试纸法测定红细胞葡萄糖—6—磷酸脱氢酶活性

试纸法测定红细胞葡萄糖—6—磷酸脱氢酶活性 试纸法测定红细胞葡萄糖—6—磷酸脱氢酶 活性 弓.岳 J.I】frIalofClinicalLa~ratoryScience,20O0,.18,No.5 文章编号:1001.764X(20?)05.03061 .//3 试纸法测定红细胞葡萄糖一6.磷酸脱氢酶活性 林青,唐文吟,张桂芬(泉州市儿童医院,妇幼保健院检验科,福建泉州362f~0) 关键词:藿茧盏查堡璧照塾壁;高铁血虹蛋白还原试验 兰塑堕?或鸣 中围分类号:P,331.14l:Q55'文棘标识码:B 国内大多数基层医院常采用高铁血红蛋白还原试验, 作为红细胞葡萄糖磷酸脱氢酶(C,-6-PD)缺乏的过筛试 验.该法操作较复杂,时问长.用血量多,结果不稳定, 且假阳性率较高.而准确性较高的四氮唑蓝定量法_]和荧 光斑点法,操作复杂,技术要求高,多数医院难以推广. 我院采用G-6-PD试纸法0J,取得了满意结果.现报道如 下. 1材料和方法 1.1检测对象1995年3月一1999年7月在我院住院的疑 为溶血性贫血的患儿222例,其中新生儿黄疸148侧,重度' 贫血患儿25例,急性溶血性贫血49例.男性1.53例,女性 69例.年龄最小2天,最大12岁.其中2天一1岁33例, 占149%;1岁一6岁159例,占71.6%;6岁一11岁30 例,占13.5%. 1.2材料C,-6-PD试纸.由广西医科大学科技开发中心提 供. 1.3方法 1.3.1测定原理红细胞葡萄糖'磷酸脱氢酶(Cr'6-PD) 反应脱下的H能使四唑衍生物显色.显色的深度与酶活性 成正比,与色板比较就能对酶活性半定量.其反应方 式如下: G-6-P+NADP+C-6-PD ~6.p.G+NADPH+H+ NADPH+H+四唑盐衍生物——;;2性而定) G-6-P为葡萄糖岳磷酸;G-6-PD为葡萄糖岳磷酸脱氢酶; 6-P-G为6磷酸葡萄糖酸 I.322操作步骤稀释液配制:将试剂倒人干净的小瓶 内.加蒸馏水20mI溶解.将干燥试管(每份试纸用一支) 插人"?的水箱中,另取干净试管1支,加100稀释液 于管底.同时取受检者指血l0加人试管内,制成1:10血 液,摇匀.静置2nfin.贫血者取指血量视贫血程度按比例 增加.取试纸1条,将其药膜面与溶血液接触2rain;用嗳 纸吸去多余的血液,立即投人已预热的试管内,置人36.5 ?0.5?恒温箱,10min取出,并立即浸人清水中,时间不 少于5min,洗去残余血红蛋白.与标准色板进行比较,可 读出受检者C-6-PD活性.同时每个受检者抽取静咏血做四 氨唑蓝定量法和高铁血红蛋白还原试验法做对照. 2结果 G-6-PD试纸法及Mct.Hb-RT法与四氮唑蓝定量法的比较 (见i): 表1C-6-PD试纸法及高铁血红蛋白还原试验法与四 氮唑蓝定量法的比较 四氨唑蓝定量法!苎苎苎苎旦垩苎竺 (标准】正常中度蚨乏显着缺乏正常中度缺乏显着缺乏 l38120 0162 0054 根据表1数值计算出试纸法的总符合率为986%,比 高铁血红蛋白还原试验法的总符合率(93.7%)高约5个百 分点.试纸法的假阳性率(135%)亦较高铁血红蛋白还 原试验法(6.3%)低约5个百分点: G..6-PD试纸法是一种简便,快速,可靠的检验方法, 并适合在广大基层医院推广应用.本组病儿出现3例假阳 性,可能原因是未按贫血的程度增加取血量,或用调整好 压积的抗凝血来做.我们认为,严格按受检者的血红蛋白 含量与取指血量比值来取血,并且在检滑I结果与临床表现 不相符时,在适当时问内重复实验,可以提高诊断的准确 性 (本文承南京军区福州总医院橙验科朱忠勇主任审阅,谨此 致谢I) 参考文献: 芮琳.红细胞葡萄糖_6—磷酸脱氢酶活性的四氮唑蓝 [1]杜传书. 定量测定法[J_中华血掖学杂志,198l,2(3):188-192 [2]罗建明.试纸法测定孕产妇和新生儿的C-6-PD活性[J]中 国小儿血掖,1996,1(2):75 [3]罗建明.C-6-PD试纸的特点应用[J]中国xb)L血液,1998, 3(3):134-135 (1999-11-收稿,2000-06-1I修回, (陈军编发) ,, 00 30 盯00 ?博 乏乏 缺鳗 常度着 正中显