亚稀褶黑菇的化学成分研究

亚稀褶黑菇的化学成分研究 西北林学院学报 , : ~ 亚稀褶黑菇的化学成分研究 贺立虎,周 博,李黔蜀 杨凌职业技术学院,陕西 杨陵 摘 要:利用硅胶、 一 和 一 等现代色谱分离手段,从亚稀褶黑菇尺 ? 子实体的甲醇提取物中分离纯化得到 个甾醇类化合物, 个神经酰胺类化合 物,通过理化性质、波谱及与文献值分析对照,鉴定出它们分别是麦角甾一 , 一二烯一 一醇、麦 角甾一 一烯一 一醇、 , 一过氧化麦角甾一 , 二烯一 一醇、麦角甾一 , , 一三羟基一 , 一二烯一一醇、 , , , 一一一 , ,。 关键词:亚稀褶黑菇;化学成分;甾醇类;神经酰胺类 中图分类号: .. 文献标志码: 文章编号:?一? ,, ? , , , : .一 , 一 一 一 , 一一一 , , ?一 , 一 一 一 ,?一 , ? , , ??一 一 ,, , ,一 一 ? 一 , , . : ; ; ; 亚稀褶黑菇 属担子菌 反相柱层析、薄层层析、 一 柱层析、重 结晶、质谱、核磁共振技术和化学反应等手段,对亚 亚门伞菌目红菇科菇属,为东南亚特有种,为剧毒蘑 菇,国内主要分布于湖南、江西、四川、福建等地 。 稀褶黑菇的部分化学成分进行了分离纯化和结构鉴 由于红菇属中可以食用的蘑菇与有毒蘑菇在形态上 定,为其进一步研究奠定了基础。 极为相似,很难区分,常常造成混淆,因此在我国一 材料与 些山区经常发生因误食该类蘑菇而导致中毒的 事件 。 . 材料 近年来,国内有关亚稀褶黑菇的研究主要集中 实验材料为亚稀褶黑菇子实体, 年 月采 在对其生态特征、生物学特性、菌种分离、毒性毒理 于湖南,采集后清理干净,置于一 ?冰箱保存, 以及毒素分离纯化等方面,关于其化学成分的分离 备用。 纯化与结构鉴定的研究甚少 。由亚稀褶黑菇引 主要仪器有一冷冻干燥机 青岛九州科能实 起的中毒症状极其复杂,根据临床症状分析,亚稀褶 验设备有限公司 、 型电子显微熔点测定仪 黑菇可能含有几类有毒物质,所以研究亚稀褶黑菇 四川大学科仪厂 、 型旋光仪、型双聚焦三扇型有机磁质谱仪、 ? 的化学成分,对于了解亚稀褶黑菇的毒性作用机理? 一型超导核磁共振仪 德国 公 以及红菇属中有毒蘑菇的毒性鉴定和中毒预防与治 司 ;为内标。薄层层析和柱层析用硅胶青岛 疗都具有重要意义。通过反复 。柱层析、 一 收稿日期: ? 修回日期:卜 作者简介:贺立虎,男,讲师,主要从事生物化工的研究和教学工作。第 期 贺立虎 等 亚稀褶黑菇的化学成分研究 . ,. ,给出了两组双键碳信号, 个连杂原 海洋化工厂 、 一 进口填料北京绿百草科技发 子的叔碳., 一 ,结合以上理化性 展有限公司 、 一瑞典 公司 。 质、波谱数据,与文献报道的麦角甾一 , 一二烯一 . 方法 一醇数据吻合,可确定该化合物为 。。,分子 量 。 亚稀褶黑菇新鲜子实体经冷冻干燥后,粉碎得 粗粉 ,将其装入渗漏桶中,然后加入甲醇 , 化合物 :? ,无色针晶,? ? 室温浸泡,每 收集提取液 次,直至提取液颜 反应呈阳性,由黄一红一蓝一紫,最后变成污 色几乎无色。合并提取液减压浓缩回收溶剂得浸膏 绿色,说明该化合物为甾醇类或多羟基类化合 约 ,备用。将提取物用适量的甲醇溶解,拌人样 物。 ? , , : . , 一 . , . , 一 . , . , 一 . 品质量为 ~ 倍的硅胶 ~目 ,自然风干, 上硅胶柱分离,用氯仿湿法装柱,以氯仿一甲醇系统 , . , 一 . , . , . , 一 . , . 。? ? 。, : .: ~ : , / 梯度洗脱,每 收集 , . , . , . , . , . , 次。. , . , . , . , . , . 在氯仿 : , / 洗脱部分经反复:柱 , . , . , . , . , . , 层析得到化合物。氯仿一甲醇 : , /. , . , . , . , . , . 部分经重结晶 氯仿一甲醇 ,得到化合物 , . , . , . ,. ,. 和化合物 。氯仿一甲醇: , / 部分经一 柱层析洗脱液为甲醇 :水一 : ,。? ?谱给出了 个碳信号,它们为 个 / 和一甲醇 纯化,得到化合物 季碳、 个次甲基、 个亚甲基和 个甲基,其中在 和化合物。 . ,. 显示一组双键碳信号, 个连杂原子 的叔碳 . ,以上波谱数据与文献报道的麦 结果与分析 角甾一一烯一 一醇数据吻合。 化合物 :无色针晶,? 反应 化合物 :无色针晶, ?反应 呈阳性,由黄一红一蓝一紫,最后变成污绿色,说明 呈阳性,由黄一红一蓝一紫,最后变成污绿色,说明 该化合物为甾醇类或多羟基类化合物。在硅胶薄层 该化合物为甾醇类或多羟基类化合物。薄层层析: 层析下,展开剂为石油醚/丙酮 : , ,一 . 。 氯仿/乙酸乙酯 : 检测为单一斑点, 一 . , 用 。乙醇溶液显色,斑点为紫红色;在紫外灯 在紫外灯波长下有荧光斑点;在碘条件下 显黄色;经喷洒。溶液加热显绿色。 ? 波长 和 下无荧光。 . .~ ?, ? /: , , /:. , ? , , , , ,. , ? , ? 。 , , , 。 ? 。,? 。 一,以及,, , , , : . , , 一 .,, . ? 基峰 等碎片离子峰。在 ? 图谱中,显示出 . , , 一 一, . , , 一 有 个羟基、 个过氧桥和 个单烯双键侧链, . , , 一 ., 一, . , , 。其 ?和” ?数据如下: ? 一 . , 一, . , , 一, . , , : . , , 一 , , , 一 ., 一, . , , 一。 . , ,., 一 , . , , 一 ? ,: .? , . , . , , , . , ,.,一 , .一 , .一 ,.一 , 一, . , , 一 . , . , 一, .一 , .一 , .一 , .一 , . , , 一 . , ., 一, . ,.一, .一, .一, .一 ,‘厂 . , 一, . , , 一 . , 一 , .一, .一, .一 , . , . , , 一。坞 ? , , .一, .一, .一, : .一 , .一 , .一 , . .一,.一,.一, . 一 , .一 ,.一 ,.一 , . 一, .一, .一, .一,一 , .一 , .一, .一,.一。 ?谱在 . ,. ,.一 , .?, .一, .一西北林学院学报卷, .一, . , .一, . , , 一 , . , , 一 , . , ,?, .一, .一,。一, 一 , 。” ?, 艿:. .一, .一, .一, .一一 , .一 , .一 , . , , .一, . 一。结合以上理化性.一 , ., .一 , .一 ,. ? .一 ~, ~ , .一, . 质、波谱数据并与文献对照,推出该化合物的分 子量为,分子式为 。,结构简式为 , 一一 , . 一 ,。 ?谱给出了过 氧化麦角甾一 , 一二烯一 一醇。 个碳信号,它们为 个季碳、 个次甲基、 个亚甲 化合物 :无色针晶,? 反应 基和 个甲基。其中包括 ., 一 、 呈阳性,由黄一红一蓝一紫,最后变成污绿色。薄层 个连杂原子的叔碳 ., 一 , . 层析:石油醚/丙酮 : ,氯仿/甲醇 : ,氯, 一 , ., 一, ., 仿/丙酮 : ,检测都为单一斑点,在波长 、 一 和 个连接氧原子的仲碳. , 下无斑点;在碘条件下显黄色;经喷洒 / 该谱上除了艿、. 羰基共振信号外,在化学位移 、溶液加热显黄色。 ? /: 以上均无共振信号,说明无双键,分子中存 在 , ? 。 , ??。。 饱和的长链。谱中在低场区 . 出现 , 一 ,一 , ? ,一 个质子宽二重峰信号, ,.,一 .,,为 。一, 一一 。, , 杂原子上相连的活泼质子,归属于仲酰胺一 ? ,, ,等碎片离子峰。 ?? ? 一 上的质子;. ,, 一 是与氮, : ., .】 一 原子相连的次甲基质子多重峰信号。, .一 , .一 , .一 ,.一 结合以上理化性质、波谱数据并与文献对, .一 ,., .一 , .一 照,确定出该化合物的分子量为,分子式为, .一, . , . 一, .,结构 简式为, , ,一 一?, .~, .一, .?, 一 , ,。. , .一, .一, .一 结论与讨论 ,.一,.一, .一,.一, .一, .一, . 从亚稀褶黑菇子实体中分离鉴定出了 种化合 。” ?谱在 。 . 给出了 个 酮羰基的 物,其中化合物 为神经酰胺类化合物,化合物 、 信号,在 、 . ,. ,. ,. ,给出了两组 、 、 都是属于 个碳的甾醇类化合物,它们的基 双键碳信号,在. , . , . 给出了 个连氧 本骨架相同,都为 和 。上有双键化合物,这 个 的碳信号,以上信息表明该化合物为麦角甾醇。另 化合物在 。上都连接有羟基,化合物 是真菌中很 外,经 与品对照及与标准品的 谱图对 稀有的多羟基甾醇,化合物 与化合物 、化合物 照后,确定该化合物的分子量为 ,分子式为 相比,前者是在 和 连接有一过氧桥,其他无过,结构简式为麦角甾 一 , , 一三羟基一 , 氧桥。二烯一 一醇。 实验分离得到的化合物中,化合物 前人己证 化合物 :白色无定形粉末。薄层层析:氯仿/ 明它在体外对 细胞株有极强的抗癌活性 甲醇一 : 检测为单一斑点,在波长下无 和抑制 一 人乳腺癌和 肉瘤细胞株 斑点;在碘条件下显黄色;遇硫酸铜显灰色;喷洒 生长 ,并对人体肝癌 / / 和 细胞表 溶液高温加热显灰色, , . 。? 现出抑制活性口 ,浓度为 .? 时能选 /: , ? 。 。。 择性地增强亚油酸对聚合酶 活性的抑制作, ? 。】。。 , ? 用 。此外,还具有抗炎、免役、抑制和促进血小板一 , 一。。, 凝聚以及抗流感病毒口 。化合物 具有细胞毒活? 一, ,, 性,是亚稀褶黑菇引起中毒的化学成分。 目前,对亚稀褶黑菇化学成分的研究刚刚起步, 。其 ?和 ?数据如下:,: . , , 一 . 本实验只对其部分化学成分进行了研究,下一步将,, . , , , . , , 一, 继续分离鉴定其他化学成分,并进行活性检测,对具 . , , ~, . , , 一, . 有毒性的化学成分进行毒性作用机理研究,建立快