黄连配方颗粒质量标准研究

黄连配方颗粒质量标准研究 2004年l2月 第26卷第l2期 中成药 ChineseTraditionalPatentMedicine December2004 Vo1.26No.12 黄连配方颗粒质量标准研究 李希,罗先本,谢守德,张嵩 (四川省中医药研究院中医研究所,四川成都610031) 关键词:黄连配方颗粒;TLC;HPLC;盐酸小檗碱;盐酸药根碱 摘要:目的:建立黄连配方颗粒质量标准.方法:采用薄层色谱法,对黄连颗粒中盐酸小檗碱,盐酸药根碱,盐酸巴马汀进 行了薄层定性鉴别;采用高效液相色谱法对其中的盐酸小檗碱,盐酸药根碱进行了含量测定.结果:盐酸小檗碱在 0.17076,0.838gg间线性关系良好,r=0.99996,平均回收率为98.82%,RSD为1.702%;盐酸药根碱在0.11796, 0.5898/~glhq线性关系良好,r=0.99959,平均回收率为98.4%,RSD为1.312%.在TLC图谱中可检出黄连的特征斑 点.结论:本法操作简便,准确,重现性好,能够控制黄连配方颗粒的质 量. 中图分类号:R927.2文献标识码:A文章编 号:10011528(2004)l2—10l0—03 QualityStandardforHuanglianDespensingGranules ben,XIEShou—de,ZHANGSong LIXi,LUOXian— (InstituteofTraditionalChineseMedicine,SichuanProvincialTCMResearchAcademy,Chengdu610031,China) KEYWORDS:HuanglianDespensingGranules;TLC;HPLC;berberinehydrochloride;jateorrhizinehy— drochloride ABSTRACT:AIM:ToestablishthequalitystandardofHuanglianDespensiingGranules(RhizomaCoptidis). METHODS:TLCidentificationsofberberinehydrochloride,jateorrhizinehydrochlorideandpalmatinehy— drochlc)rideinRhizomaCoptidiscarriedout.Thecontentsofberberinehydrochlorideandjateorrhizinehy— drochlorideweredeterminedbymeansofHPLC.RESULTS:Thelinearrangesofberberinehydrochlorideand iateorrhizinehydrochloridewere0.17076, 0.838ttg(r=0.99996),and0.11796,0.5898ttg(r=0.9959), respective1ytheiraveragerecoverieswere98.82(RSD=1.702)and98.4(RSD=I.312),respectively.The characteristicspotsofRhizomaCoptidiscouldbedetectedbyTLC.CONCL USION:Themethodsreportedin thispaperareeasytooperate,andcanprovideaccurateandreproducibleresult s,thusareabletocontrolthe qualityoftheHuanglianDespensingGranules. 中药配方颗粒是用符合炮制规范的中药饮片为 原料经现代工艺提取浓缩,干燥制粒而成的纯中药 产品,该产品其性味,归经,功效,成分等与原中药饮 片基本一致,且具有不需煎熬直接冲服,服用量小, 作用迅速,疗效确切,携带保存方便,卫生安全等优 点,为越来越多的患者所接受.黄连配方颗粒是将 黄连药材按优选出的提取工艺水提浓缩,喷雾干燥, 干法制粒所得的颗粒,为了规范药品质量,保证临床 疗效,建立了黄连配方颗粒质量标准. 1仪器与试药 HP1100型高效液相色谱仪,VWD紫外检测 器,AUTOSCIENCE溶剂过滤器,超声波提取器(中 船七院七二六所),SartoriusBP211D电子天平,939 薄层自动铺板器(重庆贝可得公司). 盐酸小檗碱对照品(0713—200208),盐酸药根碱 对照品(0733—200004),盐酸巴马汀(0732—200005) 购于中国药品生物制品检定所;黄连购于四川I省中 药材公司,经鉴定为味连;黄连配方颗粒(批号: 020301,020302,020403)四川省中医药研究院中医 研究所中试车间生产. 乙腈为色谱纯,水为重蒸馏水,硅胶G60型(青 岛海洋化工集团),其它试剂均为分析纯. 收稿日期:2003一l1—27 作者简介:李希(1969,),女,四JIl成都人,副主任中药师,主要从事中 药制剂工艺及质量标准研究,电话:028—86242656. 1010 2004年12月 第26卷第12期 中成药 ChineseTraditionalPatentMedicine December2004 VO1.26NO.12 2方法与结果 2.1定性鉴别实验 2.1.1供试品溶液的制备 取本品0.5g加甲醇50mL超声提取1h,滤过, 滤液水浴浓缩至2mL即得供试品溶液. 2.1.2对照品溶液的制备 取盐酸小檗碱,盐酸药根碱,盐酸巴马汀对照品 加甲醇制成每1mL各含0.5mg的溶液,作为对照 品溶液. 2.1.3薄层层析 吸取上述4种溶液各4L,分别点于同一硅胶 G薄层板上,以苯一醋酸乙酯一异丙醇一甲醇一浓氨试液 (6:3:1.5:1.5:0.5)为展开剂展开(氨蒸气饱 和)E,取出晾干,置紫外灯(365nm)下检视,供试品 色谱中,在与对照品色谱相应位置上显相同颜色的 斑点(见图1). 2.2含量测定 2.2.1色谱条件:色谱柱:AgilentZORBAXSB— C18柱(4.6mm×150mm,5tzm);流动相:0.033mol? L一磷酸二氢钾一乙腈(70:30)[,;流速:1mL? min,;柱温25?;紫外检测波长:265nm3.盐酸 小檗碱,盐酸药根碱,黄连配方颗粒高效液相色谱图 见图2. C> o oo oO O0 l234 图1黄连配方颗粒TLC图 1黄连配方颗粒2盐酸小檗碱3盐酸巴马汀4盐酸药根碱 2.2.2供试品溶液的制备:取样品约50mg,精密称 定,置50mL量瓶中,加甲醇48mL超声处理60min, 取出,放冷,加甲醇至刻度,摇匀,滤过,弃去初滤液, 取续滤液作为供试品溶液. 2.2.3对照品溶液的制备;精密称取105?干燥至 恒重的盐酸小檗碱对照品,加甲醇制成浓度为 0.08538mg?mL的溶液,作为对照品溶液I;精密 称取105?干燥至恒重的盐酸药根碱对照品,加甲 醇制成浓度为0.5898mg?mL的溶液,作为对照品 溶液?. mAU 175 150 125 loo 75 50 25 0 H C ? ? ? .寸 一J ? 4 A .f _ ? - ? ? . 一,,. 012345678 B 图2盐酸小檗碱,盐酸药根碱,黄连配方颗粒HPLC色谱图 A盐酸小檗碱对照品B盐酸药根碱对照品C黄连配方颗粒 2.2.4线性关系的考查 2.2.4.1盐酸小檗碱线性关系的考查 取盐酸小檗碱对照品溶液,分别吸取2,4,6,8, 10tLL,照上述色谱条件测定峰面积,以峰面积(Y) 为纵坐标,盐酸小檗碱对照品的含量(X)(g)为横 坐标,绘制标准曲线,并计算回归方程:Y= 4008.38402X一102.55928,r=0.9996,结果明, 在0.17076,0.8538tLg的范围内,盐酸小檗碱峰面 积积分值y与进样量X的线性良好. 2.2.4.2盐酸药根碱线性关系的考查 取盐酸药根碱对照品溶液,分别吸取2,4,6,8, 10tLL,照上述色谱条件测定峰面积,以峰面积(Y) 为纵坐标,盐酸药根碱对照品的含量(X)(g)为横 坐标,绘制标准曲线,并计算回归方程:Y= 4011859.43X一153.54724,r=0.99959,结果表明, 在0.11796,0.5898tLg的范围内,盐酸药根碱峰面 积积分值y与进样量X的线性良好. 2.2.5精密度试验 精密量取盐酸小檗碱对照品溶液5L,重复进 样5次,测定峰面积,结果盐酸小檗碱峰面积的相对 标准偏差较小,RSD=1.672%.精密量取盐酸药 根碱对照品溶液5tLL,重复进样5次,测定峰面积, 结果盐酸药根碱峰面积的相对标准偏差较小RSD =0.765% 1011 川?如0???如加m0 2004年12月 第26卷第12期 中成药 ChineseTraditionalPatentMedicine December2004 Vo1.26No.12 2.2.6重复性试验回收率测定方法采用加样回收法.精密称取已 取同一批号样品5份,分别按样品的测定方法知含量同一批号的样品,精密称定,然后精密加入一 在给定的色谱条件下进行测定,盐酸小檗碱的RSD定量盐酸小檗碱对照品和盐酸药根碱对照品,按供 为1.643%.盐酸药根碱的RSD为2.781%.试品溶液的制备方法制成供试品溶液,按上述测定 2.2.7稳定性考查方法进行测定,计算回收率,结果见表1,表2. 取盐酸小檗碱对照品与盐酸药根碱对照品混合2.2.9样品测定 溶液,置室温下放置,于不同时间取混合溶液5L取3批样品,按供试品溶液的制备方法制成供 进样,测定峰面积,计算RSD为0.05%.试验结果试品溶液,按2.2.1项 色谱条件进样4L,以外标两 表明盐酸小檗碱,盐酸药根碱8h内稳定.点法计算盐酸小檗碱,盐酸 药根碱含量,结果见表 2.2.8回收率试验3. 表1盐酸小檗碱回收率测定结果 … 盐酸小檗碱加入盐酸小檗测得量回收率平均回收RSD 丐 含量(mg)碱量(mg)(mg)(%)率(%)(%) 1.62 157 1.59 1.63 1.5 143 141 1.6 1.62 l74 3.04 291 324 321 3.22 9938 9554 103.14 97.55 9867 146176329863 2.54 1.33 1.33 113 127 1.34 1.25 0.97 0.95 111 1.13 l25 121 233 222 2.16 2.43 2.52 2.42 表3样品含量测定结果 3讨论 3.1本文曾采用《中国药典12000年版一部黄连项 下的展开剂,但在实验中其分离效果不好,斑点不圆 整,通过实验筛选出的展开剂获得了比较满意的分 离效果. 3.2本文采用高效液相色谱法测定盐酸小檗碱和 1012 盐酸药根碱两个成分的含量,且采用同一波长,同一 流动相,方法简便,快速,准确,更好地控制了产品的 质量. 参考文献 [1]中华人民共和国药典(2000年一部)【S]北京:化学工业出版 社,2000,250 [2]金佩芬,缪华蓉,钱亚萍等.HPLC测定戊己丸中盐酸小檗碱和 盐酸巴马汀的含量[J].中成药,2001,23(1):24 [3]中华人民共和国药典(2000年版一部)[Sj.北京:化学工业出 版社,2000,525 5 3 2 2 0 7 8 9 “ …卯%卯