色谱条 件为:Alltech C18柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相甲醇-0.02mol/L 磷酸二氢钾溶液(35:65,pH3.8);流速1.0ml/min;检测波长310nm; 柱温 40?。结果 阿魏酸哌嗪在0.06μg/ml,2.5μg/ml浓度范围内 线性关...
rp-hplc测定尿液中阿魏酸哌嗪的含量
rp-hplc测定尿液中阿魏酸哌嗪的含量 RP-HPLC测定尿液中阿魏酸哌嗪的含量 RP-HPLC测定尿液中阿魏酸哌嗪的含量 作者:高秀蓉 许小红 廖昌军 廖丽云 【摘要】 目的 建立 尿液中阿魏酸哌嗪含量的测定方法。方法 采用RP-HPLC法,色谱条 件为:Alltech C18柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相甲醇-0.02mol/L 磷酸二氢钾溶液(35:65,pH3.8);流速1.0ml/min;检测波长310nm; 柱温 40?。结果 阿魏酸哌嗪在0.06μg/ml,2.5μg/ml浓度范围内 线性关系良好(r = 0.999 9),低、中、高三种浓度(0.5、1.0、 2.0μg/ml)溶液,加样回收率分别为98.41%、99.85、98.65%,RSD 分别为1.02%、0.98%、0.87%(n=5)。结论 该方法能灵敏、准确的 测定尿液中阿魏酸哌嗪的含量。 【关键词】 RP-HPLC;阿魏酸哌嗪; 尿药浓度 Abstract:Objective To establish a method of RP-HPLC for determination of piperazine ferulate in urine.Methods An RP-HPLC method was adopted:a Alltech C18 column(250mm×4.6mm,5μm)was used with a mobile phase of CH3OH-0.02mol/L KH2PO4(35:65,pH3.8);the flow speed was 1.0ml/min,the detective wavelength was 310nm and the temperature of column was 40?.Results The linear range was 0.6μg/ml, 2.5μg/ml(r=0.999 9),with the average recovery rate 98.41%, 99.85%and98.65%,and RSD 1.02%,0.98%and0.87%(n=5)in correspondence to low,medium and high-concentration solution of PF respectively.Conclusion The concentration of piperazine ferulate in urine can be determined sensitively and accurately by RP-HPLC. Key words:RP-HPLC;piperazine ferulate;urine concentration 阿魏酸哌嗪片的主要有效成份—阿魏酸哌嗪 (piperazine ferulate,PF),系根据中国传统的活血化瘀药川芎素 的有效成分阿魏酸的化学结构设计合成的新药。阿魏酸哌嗪片有改善 模型动物的肾功能,减轻模型动物肾脏组织损害的作用,同时还具有 抗凝、抗血小板聚集、扩张微血管、增加冠脉流量、解除血管痉挛等 作用。主要用于各类伴有镜下血尿和高凝状态的肾小球疾病,如急性 肾炎、慢性肾炎、肾病综合征早期尿毒症以及冠心病、脑梗死、脉管 炎等的辅助治疗,对肾小球疾病疗效确切而成为治疗该病首选药品之一,1,。阿魏酸哌嗪口服吸收后大部分以原型药物从尿液中排泄,若尿药浓度与血药浓度线性相关良好,则可以用尿药数据法代替血药数据法判断药物在体内的经时过程。本文探讨运用RP-HPLC测定人体口服阿魏酸哌嗪片后尿液中阿魏酸哌嗪的含量,对文献,2,报道的方法进行了改进,同时对RP-HPLC法进行了方法学研究。 1 实验部分 1.1 仪器和试剂 高效液相色谱仪(Dionex,美国),包括P680双泵、ASI-100自动进样器、TCC-100柱温箱、UVD170U型紫外检测器;pHS-3C型酸度计(上海精密科学仪器有限公司);FA1004型电子天平(成都方舟科技开发公司);色谱纯甲醇、分析纯磷 图1 空白尿样HPLC图谱 Fig.1 HPLC chromatograms of blank urine(A)、control solution with blank urine(B)、urine of PF(C) 酸二氢钾(成都化学试剂厂);双蒸水。阿魏酸哌嗪片剂(四川大学华西药学院提供)。 1.2 色谱条件 Alltech C18柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相:甲醇-0.02mol/L磷酸二氢钾溶液(用磷酸调pH至3.8,35?65);流速1.0ml/min, 检测波长310nm,柱温 40?。 1.3 阿魏酸哌嗪对照品制备 精密称取阿魏酸哌嗪对照品25.0mg,置50ml棕色量瓶中,加流动相稀释至刻度,混匀;取1ml此溶液置100ml棕色量瓶中,加100ml流动相稀释至刻度,混匀,制得浓度为5μg/ml的贮备溶液,置冰箱保存备用。
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