【word】 甲氨基阿维菌素苯甲酸盐微乳剂安全性研究

【word】 甲氨基阿维菌素苯甲酸盐微乳剂安全性研究 甲氨基阿维菌素苯甲酸盐微乳剂安全性研 究 2011.01B 总第206期 文章编号:1673—887X《2011)O1—0051—03 doi:10.3969/j.issn.1673-887X.2011.O1.003 甲萄基阿维菌素苯甲酸盐微乳~Ij_i”i--uWm安坌性硼奔 山西省农业科学院植物保护研究所 摘要对质量分数为0.5%的甲 氨基阿维菌素苯甲酸盐微乳剂进 行急性毒性试验研究结果表明, 甲维盐对大鼠经口雌雄均大 于5000mg/kg,经皮?雌雄皆 大于2000mg/kg.大白兔皮肤刺 激积分指数为O,大白兔眼睛加药 不冲洗刺激积分指数为0,豚鼠皮 肤致敏百分率为0,按”农药毒性 分级标准”评价,对皮肤无刺激 性,属弱致敏物,加药不冲洗对眼 睛无刺激性,经口,经皮属低毒农 药.试验结果表明,甲维盐对人畜 低毒.环境毒性研究结果表明,甲 维盐对斑马鱼工c(96h)为27.01 mg/L,根据《化学农药环境安全评 价试验准则》规定的鱼毒分级标 准,评价为”低毒级”;对鹌鹑以有 效成分计,?>2000.0n唔.bw, 根据鸟毒性分级标准,评价为”低 毒级”;对蜜蜂u(48h)为1.96 g/蜂,根据蜜蜂毒性分级标准, 评价为”中毒级”;对桑蚕Lc为 1.80mg/L,根据蚕毒分级标准,评 价为”高毒级”.试验结果表明,甲 维盐对鱼,鸟低毒,对蚕毒性较高. 关键词甲氨基阿维菌素苯甲酸 盐微乳剂急性毒性环境毒 性风险性 中图分类号$82.3 文献标志码A 收稿日期2010—12—04 邮政编码030032 作者简介范仁傻(1959一),男, 山西临猗人,研究员,主要从事农 药应用方面的研究. 范仁俊王振张润祥高越庾琴 封云涛李光玉韩文珍宫帅 甲氨基阿维菌素苯甲酸盐(以下简 称甲维盐)是从阿维菌素B开始合成 的一种新型高效半合成抗生素杀虫 剂,具有超高效,低毒,低残留,无公害 等生物农药的特点,与阿维菌素比较 首先杀虫活性提高了1,3个数量级, 对鳞翅目昆虫的幼虫和其他许多害虫 及螨类的活性极高【l-4],既有胃毒作用 又兼触杀作用,在非常低的剂量(0.084 , 2g/hm)下具有很好的效果,另外扩大 了杀虫谱,降低了对人畜的毒性,而且 在防治害虫的过程中对益虫没有伤 害,有利于对害虫的综合防治.甲维盐 可以增强神经质如谷氨酸和一氨基 丁酸(GABA)的作用,从而使大量氯离 子进入神经细胞,使细胞功能丧失,扰 乱神经传导,幼虫在接触后马上停止 进食,发生不可逆转的麻痹,在3,4d 内达到最高致死率.由于它和土壤结 合紧密,不淋溶,在环境中也不积累, 可以通过Translaminar运动转移,极易 被作物吸收并渗透到表皮,使施药作 物有长期残效,在10d以上又出现第 二个杀虫致死率高峰,同时很少受环 境因素如风,雨等影响_5I.质量分数为 0.5%的甲氨基阿维菌素苯甲酸盐微乳 剂是山西省农业科学院植物保护研究 所开发的针对果树和蔬菜鳞翅目害虫 的水基化产品.目前文献仅报道了甲 维盐乳油对环境生物的安全性评价, 对于其微乳剂的安全性研究还未见报 道,为了明确该药剂对人畜和其他环 境生物的风险性,先后进行了急性毒 性研究和环境毒性研究. 1材料与方法 1.1试验材料 1.1.1供试生物大白鼠:体重 205—220g,雌雄动物分别分为4组,每 组5只.标准饲料喂食,自由饮水.饲 养环境温度23?,27~(2,相对湿度55% - 70%. 大白兔:体重2.2,2.6kg,4只,雌 雄皆有.标准饲料喂食,自由饮水.饲 养环境温度23?,27?,相对湿度55% - 70%. 英国短毛豚鼠:体重315,338g,24 只,随机分为试验组和阴性对照组,每 组12只.标准饲料喂食,自由饮水.饲 养环境温度23?,27?,相对湿度55% - 70%. 斑马鱼苗:体长2,3cm,购自沈阳 市得胜鱼苗养殖场.在试验开始前,设 置10d适应期,使试验用鱼适应试验 用水和实验室环境.同时观察鱼的日 常状态,分离表现异常的鱼.在鱼群背 景死亡率低于5%后再进行试验.在正 式试验前24h停止喂饵. 鹌鹑:孵化后在沈阳顺发鹌鹑养 殖场饲养18d,待能完全鉴别性别后 引入实验室.鹌鹑饲以幼禽商品膨化 饲料,营养成分符合幼禽生理要求.鹌 鹑于不锈钢笼具中饲养,笼具规格60 cm×32cmx32cm,每笼1O只,雌雄分 别饲养.在试验开始前设置7,10d适 应期,使试验用鸟适应实验室环境.同 时观察鸟的日常状态,分离表现异常 的鸟. AGRICULTURALTECHNOLOGY&EQUIPMENT51 意大利成年工蜂:体重约0.10g,试验用蜂在试验前 从蜂箱取出,在试验环境中保持到第二天.饲养于40cm ×40em×40em的网纱蜂笼内,用脱脂棉浸泡适量蜜水饲 喂.设置1d适应期,使试验用蜂适应实验室环境.同时观 察蜜蜂的日常状态,分离表现异常的蜜蜂. 家蚕:2龄,由中国农科院桑蚕研究所提供.家蚕以新 鲜桑叶饲养,营养成分符合稚蚕生理要求.试验用蚕于消 毒培养皿中饲养,饲养皿直径16em,高2cm,每皿20条. 在试验开始前设置1d适应期,使试验用蚕适应实验室环 境.同时观察家蚕的日常状态,分离表现异常的家蚕. 1.1.2供试药剂质量分数为0.5%的甲氨基阿维菌素苯 甲酸盐微乳剂,山西科锋农业科技有限公司生产. 1-2试验方法 1.2.1急性经口毒性试验将甲维盐用蒸馏水配成 464,l000,2150,4640,5000mg/kg不同浓度的水溶液, 一 次经口灌胃,灌胃体积为1mL/100g体重.灌胃前隔夜 禁食,自由饮水.灌胃后立即观察中毒表现,2h后喂食.记 录中毒症状及死亡时间,持续2周,用Horn氏法计算 ?,按”急性经口毒性分级标准”评价结果. 1.2.2急性经皮毒性试验甲维盐用蒸馏水配成 215,464,1000,2150mg/kg不同浓度的水溶液.试验前一 天,用质量分数8%的硫化钠溶液在大鼠背部4cm×5cm 区脱毛,24h后局部无损伤进行试验.试验时将甲维盐涂 于脱毛区,然后覆盖纱布及塑料薄膜,橡皮膏固定.4h后 用温水清洗皮肤.给药后立即观察并记录中毒表现及死亡 时间,持续2周,用Horn氏法计算,JD,按”急性经皮毒性 分级标准”评价结果. 1.2.3急性皮肤刺激试验甲维盐0.5mL/只.染毒前一 天,用脱毛剂质量分数8%的硫化钠溶液在大白兔背部两 侧2cm×3cm区脱毛,然后用温水洗净脱毛剂,观察24 h,局部无损伤用于试验.给药时将甲维盐0.5mL涂于左 侧脱毛区,右侧为对照.然后覆盖纱布及塑料薄膜,橡皮膏 固定,绷带包扎.染毒4h后,用温水清洗残留物,观察记 录1,24,48,72h局部皮肤反应.按”皮肤刺激反应评分” “皮肤刺激强度分级标准”评价结果. 1.2.4眼刺激试验甲维盐0.1mL/只.将甲维盐0.1mL 直接加人4只大白兔左眼结膜囊内,立即轻轻闭眼1s,以 右眼为对照.24h不冲洗.观察记录1,24,48,72h的眼睛 反应.按”眼睛损伤程度评分”,”眼睛刺激分级标准”评价 结果. 1.2.5急性皮肤致敏试验试验组:致敏及激发剂量均为 甲维盐0.1mL. 阴性对照组:仅给予激发接触. 阳性对照组:2,4一二硝基氯苯,致敏剂量15%,激发 剂量5%,用橄榄油配制.试验时取0.1mL. a.致敏接触:试验前24h,用质量分数8%的硫化钠 溶液在豚鼠背部左侧去毛2cm×2cm,24h后局部无损伤 进行试验.试验时将甲维盐0.1mL涂于脱毛区皮肤上,然 后覆盖纱布及塑料薄膜,再以无刺激橡皮膏固定,持续6 h.第7d及14d以同样方法各重复1次. b.激发接触:末次致敏后14d进行激发接触.试验 前24h,用质量分数8%的硫化钠溶液在豚鼠背部右侧去 毛2cm×2cm,24h后局部无损伤进行试验.将甲维盐 0.1mL涂于脱毛区皮肤上,然后覆盖纱布及塑料薄膜,再 以橡皮膏固定,持续6h.每日观察至12d,将出现红斑或 水肿(不论程度轻重)的动物数除以动物总数,求出动物致 敏率.按”致敏率强度分级标准”评价结果. 1.2.6斑马鱼毒性试验根据《f皇农药环境安全评价试验 准则(以下简称《试验准则》),设置10.0,14.68,21.54,31.62, 46.42”扎五个试验浓度,并设1个空白对照组,每组10尾 鱼.试验组和空白对照组同时进行.准确称取样品配制成母 液,然后按设计浓度吸取母液,加到试验用水中充分混匀, 每个浓度组设3个平行,以不加试药为空白对照.将试验鱼 放入试验缸和对照缸内,每缸1O尾.于试验开始后的 4,24,48,72,96h记录中毒症状和死亡数. 1.2.7鸟试验根据《试验准则》,雌雄鸟类给药剂量 20000.0mg,kg.bw,每组鹌鹑雌雄各10只.试验组和空白 对照组同时进行,在试验前16h停止给饵.将供试药剂按 设计剂量以蒸馏水稀释后给药,最高剂量组直接给药,采 用经口给药方法,一次给足设计剂量,给药体积0.1ml_/10 g体重.给药后将试验鸟放回试验笼内,2h后恢复给食. 每天上下午各观察1次,记录鹌鹑中毒症状和死亡情况, 直至第14d.鹌鹑死亡数据以改进Karber法进行统计处 理,求出LD和95%置信区间. 1.2.8蜂试验根据《试验准则》,设置O.30,0.44,O.65,0.95, 1.39,2.04,3.00g,L七个试验浓度,每组2O只蜜蜂.同 时设立空白对照组,溶剂对照组,各组均设3个平行.以丙 酮配制供试药剂溶液.将蜜蜂夹于两层塑料网纱中固定, 用微量注射器穿过网眼在蜜蜂前胸背板处点滴2.0L药 液,滴毕将蜜蜂转移到20em×20cm×20cm的试验蜂笼 中,自由摄取蜂蜜水.试验组和溶剂对照组同时进行.染毒 后在1,2,6和24h进行观察并记录蜜蜂的中毒症状和死 亡情况.蜜蜂死亡结果以Karber法进行统计处理,计算出 JJD. 1.2.9蚕试验根据《试验准则》,设置1.0,1.8,3.24,5.83, l0.50mg/L等5个药液浓度,每个处理2O条家蚕,同时设 计空白对照组.试验组和空白对照组均设3个平行.将供 试药剂按设计浓度配制成药液,以设定浓度药液定量浸渍 桑叶,以6mL药液浸渍6g桑叶,晾干后用染毒桑叶饲喂 家蚕,整个试验期间饲喂处理桑叶.给药后观察并记录家 2011.01B 总第206期 蚕的中毒症状和死亡情况.每天上下午各观察2次,记录 家蚕4h,12h,24h,48h中毒症状和死亡情况.以概率单 位法进行统计处理,求出Lc钔和95%置信区间. 2结果与分析 2.1急性经口毒性试验 大鼠经口给药后,4640,5000mg/kg剂量组雌雄动物 洗脸,活动减少,3h后恢复.余剂量组动物,未见明显异常 反应,所有受试组无1例死亡.LDso为雌雄均大于5000 mg/kg. 2_2,急性经皮毒性试验 大鼠经皮给药后,各剂量组动物均未见明显异常反 应.因此认为在该测试中?均大于2000mg;3,g. 2.3急性皮肤刺激试验 大白兔皮肤经涂甲维盐0.5mL后,局部皮肤在观察 期内无红斑及水肿形成,其皮肤刺激反应平均积分为0. 2.4眼刺激试验 大白免眼结膜囊内加入甲维盐及冲洗后,表现出不适 感,闭眼,1h后结膜轻度充血,水肿;24h后消退,恢复.虹 膜,角膜无明显反应. 2.5急性皮肤致敏试验 阳性组致敏率为100%.甲维盐经激发接触,观察于 12d后,再次激发接触,仍未见红斑及水肿,其致敏率为0. 2.6斑马鱼毒性试验 在96h的试验期间,试验鱼接触药液后,游动减缓, 侧翻失衡.根据数据进行统计处理,甲维盐对斑马鱼毒性 结果为:Lc铀(96h)为27.01mg/L,95%置信区间为21.32 mg/L~34.21mg/L. 2_7鸟试验 染毒后雌雄鸟类未出现明显急性中毒症状. LD钔>2000.0mg/kg.bw. 2.8蜂试验, 染毒后各剂量组蜜蜂出现不同程度的中毒症状.表现 为乏力,迟钝,失去飞翔能力.甲维盐对蜜蜂的)50(48h) 为1.96g/蜂,95%置信区间为1.66-2.32g/蜂. 2.9蚕试验 在饲喂染毒桑叶4h后,中毒家蚕出现口吐清水,体 态成S型等中毒症状.甲维盐对家蚕48hLCso为1.8 mg/L,95%置信区间1.09,2.95mg几. 3结果及讨论 3.1结论 质量分数0.5%的甲维盐微乳剂对大鼠经口?雌雄 均大于5000mg/kg,经皮L上雌雄皆大于2000mg/kg,大 白兔皮肤刺激积分为0,大白兔眼睛加药不冲洗刺激积分 指数为0,豚鼠皮肤致敏百分率为0,按”农药毒性分级标 准”评价,甲维盐经口,经皮属低毒农药,对皮肤无刺激性, 加药不冲洗对眼睛无刺激性,属弱致敏物.试验结果表明, 甲维盐对人畜低毒,风险l生较低. 在环境安全性测试上,根据《化学农药环境安全评价 试验准则》的规定,对鱼表现为”低毒级”,对鸟低毒,对蜜 蜂为”中毒级”,对桑蚕为”高毒级”.试验结果表明,质量分 数0.5%的甲维盐微乳剂对蚕毒性较高,风险性较高,但对 鱼和鸟较安全. 3.2讨论 浙江大学魏方林,朱国念等以及浙江农科院苍涛,赵 学平等分别测试了甲维盐乳油对环境生物的急性毒性,发 现该药剂对鹌鹑中毒或高毒,对蜜蜂剧毒或高毒,对家蚕 剧毒,对斑马鱼高毒,而本试验中测得甲维盐微乳剂对环 境生物的毒性分别为:对鹌鹑低毒,对蜜蜂中毒,对家蚕高 毒,对斑马鱼低毒.可以看出,相比于乳油,甲维盐微乳剂 的毒性有所下降,这说明通过改变加工剂型,可以使农药 毒性降低.此外,微乳剂也是一种环境相容性较好的水基 化剂型,相比于乳油,微乳剂以水为基质,避免了乳油产品 中大量使用有机溶剂造成环境污染和产生药斑,锈斑的问 题,同时在运输,贮藏,使用上具有高度安全性.因此,微乳 剂是高毒,高污染农药剂型理想的替代剂型. 研究结果表明,质量分数0.5%的甲维盐微乳剂对鸟 类,鱼类毒性较低,而对家蚕和蜜蜂毒性较高,尤其是对家 蚕表现为高毒级.因此田间使用该农药时应避免在蜜源作 物开花期,有授粉蜂群的大棚及其他有蜂群采粉区施用, 远离桑园,勿在桑园的上风向使用,防止该药飘移,沉降至 桑叶上对家蚕造成危害. 参考文献 [1】毕富春,徐风波.甲胺基阿维菌素苯甲酸盐研究概述fJ1.农药科学 与管理,2002,23(3):31-33. 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