核黄素和川芎嗪对大鼠氧反常心脏作用的比较

核黄素和川芎嗪对大鼠氧反常心脏作用的比较 核黄素和川芎嗪对大鼠氧反常心脏作用的 比较 lg) ,&}_ i南医学院车报1999年第18 卜二y.一' /I /D6 核黄素和川芎嗪对大鼠氧反常心脏作用的比较 ,/, 堑金盎周志泳左保华 摘要离体大鼠心脏缺氧灌注15m_m后,复氧再灌15血n,可诱发氧反常损伤的疾 病模型.结果明,R和T组乞矾 组织SOD活性后者显着高于前者(KO,05),心肌mA含量贝!『低于前者(Ko.05). 此外校黄察和川芎嗪还船降低 种常见的病理过程.目前认为其发生与自由基生成 过多和脂质过氧化有关].因而寻求有效抗自由 基,防止再灌注损伤的药物已成为一重要研究课题. 笔者曾报道核黄素对急性缺血心肌具保护作用,它 能缩小梗塞范围,改善缺血心肌的代谢和功能口].作 者在整体动物实验基础上,进一步研究核黄素对离 体大鼠心脏氧反常的保护作用,并将其和川芎嗪进 行比较,初步探讨其作用机制. 1材料和方法 1.1大鼠离体心脏灌流按文献E43方法对离体大 鼠心脏进行灌流,灌流分3期即预灌期,缺氧期,再 灌期,各期均为15?. 1.2实验分组实验动物随机分成4组:正常组(N 组,n一7),从预灌到再灌全程均用富氧K-H液灌 流;氧反常组(R组,n一7),预灌和再灌均用富氧的 K-H液,缺氧期用乏氧的K-H液灌注IJI1芎嗪组(T 组,n一10),从预灌第lOn起,换用含JII芎嗪 (20rag/L)的K'H液灌注,余同R组;核黄素组(B 组,n一13),从预灌第lOn起,换用含核黄素 (100~/L)的K'H液灌注,余同R组. 1.3观察指标 1.3.1心肌收缩力按文献[4]的方法,记录和显 示心肌收缩力以及单项动作电位(?m.phsicaction ~ntion,MAp). 1.3.2记录和测量以200mm/s纸速分别于预灌 .作者单位心功能研究所 缺氧l5n和再灌第5,10,15n记录 心肌收缩和MAP曲线,分析曲线形态,测量其幅度, 判断心律失常类型和持续时间. 1.3.3测冠脉流出液中超氧化物岐化酶(SOD)活 性每隔5n收集一次冠脉流出液,按90D试剂 盒(南京建成生物工程研究所)说明操作,测定预灌 15血n,缺氧15n和再灌5n的冠脉流出液SOD 活性. 1.3.4心肌组织90D和丙二醛(MDA)的测定灌 注完毕,取下心脏,用滤纸吸干水分称重,从心尖向 上依次剪取组织块0.2g,制成1和10心肌匀浆, 按试剂盒说明操作,分别测定心肌组织中s.lD活性 和MDA含量. 1.4统计学处理所有实验结果用x?s表示,组 内数据以配对资料t检验,组间数据进行成组t检 验,心律发生率用检验. 2结果 2.1基础资料各组间动物体重,心率,心肌收缩 力,MPA形态,振幅,时程和心脏湿重的对照组值均 无显着差异(O.05). 2.2心率经乏氧K_H液灌注后,R组心率虽有所 增加,但波动较大,其余各组心事一直较稳健地维持 在缺氧期的较低水平(表1)., 2.3心肌收缩张力乏氧灌流l5血n,R组心肌收 缩力降低,复氧再灌仍呈继续下降趋势,且出现明显 的收缩不协调,甚至呈局部挛缩状态-B组在缺氧和 ? 166? 再灌期心肌收缩张力下降不明显,与同期的R组相 比有显着差异(尸<0.05.P(0.0l】;而T组在缺氧 和再灌15min时的收缩力均低于R组,至再灌 10rain时开始增加,15rain时反而显着高于R组(fl< 0.05). 表l各组心率,心肌收缩张力和MAP幅度的变化(X-Z-S) 与缺氧15n比段*P<0.05,与同期R组比较zS.P<0.05.zS.zS.P<0.o】 2.4MAPMAP反映一群心肌细胞的电活动,与动过缓2例,室早2例,持续(12士3)rain;T组和B 跨膜动作电位相比,除幅度较小外,其形态,时程和组发生率分别为28和24.显着低于R组(尸< 电位特点两者基本一致N组在灌注全程中MAP的0.O1),主要表现为二联律和室早,T组RA持续约 幅度和时程均无明显改变.其余3组在乏氧灌注(3,5士1.5)min,B组持续约2.5min 后心律自行恢 5min后,MAP幅度开始降低.其中R组下降较为明复正常. 显,与N组相比有显着差异(尸<O,01){T组和B组2.6sOD活性和MDA含量预灌和缺氧期各组 MAP幅度仍然保持较高水平.缺氧15rain时,r组冠脉流出液中SOD活性无明显差异;再灌5rain时, 60动物平台消失,至再灌15rain时,80动物平台R组SOD活性显着下降,其余各组无明显变化.心 消失,其余各组平台始终存在.肌匀浆中SOD活性以R组最低,而MDA含量则以 2.5再灌注心律失常(RA)发生率及持续时间RR组最高,两者与N组相比均有显着差异(尸<o.01 组于再灌早期全部发生心律失常,其中室速3例,心和P(0,05).其余各组改变不明显(表2). 表2SOD活性和MDA含量的变化(士) 与R组比较zS.』o05 皖南医学院1999年第18卷第3期?167? 3讨论钙超载,从而保护再灌注损伤的心脏这一事实已被 心脏氧反常损伤作用与缺氧的时间密切相关.许多作者所证实口.核黄素虽无钙拮抗剂样作用, 缺氧时间短,则细胞内聚集的ATP代谢产物不多.但在灌注全过程中,B组各项指标保持相对稳定.表 产生的自由基不足以引导组织损伤;而缺氧时间过明核黄素能稳定膜结构,维持细胞正常功能.这可能 长,则细胞已经坏死,组织内各种酶活性已完全丧与核黄素是细胞代谢过程的重要辅酶,改善心肌代 失,因此自由基也不能产生.作者采用缺氧15rain谢,保护心肌内多种自由基清除酶系活性,降低血清 后,复氧再凄建立氧反常动物模型结果发现R组各和组织中过氧化脂质含量有关 口].此外,我们在整体 项测定指标与N组相比,不仅未见好转,反而进一步和离体实验中,发现核黄素能适度减慢心率,并使之 恶化,表现为心肌收缩张力下降,肌群收缩不协调,稳定于较低水平,这可能使细胞周围环境变化缓慢. RA发生率高,心肌内SOD活性下降和MDA含量升有利于预防再灌心律失常的发生_l. 高等,表明氧反常动物模型建立是成功的.再灌早期'收稿日期:1998年3月5日) 冠脉流出液中SOD活性显着下降,表明自由基生成参考文献 呈爆发性增加,这和国内外学者采用电子自旋共振 1Werr~SW,etal?Freeradicalsandmyocardialinjury; 技术发现自由基生成的高峰在再灌开始的3~4min"ca""'1986t74"" .. 内相一致嘲.川芎嚷是从中药川芎中分离出的一种._mj. AJ.l,l99o;65(19):' l41 降压,清除自由基和抗脂质3左保华,厨志泳.核黄素对实验生物碱,具有扩张血管, 性心肌梗塞兔心功能的影 过氧化等作用[6].预灌1Omin后,分别给予核黄素和响-雯融医学I991;12(4):36 川芎,要苎常作昱.,要器亨鑫蠹羹注心律失常的影 15rain时,心肌收缩力的恢复优于R组,RA的发生5H::Dfdical妇 率明显低于R组,能维持心肌内SOD活性和MDArepersuseedrathemnzelectmnshinre目? 的含量.从而表明核黄素和川芎囔对心脏的保护作 apec'~oscopy?CiteRes,1987f61(5):757 是耋护sOD活性情除自由基和抗指质过氧化篆,:~芎药,,199理怍4t14业研(10髓用新进展TF用啊大7谢邵平,等. 异搏定对缺血性再灌注损伤大鼠工作心脏的 心肌电生理实验结果表明,核黄素和川芎嚷均保护作用.湖南医科 大.1992;17(4):307 能保持缺氧和再灌期MAP的幅度,前者对MAP的 8LiGR,FexfierGR.Vhamlpreventsslowingoftransmura] 时程无显着影响;而后者使复极2期平台缩短,甚至 onduc6.ndhythmiainan'.tedgumeaIxg 消失.川芎嗪灌注后,显出负性变时性和负性变力性-'一'. 作用,以至于缺氧和再灌期心肌收缩力低于R组,这9薛长勇.营养缺乏和脂质过氧 化的关系.生理科学进展. 一 结果支持了川芎嚷可能是一种和异搏定相似的钙1989{20(3):245. 拮抗剂的观点.钙拮抗剂的负性变时性和变力?陛 1oarm,a1.Prote~e~fectofgalsfmulafi0Ilon 作用,降低心肌耗氧量,减少能量消耗,防止细胞内reper.'"'?a'.'.北 AComparisonoftheProtectiveEffect0fRiboflavinandTetramethylpyrazine(TM) onParadoxicalOxygenDanmgeonIsolatedPerfusedRatHeart YangHuijie,ZhaoGuc~,heng,ZhouZNyong,etal (InstituteofCardiovascularFurwtion.WannanMedicalCollege,u241001) A嘣Aftera15minofanoxicKrebs—henseleit(K— H)bufferfollowedbYa15minofnorroalK—Hbuffer rerfu?,pamdoxicaloxygendamagemodelswereinduced. 1heresultsshowedthatactivityofsuperoxide disrrlutase(SOD)wasmarkedlyhigher(P<0.05)whilethecoNteNtofr? vocardialmalondialdehyde(MDA)wilts nlRrI 【edly1owet(P<0.05)inGroupBandTthaninGroupRandincidenoesofreper~usionR1 Thyth~Rswere reducedbyriboflavinand"IMP.Itisconcludedthatriboflavinand"IMPhavesignificantprote ctiveeffectonoxygen paradox--inducedinjuryinisolatedratheart. Keywordsoxygenparadox;ri10oflavintetramethylpymzine;rats;heart