血涂片制作和白细胞分类/ABO血型鉴定
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实验报告
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实验名称:血涂片制作和白细胞分类,ABO血型鉴定
同组姓名: 实验日期: 室 温: 气 压: 成 绩: 教 师: 一、实验结果
,一,观察到的红细胞、白细胞和血小板
图一
图一中可观察到三种细胞~其中数量最多的是红细胞~最中间的为嗜中性粒细
胞~左侧的紫色细胞为淋巴细胞。
图二
红细胞。 图二中可观察到两种细胞~中间细胞核呈肾形的为单核细胞~其余的均为,二,ABO血型鉴定结果
实验结果如下表:
抗A血清 抗B血清 抗A、B血清 血液凝集情况 不凝集 不凝集 不凝集
从上表可知:待测血液与抗A血清混合后不发生凝集,与抗B血清混合后不发生凝集,与抗A、B血清混合后不发生凝集。
二、分析与讨论
,一,观察到的红细胞、白细胞和血小板
血液由血浆和血细胞组成~血细胞主要包括红细胞、白细胞和血小板。
1、红细胞:数量最多~约占全血体积的40%左右。体积小而圆、均匀分布~呈红色的中央凹圆盘状。成熟红细胞没有细胞核~胞质内充满血红蛋白。
2、白细胞:白细胞数量较红细胞少~但胞体大~细胞核明显~极易与红细胞区别开。对白细胞进行瑞氏染色后~根据细胞的染色特征~可将其分为两大类:
,1,颗粒白细胞
? 嗜中性粒细胞:是白细胞中较多的一种~约占白细胞总数50-70%。细胞大小约10-12μm~核多分叶2-5叶或不分叶为杆状~胞质中的特殊颗粒细小~呈紫红色。
? 嗜酸性粒细胞:数量较少~约占白细胞的0.5%-3%。细胞大小约10-15μm~核常分为2叶~胞质中的颗粒粗大,分布均匀,呈桔红色。
? 嗜碱性粒细胞:数量很少~约占白细胞1%以下。细胞大小约为10-12μm。核常呈S形或不规则~胞质中的颗粒大小不等,分布不匀, 呈紫蓝色。
,2,无颗粒细胞:
? 淋巴细胞:数量较多~约占白细胞的20%-30%。淋巴细胞分为大、中、小淋巴细胞~细胞大小约为6-12μm~其中以6-8μm居多。核常呈圆或椭圆形~染色质致密,深紫色。胞质很少,呈天蓝色。
? 单核细胞:数量较少~约占白细胞的3%-8%。细胞大小约14-20μm。核常呈肾形或马蹄形~染色质疏松,着色较浅。胞质多常染成浅灰蓝色。
观察时~先在低倍镜下选择血细胞分布比较均匀~且有核细胞,白细胞,比较多的部位~然后再转用油镜观察。
不同的白细胞在血液中含量不同。在不同的生理状态下~不同种类白细胞数目波动较大。在实验观察中~图片中数量最多为红色圆盘状的红细胞。其次为嗜中性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞。嗜碱性细胞和嗜酸性细胞在实验中未发现。 ,二,ABO血型鉴定结果
血型通常是指红细胞膜上特异性抗原的类型~根据细胞表面所含抗原的不同~而将血液分成的若干类型。
若将血型不相容的两个人的血液~滴加在玻片上并使之混合~则红细胞可凝集成团~不能分开~这一现象称为红细胞凝集。红细胞凝集的本质是抗原—抗体反应:
? 凝集原:红细胞上的特异性抗原称为凝集原。
? 凝集素:能与红细胞上的抗原发生特异性反应的抗体称为凝集素。
凝集素为γ-球蛋白~存在于血浆中。发生抗原-抗体反应时~由于每个抗体上具有2,10个抗原结合位点~因此抗体可在若干个带有相应抗原的红细胞之间
形成桥梁~使它们聚集成簇~从而发生凝血。
根据红细胞膜上是否存在A抗原和B抗原可将血液分为四种ABO血型。
ABO血型中的抗原和抗体:
血型 红细胞上抗原 血清中抗体
A型 A 抗B
B型 B 抗A
O型 无 抗A、抗B
AB型 A和B 无
在白瓷板上滴加抗A血清~抗B血清~然后滴加血液~若与抗A血清发生凝集反应而与抗B血清不反应则血型为A型,若与抗B血清发生凝集反应而与抗A血清不反应则血型为B型,若均与抗A、抗B血清发生凝集反应则血型为AB型,若均不与抗A、抗B血清发生反应则血型为O型。
由实验可知~滴加血液后~待测血液与抗A血清、抗B血清、抗A、B血清均不发生凝集反应。由此可推断~待测血液的血型为O型。
思考与讨论:
在血型鉴定实验中可能会有溶血现象发生~其原因分析。
答:若多次注射红细胞~可使之产生相应的抗体溶血素~这种抗体与红细胞结合~若有补体存在时~可引起凝集的红细胞被溶解~红细胞破裂~发生溶血。红细胞膜破坏~致使血红蛋白从红细胞流出。红细胞游离液随着溶血的同时透明度增加~呈深红色。故在实验中要注意观察是否有溶血现象发生~防止将溶血判为不凝集。
小结:
1、染色太浅可重染~太深或有沉淀物可重染~或用甲醇脱色。
2、显微镜使用后~必须用二甲苯将油镜头擦洗干净~正确关闭显微镜电源。 3、采血针和采血时必须严格消毒~以防感染。
4、制备红细胞混悬液不能过浓或过稀~以免造成假结果。
5、血型鉴定时~牙签要分开使用~防止标准血清交叉污染。 6、注意是不是有溶血现象发生~防止将溶血判为不凝集。
7、注意区别凝集现象与红细胞叠连。发生红细胞凝集时~肉眼观察呈朱红色颗
粒~且液体变得清亮。
三、结论
血液中~红细胞的数量最多~分布均匀~呈红色的中央凹圆盘状。
白细胞数量较红细胞少~不同的白细胞在血液中含量也不同。嗜中性粒细胞核多分2-5叶~胞质中的特殊颗粒细小~呈紫红色。淋巴细胞核呈圆或椭圆形~染色质致密,深紫色。单核细胞核常呈肾形~染色质疏松,着色较浅。
待测血液的血型为O型。