CDX2和PTEN蛋白表达与胃黏膜肠上皮化生关系的临床研究

CDX2和PTEN蛋白表达与胃黏膜肠上皮化生关系的临床研究 DOC格式论文,方便您的复制修改删减 CDX2和PTEN蛋白表达与胃黏膜肠上 皮化生关系的临床研究 (作者:___________单位: ___________邮编: ___________) 【摘要】 目的,探讨CDX2和PTEN蛋白表达与胃黏膜肠上皮化生,简称肠化,的关系。,观察肠化的胃黏膜病理形态特点,应用免疫组织化学法检测23例单纯肠化、33例不典型肠化和44例胃癌中CDX2、PTEN蛋白的表达,分析其与单纯肠化、不典型肠化及胃癌的关系。结果,CDX2蛋白在单纯肠化、不典型肠化及胃癌中的阳性率分别为82.6%、51.5%和36.4%,胃癌组织中的阳性表达率显著低于单纯肠化组织,χ2=12.947 0,P0.05,,而与不典型肠化组织比较差异无统计学意义,χ2=2.701 0,P0.05,。PTEN蛋白在单纯肠化、不典型肠化及胃癌组织中的阳性表达率分别为86.9,、75.8,和47.7,,胃癌与单纯肠化之间差异有统计学意义,χ2=9.788 5,P0.05,。结论: CDX2蛋白异常表达参与了胃黏膜肠化及癌变的过程,PTEN蛋白对CDX2蛋白的表达可能起到一定的调节作用,不典型肠化与胃癌的关系密切,属癌前病变范畴。将肠化分类方法应用于不典型肠化患者的初步筛选,有望提高早期胃癌的检出率。 DOC格式论文,方便您的复制修改删减 【关键词】 肠上皮化生 CDX2 PTEN 胃肿瘤 【ABSTRACT】 Objective: To study the relationship of expression of CDX2 and PTEN proteins and gastric metaplasia. Methods: Immunohistochemistry Envision method was used to detect the expression of CDX2 and PTEN proteins in simple intestinal metaplasia (SIM), atypical intestinal metaplasia (AIM) and gastric adenocarcinoma. Results: The positive rates of CDX2 in SIM, AIM and gastric adenocarcinoma was 82.6%, 51.5% and 36.4% respectively. The expression of CDX2 in gastric adenocarcinoma was significantly lower than that in SIM(P0.05),while there was no significant difference between AIM and gastric adenocarcinoma (P0.05). The positive rates of PTEN in SIM, AIM and gastric adenocarcinoma were 86.9,,75.8,and 47.7, respectively and the difference between SIM and gastric adenocarcinoma was significant (P0.05). Conclusions: CDX2 protein plays an important role in gastric meteplasia. PTEN might be related with the expression of CDX protein. 【KEY WORDS】 Intestinal metaplasia?CDX2?PTEN?Stomach neoplasms 胃黏膜肠上皮化生,简称肠化,和胃癌的关系一直存在争议,1955 年Morson发现胃癌可以在肠化的胃黏膜处发生,提出肠化和胃癌有 关,1,。但ECTOR等随访171例肠化患者8,9年,只有3例发生 DOC格式论文,方便您的复制修改删减 癌变,2,。CDX2是肠道特异性转录因子, 对肠上皮细胞的分化、增殖、凋亡和肠道特定基因的转录起调控作用。PTEN基因为具有磷酸酶活性抑癌基因,可以通过刺激CDX2启动子转录活性增强CDX2的表达。张建平等,3,根据上皮细胞形态及上皮结构将肠化分为两型,单纯肠化 ,simple intestinal metaplasia,SIM,和不典型肠化,atypical intestinal metaplasia,AIM,,本研究应用免疫组织化学方法检测胃黏膜肠化和胃癌组织中CDX2与PTEN蛋白的表达,探讨肠化与胃癌的关系。 1 资料与方法 1.1 一般资料 收集2005年1月—2006年12月山东大学齐鲁医院普外科收治胃黏膜肠化患者100例。其中SIM 23例,男16例,女7例,年龄32,73岁,平均年龄49.4岁,AIM 33例,男22例,女11例,年龄34,70岁,平均年龄53.2岁,胃癌44例,其中肠型胃癌26例,弥漫型胃癌18例,,男30例,女14例,年龄32,77岁,平均年龄55.5岁。 1.2 方法 单克隆抗体CDX2与PTEN,即用型,及PV9000检测试剂盒均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。取所有患者胃镜活组织检查或手术切除的组织标本蜡块行4 μm 连续切片,作HE和免疫组织化学染色。免疫组织化学染色采用EnVision法,4,,CDX2蛋白阳性染色表现为细胞核或细胞质出现清晰的棕黄色颗粒,PTEN蛋白阳性染色表现为细胞质出现棕黄色颗粒。 1.3 统计学处理 采用SPSS 12.0统计软件进行统计学处理。不 DOC格式论文,方便您的复制修改删减 同胃黏膜病变组织中CDX2与PTEN阳性率的比较采用χ2检验, P?0.05为差异有统计学意义。 2 结果 2.1 胃黏膜病变组织形态学观察 SIM组织由柱状细胞和杯状细胞组成,杯状细胞及腺体形态规则,上皮无假复层改变,AIM组织杯状细胞常呈扁卵圆形,极性紊乱,核仁明显,上皮细胞可呈假复层,细胞核泡沫状呈腺瘤样竖起,胃小凹呈锯齿状,表1,图1,。 2.2 胃黏膜病变组织中CDX2蛋白的表达 5例SIM组织和6例AIM组织细胞质CDX2阳性染色,其他为细胞核阳性染色,未发现细胞核与细胞质同时染色病例,CDX2蛋白在SIM组织的阳性表达率82.6%,19/23,,在AIM组织中的阳性表达率为51.5%,17/33,,在胃癌组织中的阳性表达率为36.4%,16/44,,其中12例为肠型胃癌,4例为弥漫性胃癌,SIM组织中CDX2的表达显著高于AIM组织,χ2=5.707 4,P0.05,和胃癌组织,χ2=12.947 0,P0.05,,而在AIM组织和胃癌组织中CDX2蛋白的表达差异无统计学意义,χ2=1.767 7,P0.05,。 2.3 胃黏膜病变组织中PTEN蛋白的表达 SIM组织中PTEN蛋白的阳性表达率为86.9%,20/23,,AIM组织中的阳性表达率为75.8%,25/33,,胃癌组织中的阳性表达率为47.7%,21/44,。PTEN蛋白在SIM组织中的表达显著高于胃癌组织,χ2=9.788 5,P0.05,,而SIM组织与AIM组织的表达差异无统计学意义,χ2=3.317 6,P0.05,,AIM组织与胃癌组织的表达差异亦无统计学意义,χ2=2.701 DOC格式论文,方便您的复制修改删减 0,P0.05,。 3 讨论 胃癌是我国常见的恶性肿瘤之一,其发病率和死亡率均居恶性肿瘤前列。早诊断、早治疗是目前提高胃癌患者生存率的唯一有效措施。临床胃镜活组织检查的广泛应用使早期胃癌的诊断成为可能。但临床实践发现,胃镜活组织检查技术对早期胃癌的检出率并无很大提高,大部分胃癌患者确诊时已属于晚期胃癌,其主要原因可能与对胃癌前期变化认识不够充分、不明确胃黏膜肠化的类型和胃癌的关系、不能为临床提供可靠的胃黏膜癌前病变随访资料有关。 胃黏膜肠化是指正常胃黏膜上皮细胞在一定条件下,如炎症等,转化为肠型上皮细胞,是胃黏膜的常见病变,部分肠化病变与胃癌的发生发展关系密切,形成正常胃黏膜?浅表性胃炎?萎缩性胃炎?肠化?异型性增生?胃癌,肠型,的多步骤发展过程。临床胃镜活组织检查中发现在胃黏膜良、恶性病变中有大量的肠上皮化生,几乎所有萎缩性胃炎均有肠化病变。但事实上并不是所有类型的肠化均有转化成胃癌的风险,这为临床医师对随访患者行早期胃癌监测带来了困难。目前肠化按化生上皮的形态及黏液成分主要分为3型,完全肠化型,?型,、不完全小肠型,?型,和不完全结肠型,?型,。但由于黏液成分复杂,且肠化病变常常以多种黏液分泌为主,难以通过黏液染色分类。现代分子生物学证实在肠化病变中均有大肠及小肠分化,病灶之间大肠或小肠分化并无显著差异。 本研究对胃黏膜肠化的病理切片进行观察分析,根据组织 DOC格式论文,方便您的复制修改删减 形态学把胃黏膜肠化分为SIM和AIM两种类型,结果显示AIM与胃癌关系密切,属胃黏膜癌前病变范畴。 CDX2基因属同源盒基因家族的一类,其编码的CDX2蛋白包含311个单氨基酸,通过螺旋,环,螺旋的方式结合于DNA的相应区域,以转录因子的形式调节DNA的表达。成年人CDX2蛋白主要表达于小肠和结肠, 对肠上皮细胞的分化、增殖、凋亡和肠道特定基因的转录起调控作用,而正常胃黏膜组织中无表达。目前研究认为CDX2蛋白具有诱导胃黏膜细胞向肠上皮分化的作用,启动了胃黏膜肠化,5,。 本研究结果显示CDX2蛋白在SIM、AIM和胃癌组织中的表达逐渐下降,CDX2蛋白阳性表达见于82.6%的SIM、51.5%的AIM及46.2%的肠型胃癌组织中,提示CDX2蛋白在胃黏膜肠化到癌变的过程中起重要作用,其表达水平随着恶性程度的增加而下降。但CDX2蛋白在AIM与胃癌组织中的表达差异无统计学意义,P0.05,,提示AIM与胃癌的关系密切,这与组织形态观察结果一致。因而推测SIM多为炎症等因素造成胃黏膜上皮损伤后增生修复的适应性改变,AIM为上皮适应性改变的同时伴有基因改变如某些基因表达异常等,在此基础上进一步发生癌变。 本研究还发现有少数病例CDX2蛋白表达部位不在细胞核,而在核周细胞质中,且呈块状分布而非弥漫分布,推测为某一细胞器内的CDX2蛋白,与刘贵生等,6,发现类似,其发生机制需要进一步研究。也有学者认为CDX2在细胞质的表达与幽门螺杆菌引起的炎症 DOC格式论文,方便您的复制修改删减 有关,7,。 Bai等,8,发现CDX2蛋白的表达与胃癌组织类型相关, 肠型胃癌高于弥漫型。但也有学者认为CDX2蛋白在两种类型胃癌中表达并无差异,9,。本研究发现, CDX2蛋白表达于36.4%,16/44,的胃癌组织中, 其中46.2%,12/26,的肠型胃癌病例CDX2蛋白表达阳性,而弥漫型胃癌中CDX2蛋白表达阳性的病例仅占22.2%,4/18,,与Bai等,8,的结果类似。分析原因可能与胃癌细胞来源不同有关,肠型胃癌起源于胃黏膜肠化生灶,而弥漫型胃癌则可能来源于非肠化生细胞。因此CDX2蛋白在肠型胃癌组织中较弥漫型胃癌组织表达增加,6,。 PTEN基因为具有磷酸酶活性抑癌基因, 编码酪氨酸磷酸酶,抑制酪氨酸磷酸化,对细胞增殖和细胞周期起调控作用。有研究认为启动子异常甲基化是PTEN基因失活的主要机制,10,,从而导致其磷酸酶活性明显下降,细胞恶性增殖能力增强,细胞游走性增加并抑制细胞凋亡,促进肿瘤进行性生长和肿瘤细胞增殖活性增加。Sunghoon等,11,发现在结肠癌细胞系中抑癌基因PTEN可以通过刺激CDX2启动子转录活性来增强CDX2的表达,提示在肠化中PTEN对CDX2的表达可能起到一定的调节作用。与CDX2相似,PTEN编码产物在SIM、AIM和胃癌组织中表达逐渐下降。但与CDX2不同的是PTEN在SIM与AIM的表达差异无统计学意义,P0.05,,提示CDX2的表达存在着复杂的调节机制,PTEN只是影响因素之一。 在胃黏膜肠化及癌变的过程中,CDX2蛋白的异常表达是重要因素 DOC格式论文,方便您的复制修改删减 之一。AIM与胃癌的关系密切,其具体的癌变机制有待于进一步研究。 目前共聚焦激光显微内镜已能较准确的诊断胃癌,其敏感性为84,, 特异性为95,,准确性为80,,可以对胃癌做出在体的诊断,12,。 如果将肠化分类方法与共聚焦显微内镜技术相结合,应用于AIM患 者的初步筛选,有望提高早期胃癌的检出率。 【参考文献】 [1] 王沧海,于永征.胃黏膜肠上皮化生研究进展[J].中国实用 内科杂志,2004,9,,562-564. 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