【doc】HPLC法测定阿昔莫司分散片的含量

【doc】HPLC法测定阿昔莫司分散片的含量 HPLC法测定阿昔莫司分散片的含量 齐鲁药事?QiluPharmaceuticalAffairs2012!. HPLC法测定阿昔莫司分散片的含量 亢玮,王文义,王友国 (鲁南制药集团股份有限公司,山东临沂276006) ? 153? 摘要:目的建立高效液相色谱法对阿昔莫司分散片的含量测定方法.方法采用反相高效液相色谱法.色谱条 件:AgilentC.柱,流动相为:0.005mol?L的硫酸氢四丁基铵溶液(用氢氧化钠试液调节pH值至6.0)一乙腈(90: 1O),检测波长为269nm,流速为1.0mL?min'..结果在选定的色谱条件下阿昔莫司分散片中辅料对主药无干扰,样 品在1,50g?mL内,峰面积与浓度线性关系良好,相关系数r=0.9999,平均回收率为99.94%,RSD为0.2%.结 论本方法简便,准确,专属性强,可用于阿昔莫司分散片的含量测定. 关键词:反相高效液相色谱:阿昔莫司分散片;含量测定 中图分类号:R927.2文献标识码:A文章编号:1672—7738(2012)03—0153一O2 DeterminationofAcipimoxDispersibleTabletsbyHPLC KANGWei,WANGWen—yi,WANGYou—guo (LunanPharmaceuticalGroupCo.,Ltd.,Linyi276006,China) Abstract:ObjectiveToestablishanHPLCmethodforthedeterminationofAcipimoxDispers ibleTablets.MethodsRP — HPLCwasadoptedandagilentCl8columnwasusedwith0.005mol?Ltetrabutylammonium bisulfate(adjustedpH6.0by sodiumhydroxide)一 acetonitrile(90:10)asthemobilephase.Theflowratewas1.0mL?minandthedetectionwavel ength was269nm.ResultsTheexcipientsdidnotinterferewiththemaindrugofAcipimoxDispersib leTabletsundertheselected chromatographicconditionsandthesampleshowedagoodlinearrelationshipwithintherang eof1,50g?mL(r=0.9999) withtheaveragerecoveryof99.94%andtheRSDof0.2%.ConclusionThismethodwassampl e,accurateandspecific,andit canbeusedforthedeterminationofAcipimoxDispersibleTablets. Keywords:RP—HPLC;AcipimoxDispersibleTablets;Determination 阿昔莫司(acipimox)抑制游离脂肪酸自脂肪组织释放, 降低血中极低密度(VLDL)和低密度(LDL)脂蛋白浓度,降 低甘油三酯和总胆固醇水平.可用于高甘油三酯血症(IV 型高脂蛋白血症);高胆固醇血症(?a型高脂蛋白血症);高 甘油三酯和高胆固醇血症(?b型,?型及V型高脂蛋白血 症).在阿昔莫司分散片的质量研究过程中,本实验采用反 相高效液相色谱法,建立其含量测定方法.本法简便,准确, 专属性强,可用于阿昔莫司分散片的含量测定. 1仪器与试药 1.1仪器Agilent1200高效液相色谱仪;VWD检测器. 1.2试药阿昔莫司对照品(纯度为100.0%);阿昔莫司 分散片(规格:0.25g批号:090601,090602,090603)(鲁南贝 特制药有限公司);乙腈为色谱纯,硫酸氢四丁基铵溶液为分 析纯. 2色谱条件与色谱图 色谱柱:AgilentCl8(150mm×4.6mm),流动相:0.005 tool?L的硫酸氢四丁基铵溶液(用氢氧化钠试液调节pH 值至6.0)一乙腈(90:10),检测波长为269nm,流速为1.0 mL?min,.进样量为20.在上述条件下,按阿昔莫司 峰计算理论板数不低于2000.样品溶液色谱图见图1. mAU 120 1O0 80 60 40 20 O 010 图1样品溶液色谱图 ? 154? 3方法学验证 3.1辅料干扰实验取处方量辅料适量,按"3.6"项下操 作.另取阿昔莫司对照品适量,用流动相溶解并定量配制成 10g?mL的溶液,进样测定.实验结果表明辅料不干扰 阿昔莫司的测定. 3.2线性范围取阿昔莫司对照品适量,精密称定,加流动 相溶解并稀释成每1mL含0.1mg的溶液作为贮备液.精 密量取贮备液0.1,0.5,1.0,2.0,5.0mL置10mL容量瓶中, 用流动相定容至刻度,摇匀.在上述色谱条件下,进样20 色谱图.以阿昔莫司浓度C(g?mL)为横坐标,峰 面积A为纵坐标,进行线性回归,得回归方程:A=一22.808 +81.063C,r=0.9999. 实验结果表明,阿昔莫司在1,50}xg?mL浓度范围 内,峰面积与浓度线性关系良好. 3.3精密度实验取"3.6"项下的对照溶液连续进样5次, 以峰面积计算,RSD为0.3%. 3.4回收率实验按处方量取高(120%),中(100%),低 (80%)3种浓度的阿昔莫司对照品,每个浓度分别称3份均 加入处方量辅料,制成溶液,按"3.6"项下操作,计算回收率, 结果见表1. 3.5稳定性实验按含量测定方法,取"3.6"项下的样 品,分别在0,1,2,4,6,8h进行测定,记录峰面积,RSD为 0.5%,说明样品溶液在8h内稳定. 3.6含量测定取本品10片,精密称定,研细,混合均匀; 精密称取适量(约相当于阿昔莫司10mg)置于100mL量瓶 中,加流动相稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液1mL置于10 mL量瓶中,加流动相稀释至刻度,摇匀,滤过,作为供试品溶 齐鲁药事?QiluPharmaceuticalAEairs2012Vo1.31.No.3 液.另取阿昔莫司对照品适量,用流动相溶解并定量稀释制 成每1mL含1Og的溶液,作为对照溶液.分别取对照品 溶液和供试品溶液各20L注入高效液相色谱仪,记录峰面 积,按外标法计算供试品中阿昔莫司的含量,3批样品 (090601,090602,090603)标示量的百分含量分别为99.8%, 99.7%,99.5%. 表1阿昔莫司分散片回收率实验 4讨论 有关文献中流动相采用甲醇一水一冰醋酸(60:40:1) 为流动相,本方法同时结合阿昔莫司分散片局颁中有关 物质检测方法,最终采用0.005mol?L的硫酸氢四丁基铵 溶液(用氢氧化钠试液调节pH值至6.0)一乙腈(90:10)为流 动相,阿昔莫司的理论板数为7231,保留时间为3.2min左 右. 参考文献: [1]公方美,刘加中,孙聚香.HPLC法测定阿昔莫司原料 的含量[J].齐鲁药事,2004,23(7):27—28. (上接第148页) 图6七叶皂苷钠A/七叶皂苷钠B比例 5.2娑罗子中含量最高的成分是七叶皂苷A,七叶皂苷B, 其质量标准中规定七叶皂苷A含量应大于七叶皂苷B含 量,所以采摘时娑罗子中含量应为七叶皂苷A含量高于七 叶皂苷B含量,故用于生产的娑罗子的采摘应在其成熟期后 期(即10月份). 5.3用于育苗的娑罗子,考虑到保持种子水分和营养及提 高育苗成活率的需要,应在9月底之前采摘较好,而不能与 入药的娑罗子同时采摘. 参考文献: [1]国家药典委员会.中华人民共和国药典2010年版(一 部)[s].北京:中国医药科技出版社,2010:275. [2]薛云丽,侯金玲,王苋,等.不同组成比例的七叶皂苷 钠抗炎作用及急性毒性研究[J].齐鲁药事,2009,28 (5):305—307.