凝血酶—抗凝血酶复合物的检测和临床应用

凝血酶—抗凝血酶复合物的检测和临床应用 凝血酶—抗凝血酶复合物的检测和临床应 用 25:外医学悒点,}—F200L车鹊12巷第5# 凝血酶一抗凝血酶复合物的检测和临床应用 陈红兵综述郑佐娅王鸿利审校 (上海第二医科大学医学检验重点实验室上海2O0023) 摘要:凝血酶一抗凝血酶复告糟(thrombinanfithrombincomplex,TAT) 是人体内凝血和抗凝血相王作用救雏持生理平衡的 产轴,是凝血酶生成的标志物之一,裣洲TAT对诊断和培疗徘漫性血管内凝血(DIC),深静脉血栓(DvT)和急性心肌梗死(AMI) 都有重要的意义.对监控肿瘤,器官穆植,肝病和怀孕等生理病理收态下鞋血一抗凝血的变化也很有意义 关键词:凝血酶抗凝血酶复合物;玲洲;应用 中图分类号:R446.112文献标识码:A文章编号:1006—3730(2001)05—025203 TAT是人体由凝血和抗凝血相互作用麒维持生理平衡的 产物,是凝皿酶生成的标志物之一,检刊TAr[,对监控机体芏 理病理状者下凝血一抗凝血的变化和诊治痰病都有重要特意 义. 1TAT的形成与性状 l’1TAT的生成生理情况下.悻内生威极少量凝血酶 (thrombin,T),很快兄被抗凝血酶(antithromb/n,AT)共竹鲒 告生成凝血酶一抗凝血酶复奇抽(thromhin-antithromb/ncolt!一 plex,TAT)而灭活,”维持内环境稳定.肝翥(heparin,H)则 催化两者的结奇【1],其横武为TAT—H—T…ATH TAT+H首先,肝素结告AT之赖氪酰基,引起A|r构象改 变,更好地摹蓐了AT活性残基Arg393,鼎后此AT肝翥复 告袖(AT—H)结台凝皿酶,形威可逆的TAT—H三元问 怙,此后,凝血酶酶解AT之Arg393Ser394的肽链.阻丝氨 醺蛋白酶活性中?的Set205与AT之Arg393残基熊合形成 援基酯链,凝血酶先活.同时AT与肝素站台区域发生变琦, 肝素脱商,稳定TAT形威.TAT相对舟子质量约为100000. TAT可结告蛋白S(proteins)形成S-TA’I’~结合玻璃砧 台蛋白(vitronectin,VN)形成VN_TAT,自身襄奇形成事聚 TAT. L2TAT的生理降船TAT在体内与肝细胞表面特异蹙体 结奇而被清除,半存期约为5m导胞吞V—TAT. 1.3TAT的体外稳定性纯TAT在4?放置48h中一缓冲 蘸中耳井船,加热100?或6mol/L盐酸胍中稳定,TAT在 80?中保存,三个月内降解不显着.TAT解商有pH及时间 依赖性,随pH的上升和时间的延长.解商增加FergusoD发 现,擞量游商凝血酶的存在可使之分解太大加速,TAT中翥凝 血酶部分在A链的Argl3后的B链的AraB8后断裂 2TAT的定量检测方法 2.1RIA涪1982年,Teitcl等已知音量的I标记的 TA『r及血浆中待j刘TA]竞争结台特异抗TAT竟抗隹.再加 羊拭兔Ig抗体,班爰抗体沉淀法挂测TAT丑烤值为232士 上海市科委科技发展基金资助 036nmol/’L 2.2ELlsA法1988年,Pelzer等麒亮抗凝血酶托体包被干 聚乙烯昔中后,加血装样萃共育后再加巳标记过氧化物酶的兔 抗AT抗体,班郜甲苯胺显色,加H.SO.中止反应,492nm测 定煎光度测定88啻j正常人样本,精密度及线性筠好,回收虫 9O,110,最低测量限值为0.5gg/’L,平均值为1.45士 1(acutemyocardialinfarction)和DVT(deep veinthrombosis)的早期诊断,抗凝及溶桂治疗等都有什值. 3lTAT碴铡与DICWada等以IAO剖非DIC患者作对 照,对240例DIC患者发作前即挂测TAT,El-二聚体(D-di Flier,DD)等一系列凝血和奸溶标志物,发现白血病并发DIC患 者TAT在DIc发作前3天显着上升,非白血病D患者凝血 纤溶标志物中仅DD,TAT等几项指标在DIC发作前7天显着 上升,认为TAT检测对pre-DIC不仅有高敏感性,并且书较高 的特异性.Asakura发现DIC所有病倒的TAT和纤溶酶一抗 纤弗酶复台蜘(plasnfirranfiplasmincomplex,PAP)都上升,在 急性早劫粒细胞自血病乖脓毒血症时TAT大幅度上升,PAP 在急性早劫粒白血病时彳更高,在胜毒血症时锟低.目此 Asakura;撮据TAT及PAP值将DIG舟为凝血障碍为主型 及纤淳亢进为主型,前型TAT大幅度上升,PAP但轻度上升, DIC常由胜毒血疰引起,多器官衰竭是其主要临床特征;纤溶 型DIC其TAT和PAP都有大幅度升高,DIC常由急性早劫粒 蛊日胞白血病引起,出血是其临床特征Koyama认为,可依据 TAr及某他椁志l物的高佞,对DIC提出诊断标准和舟鲤. Hoek等删评竹TAT对DIC诊断较准确,敏感性88,特异性 苫非生f主转化学壮毪学骨辨2I:01皇荽22巷第5斑 63,阳一生诊断率79,阴性诊断率88. 3.2TAT桂剥与DvrKavasaki等利用植剥DD乖11AT 对静脉曲张病与DVTl作鉴别.140倒疑有DVT忠者,经多苷 韵彩色扫描诊断,25例确诊为DVT,ll5倒为一艘静脉曲张. 璺DD和TAT联告检测,对DVT敏感性100,特异性79, 阳性预测值51,阴性预值1cJ(】.联合杜剥对排除D,,T 竹值很大,两者都阴性(DD<1.0mg/L同对TAT<30Tg/’L) 的患者可安奎地接受静脉曲张手术而不需血管影像检查 I-owe等.挂剥了375倒选择性髓置换柬的TAT,其中有l20 铡患者(32)并发了DvT,41倒(11)近戗DVT,发现术后 并发DVT者丰前平均_rAT水丑显着高于束并发DvT者.并 与DVT患者年龄相关.Blanke研究了22倒疑为肺桂塞患 者,1g倒疑为DvT患者用肺灌诖扫描确诊为肺挂塞的圭告} 患者和15例血管造影确诊为DVT患者中的15例TAT值> 3.0Tg/L.故TAT对疑为血栓病患者是敏感的,但对血挂的种 类是非特异性的.Estivala对l5例急性DVT患者(无或井发 胂栓塞)观察肝素疗兢时,治拧过程中测定DD及TAT,肝素 可在三天内降低TAT,而DD无改变,提示TAT对肝素治疗 的特异性较高,可作为凝血杖寿改善的指标. 3.3TAT检剥与心脏瘸Malt等用鼹f定TAT采早期诊断 AMI患者31例,AMI在发作6h内,在肝素治疗及谤挂疗法开 始前测定TAT,DD,肌红蛋白,肌酸擞酶(MB)总浓度和心肌 钙蛋白结果认为TAT有最好的早期敏感性,但无法确定血 栓形成部位LiYH用ELISA法测64例AMI患者弗桎治 疗前的TAT,野维蛋白降解产特(fibrindegradationproducts, FDP),凝血酶原F1+2片麓(prothrombinfragment1--2,n一 2),用COX比例危险性模式进行统计,随访27士l7十,l9 例死亡,得出TAT危险率1.88,95可信度为1.2,2.79,与 死亡明显相关Scharstein等研究发现凝血库在AMI发作时 上井,溶挂后更高,这种升高可能是l5,25AMI患者淳 栓后发生再闭塞的重要犀目,AMI发作90rain后,FPA及 TAT上升的水平与病死率,心梗舟毂,出血发生率相差,薄栓 再通后12,24h内TAT的上升可预测再发性缺血,提示进些 指标在AMf忠者用弗桂治疗时可预测治疗结果Giannitsis 等_l以2l例健康人作对照,植洲了57例经血管造影证实冠脉 硬化患者(均无外周动脉硬化)TAT,发观较健康人显着升高 (L5.6=2.?Tg/L,vs2.96=0.32Tg/L,P<0.001),且TAT 值和冠_.痛严重程度相关,认为TAT对冠脒凝血具高敏感 性,在监测潜在高凝状卷方面报有意义.1998年,Welters等 研究了24铡选择性冠脉一心房搭桥或主动脉瓣置换术患者, TAT在心肺分流时印显着上升,术由上升更甚(P<0.001), 认为心肺分流导袭了凝血漩活 3.4TAT检测与肿瘤Ozyilkan等以13例健康女性为对 照,检测57例乳腺癌患者(28例缓解,27例活动)TA『r和乳腺 瘤高表达抗原Ca15-3,发现TAT在活莉性乳腺癌中显着J二升 (P<0.01),且和Cal5—3正相关(r一0.24,P一0O4) Kalweit等对45倒肺癌患者在脂廓切开后同时从上脏静脉 (第一组)和肿叶有肿瘤生长的肺静脉(第2-组)抽,01).显着严重肝病者凝血活性的升高,有 并发DIC的可能性.Tomiya等稠定25例原炭肝细胞性肝癌 患者的TAT,发现TAT值较25倒正常对照显着增高,其中6 例中甲胎蛋白(AFP)<20g,L肝癌患者有5例TAT升高,认 为TAT在预测早期肝癌中有一定意义Langley等检测了54 例晕发性肝衰竭患者,TAT较正常对照组显着井高(25.8士 2.7Tg/L,VS,2.9士0.2Tg/L),27僻存活者较27例死亡者的 TAT显着低(17.2士2.7TglL,VS,34.0士4.aT/L,P< 0.005). 3.5TAT检测与怀孕Bellart等in]研究了10倒官内滞育 和船例正常孕妇,TAT和DD较正常孕妇显着升高,且TAT 值与出生体重呈负相关他们并且以60倒正常孕妇为对照, 桂测L5例妊娠性精屎痛患者,发现后者_rAT较前者显着升 高Schjetlein则干1999年报道TAT上升可预测妊高征及先 兆子痛 3.7TAT检测与摩染,脑出血,器官移植,粪风坦痛M vrornmati~等14悄健康人作对照6424士11.3Tg/ L,在肝秽植再灌注后立即剧升至89.32士7.54Tg/L提示 TAT可作为肝穆植手术凝血系坑的监测指标Jennings发现 肝移植井发血栓患者在临床发现血栓形成之前,TAT即升高, 其值较非并发者升高显着,认为TAT对监滴移植术后患者发 生凝血并发症很有价值Ohba和Gabazza均报道粪风湿病 (RA)中,TAT显着升高.TAT升高也见于消化道出血,高脂 血症,肠感染和屎毒症等. 参考文就 1GanZR,LiY,ChenZ,eca1.diatedby hepaticheparansulfateproteoglycans[J].JBidChem, l998,273(36):23440,33447. 3DeBoerHCtPrei~nerKT,BoumaBN,etat(下转第256页)