【doc】 β-环糊精对双氯芬酸钠的包合作用研究

【doc】 β-环糊精对双氯芬酸钠的包合作用研究 β-环糊精对双氯芬酸钠的包合作用研究 ChineseJournalofNewDrugs2005,Vol14No1 (2):95111 [5]刘昌孝,李全胜.马蔺子甲素和乙素的生物分析方法研究[J] 中草药,1998,29(8):533535 [6]张灵芝.脂质体制备及其在生物医学中的应用[M.北京:北京 中国新药杂志2005年第14卷第1期 医科大学中围协和医科大学联合版社.19984647 (接受日期:20040911) 羟丙基..环糊精对双氯芬酸钠的包合作用研究 谢俊,张春来,贺静,周建平 (1金陵药业股份有限公司技术中心,南京210009;2中国药科大学药剂教研室,南京210009) [摘要]目的:研究羟丙基一S一环棚精对双氯芬酸钠的包合作用.方法:采用紫外扫描,差示扫描量热分析法对 包合物进行确定.通过相溶解度法确定包合比例.并观察包合物对家兔股四头肌注射的刺激性.结果:分量测定 结果证明包合物主,客分子比为1:1,药物溶解度由原来的978增至522rag?m1.包合物与药相比.肌肉刺 激性明显降低.结论:双氯芬酸钠经包合后溶解度增加,肌肉刺激性降 低. [关键词]双氯芬酸钠;羟丙基B环糊精;包合物;肌肉刺激性 [中图分类号]R971.1;R944.9[文献标识码]A[文章编 号]10033734(2005)01006103 Compoundingofdiclofenacsodiumwith hydr0xypr0pyl?cyclodextrin XIEJun,ZHANGChun—lai,HEJing,ZHOUJian—ping (1TechnologyCenter,JinlingPharmaceuticalCornpanyLimited,Naing210009,2ina; 2Depaptment()fPkarmaceutics,ChinaPkarmaceuticalU?IiVelsity,Nanjing210009,(‘hina [Abstractj0bjective:Toinvestigatethecompoundingofdiclofenacsodiumwithhydroxypropyl 8一 cyclodextrin.Methods:ThecompoundingW3SassessedbyUVabsorptionspectroscopyanddifferen— tialscanningcalorimetry.ThecompoundingrateW3Smeasuredbyphasesolubilitydiagram.Results: Theanalysesshowedthel:l(guestversushost)compoundingratioofdiclofenacsodiumtOhydrox— ypropyl8一 cyclodextrin.ThesolubilityofdiclofenacsodiumW3Sincreasedfrom9.78rag. mL’tO52.2 mg.mL’.Conclusion:TheirritationofdiclofenacsodiumtOmusclesmayber educedduetOthehigher solubilityafterthecompounding. 1Keywordsjdiclofenac,sodium;hydroxypropyl一~3-cyclodextrin;compounding;muscleirritation 双氯芬酸钠(diclofenacsodium,DS),又名双氯 灭痛,为非甾体类抗炎镇痛药,水溶性低,刺激性较 大,限制了它的临床应用.张雁冰等ll一报道,DS经 l3一环糊精包合后,溶解度,溶出度以及刺激性均有所 改善.但是由于l3一环糊精自身水溶性低(25?时溶 解度为18.5mg?mL’)且不良反应较大,不适合制 备成液体制剂,因此进行环糊精改性的研究近几年 在国外受到重视.在众多的环糊精衍生物中羟丙基 一 l3一环糊精衍生物(HP—l3一CD)被认为是最有前途的药 物载体材料之一一.本实验采用HP—l3一CD对Ds进 行包合,考察了药物的包合比,溶解度,同时以市售 DS注射液(Olfen一75)为对照,进行家兔肌肉刺激性 试验,为进一步制备合适的剂型提供理论依据. 材料和方法 1仪器与试剂 DS(广州明兴制药厂,批号:0010l1);DS对照 品,HP—l3一CD(江苏一鸣精细化工有限公司);X4型 显微熔点测定仪(北京光学仪器厂);差示扫描量热 器(日本NETZSCH公司);Agilent8453型紫外扫描 仪(美国Agilent公司);UV9200型紫外分光光度计 (北京瑞利分析仪器厂);水浴恒温振荡(国华 THZ82);旋转蒸发器(上海医械专机厂,ZFQ85A); 水循环真空泵(河南巩义市英峪仪器厂,J一250 型),其余试剂均为分析纯. 2动物 一 6l一 ChineseJournalOfNewDrugs2005,Vol14No1 家兔,体重1.7,2.4kg,由中国药科大学动物 房提供. 3实验方法 3.1包合物制备 称取HP—J3一CD5g,置于50mL小烧杯中,加 10mL水溶解,放于磁力加热搅拌器上,40?边搅 拌,边加入药物粉末,直至出现浑浊,继续搅拌1.5h, 将溶液自然降温,室温下静置12h,过滤,滤液经真 空干燥后,取出研磨即得. 3.2包合物的物性鉴定 3.2.1DS包合物的紫外吸收峰位确定配制一系 列DS浓度相同,HP—J3一CD浓度不同的溶液,按上述 包合物制备方法在一定条件下进行包合,待反应平 衡后,以同浓度HP—J3一CD为空白,测其在200, 400nm范围内的吸收光谱,并与相同浓度的DS做 比较. 3.2.2熔点测定将HP—J3一CD,DS和DS包合物 用)(d型显微熔点测定仪(温度计未校正)测定熔点. 3.2.3差示扫描量热图谱(DSC)将DS,HP—J3一 CD,两者混合物与包合物4种样品进行差示扫描量 热分析,升温速率为l0??min,升温范围为50, 350?,测定气为氮气. 3.3包合物含量测定 3.3.1曲线的绘制精密称取干燥至恒重的 DS对照品适量,加0.01mo[?L氢氧化钠溶液溶 解,配制成不同浓度的溶液,于276nm波长处测其 吸收度(A)值,绘制标准曲线,得回归方程:A= 0.0327C+0.002l,7一=0.9999(7z=3). 3.3.2包合物含量测定称取包合物粉末50.0 mg,用0.0lmol?L.氢氧化钠溶液溶解后置100mL 量瓶中,稀释至刻度.以0.01tool?L.氢氧化钠溶 液为空白,于276nm处测吸收度值,从标准曲线求 得DS含量. 3.4观溶解度测定 准确配制一系列不同浓度的HP—J3一CD溶液 (5%,25%),分别取10mL置数个具塞试管中,加 入过量的DS至上述溶液中,于25?水浴恒温振荡 72h,至溶解达到平衡后,平衡液经离心后,取上清液 适当稀释,以同浓度HP—J3一CD做空白,于276nm波 长处测定吸收度值.代入标准曲线计算相应的DS 浓度. 3.5包合物主客体分子物质的量组成比的确定 参照文献方法(相溶解度法),以DS溶解度S (mol?L)对HP.J3一CD的浓度C(mol?L’)进行线 一 62一 中圜新药杂志2005年第14卷第1期 性回归,若包合物主客体分子物质的量组成比为l: l,则s与c呈线性关系,同时根据该直线的斜率和 截距可求出表观稳定常数:K=斜率/[截距(1斜 率)].若包合物组成比不为l:l,则此关系不成立. 3.6包合物肌注的刺激性考察J 取试验家兔,雌雄兼用,分别于一侧股四头肌以 无菌操作方法注入供试品,o另一侧相应部位同法注 入等容积灭菌生理氯化钠溶液作为对照.48h后将 家兔放血处死,解剖取出股四头肌,纵向切开,观察 注射部位的刺激反应. 结果 1包合物物性鉴定 1.1DS包合物紫外吸收峰位的确定 扫描结果如图l所示.结果表明,当DS浓度 相等时,游离态药物的吸收光谱与包合态药物完全 重叠,位置(276nm)及吸收强度均未变化.说 明包合物形成与否对DS紫外吸收没有影响,即分 光光度法可直接用于包合物中DS的分析测定,结 果不受影响. A/nm 罔1DS住不?浓度HPi3一(‘I)溶液,f,的紫外?描【划潜 1.2熔点测定 HP—J3一CD未见有明显熔点:DS的熔点为290, 294?.包合物亦未见有明显熔点.结果说明,包合 物与DS不同,已形成新的物相? 1.3DSC图谱 见图2.从图2中可知,曲线l:DS的熔点出现 在288?且熔融时分解;曲线2表明HP—J3一CD属于 无定型粉末;曲线3中DS吸热峰明显降低,但分解 峰基本与l相似,表明HP—J3一CD在升温过程中可能 包合药物;曲线4中DS无明吸热峰,放热峰明显 后移,说明HP—J3一CD已完全包合DS,且提高了药物 耐热分解性能.曲线3基本上是曲线l和2的叠 加,说明物理混合不起包合作用,而包合物与药物, 混合物的图谱有明显的差异,说明已形成包合物 ,_-L.l_’ it IIYq.【IP,I.1却1I蜘毹扮4却】I也扣 2IlHl一3?}!l/JIJl剖艚 2包台物含量测定 将样品f{!lJ定后的数值代人标准『m线,汁算得包 合物含量为l54%(质量分数, 3表观溶解度及包合物分子物质的量组成比 不同浓度HP-(‘D在25,条件下对I)s的溶 解度的考察结粜见表1结粜表叫.在5%,25%浓 度范围内.随HP一口.(‘【)浓度的增加DSfr;Jf{=f解度呈 线 .塑堕托21~0…5tl:蔓l鳖笙l】 实验过程巾.陶眼观察劓部位处,发现市售 ()lfen75注射液给药部位有肌肉褐色变.坏北等 刺激表现,而包台物的给药部竹仪?现巾度充l札现 象且直径在l0cm以下说叫色合物与原药相比刺 激性有明硅降低j 讨论 包台物与药物,混台物的DSC圈潜有明显的差 异,药丰身的熔融峰2888V处.目.徉熔融后发生分 解.雠台物在同一温度处仍保持有药物熔融峰和分 解峰,而在包台物的DS(,图潜上未皑有明显的药物 熔融峰.分解峰nJ]显后移.说I?]包物已构成一种新 的物.H热稳定增加= 采用HP_【j_CD对DS进}T增济之后发现,在所 配制的HP一!{_CI)系列浓度(5.,25%)的溶|嵌巾. 药物的溶解度随HPBCD川垦的提高呈线性增加, 25?%的HP.0一CD溶液时药物?增溶作州最强.包台 后鲥物溶解度增大了434竹,即由978增至 512n’,g_兀_L,推测其增溶原理?r能是由于药物分 子结构中的羧酸摹团同HP—B—CD亲脂脏体}}?的精 苷健氧原于产生了共价键结台.使得原药?溶解 度增加 反应的包合常数K是衡精乜合物稳定性的重 要参数,表示溶液游离药物抒子与被包合fl勺药物 分于之问存在的动态平衡关系,K值越大.说明 HP—S—CD对药物的稳定作用越强 本实验删得25?条件下白勺包合常数K值为 l220,说明本包合物的稳定肚较好『亓j时肌肉刺 激结果表明,DS经包合之后刺激制:较原药明显 降低 [作者简介]’,fI975).再.土.三善?i事药翱研 事强乐由【:(02j)II2999,~402 [参考文献] 张冰.武蚌.越竹涪【)和d环制精求溶随J-n乜骨” ft【qJ『曲.艇.19tJ9.3a3一.I65I67 l蜘{睾Iq萆俯{tUl:糊特的特儿刑学』趋用lu?溺医 I.业,2IIO2.3361:30431t7 At+uy+~Yc_.,K1IMll~lOtt)M._1I}1【1,,rfi!iof2hydrox ?,rl>pyl1x’?1inInl11.1…i?rt?】?JL-ilrepar~fi,:ln【]{ .ittt,:~lilfi?t(J??』”f,.I991I.38(I}:I76I79 ?一?