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木瓜酶

2017-09-20 4页 doc 27KB 22阅读

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木瓜酶木瓜蛋白酶对马肉品质的影响 摘要:研究了木瓜蛋白酶对马肉(半腱肌)pH、色泽、保水性,感官评价等食用品质和MFI值、剪切力、胶原蛋白等理化指标的影响;通过添加不等量的木瓜蛋白酶,马肉的pH下降速度更快;木瓜蛋白酶会使L值和a值降低,对b值的影响不显著(P>0.05);木瓜蛋白酶对马肉的系水力和蒸煮损失率影响极显著(PO.05),不溶性胶原蛋白含量显著下降(P<0.01).木瓜蛋白酶对嫩度和咀嚼性的影响极显著(P<0.01),木瓜蛋白酶的添加量越大,马肉的嫩度和咀嚼性评分值越高,风味的变化不明显,消费者更喜欢嫩度好、易咀嚼的马肉...
木瓜酶
木瓜蛋白酶对马肉品质的影响 摘要:研究了木瓜蛋白酶对马肉(半腱肌)pH、色泽、保水性,感官评价等食用品质和MFI值、剪切力、胶原蛋白等理化指标的影响;通过添加不等量的木瓜蛋白酶,马肉的pH下降速度更快;木瓜蛋白酶会使L值和a值降低,对b值的影响不显著(P>0.05);木瓜蛋白酶对马肉的系水力和蒸煮损失率影响极显著(PO.05),不溶性胶原蛋白含量显著下降(P<0.01).木瓜蛋白酶对嫩度和咀嚼性的影响极显著(P<0.01),木瓜蛋白酶的添加量越大,马肉的嫩度和咀嚼性评分值越高,风味的变化不明显,消费者更喜欢嫩度好、易咀嚼的马肉。这说明添加木瓜蛋白酶可以提高马肉的食用品质。 关键词:木瓜蛋白酶;马肉;半腱肌 马肉含有丰富的蛋白质、氨基酸和多种矿物质元素,具有很高的营养价值和保健价值[1]。由于近几年欧美国家疯牛 病口蹄疫等疾病的盛行,马肉制品成为肉类市场 上越来越受消费者欢迎的肉制品。但是由于不同部位的肌肉由于其生理功能不同,其肌纤维的类型构成、结缔组织、脂肪含量等不一样,一般来说运动量越大的肌肉,其肌肉的嫩度就越差,需要采取一些措施来改善其嫩度,提高其营养价值。木瓜蛋白酶是半胱氨酰基蛋白酶,对胶原蛋白和弹性蛋白具有很强的分解作用,可以使肌纤维断裂,不仅有助于提高肉的嫩度,还有利于人体消化吸收。国际上把木瓜蛋白酶列入A级食品添加剂,不限制其用量,可放心使用[2]。因此,本试验以马腿部半腱肌为材料,使用目前最广泛的木瓜蛋白酶为嫩化剂,研究了不同的木瓜蛋白酶添加量对马肉pH、色泽、保水性、嫩度等食用品质和MFI值、胶原蛋白含量等理化指标的影响,为马肉的大规模生产加工提供一些可靠的试验数据,进而提高马肉的加工特性和食用品质。 1材料和方法 1.1材料 马肉(新疆昭苏县绿源食品有限责任公司);木瓜蛋白酶(南宁庞博生物技术有限公司)。 1.2仪器和设备     便携式pH计(德图仪(深圳)有限公司);数字显示温度计(美国Delta TRAK公司);DC—P3新型全自动测色色差计(北京市兴光测色仪器公司);电热恒温水浴锅(北京市永光明医疗仪器有限公司);TA—XT2i型物性仪(英国Stable Micro System公司);高速冷冻离心机(上海安亭科学仪器厂);Tu一1810型紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司);GR一20真空滚揉机(诸城市美邦机械有限公司);电子扫描显微镜(德国里奥电镜有限公司1430VP)。 1.3试验方法 1.3.1木瓜蛋白酶活力的测定采用紫外分光光度法测定,蛋白酶溶液1.0mL与酪蛋白溶液5.0mL混合,置(37±0.2)℃水浴中反应10min,加三氯乙酸溶液终止反应,用干燥滤纸过滤,滤液在2h内采用分光光度法以水为空白,在275nm波长处测定吸光度A;酪蛋白溶液和三氯乙酸溶液顺序互换其他操作相同,测定吸光度A。;另取酪氨酸对照溶液,以0.1mol/L盐酸溶液为空白,在275nm处测定吸光度An。酶活力/(U/mg)=百A--Ao×品箦3_×11×』\『式中:w,为对照品溶液每ImL中含酪蛋白的量#tg;W为供试样品的取样量/mg;ll为测定总体积/mL;N为供试样品的稀释倍数。在上述条件下,每分钟水解酪蛋白生成llxg酪氨酸所需粗蛋白酶的量为1个酶活力单位。 1.3.2马肉嫩化处理的方法 将木瓜蛋白酶溶于纯净水中,将其置于100mL烧杯中,将木瓜蛋白酶液注射人马肉中,木瓜蛋白酶的添加量分别为0U/g、5U/g、10U/g、15U/g、20U/g、25U/g、30U/g,添加量按肉重的10%添加,然后将其用自封袋密封,置于滚揉机滚揉30min,取出后使用真空包装袋真空包装,置于0*C~4"C的冰箱中,放置一天后取出待测。 1.4测定方法 1.4.1 pH 用便携式pH计测量肉的pH,pH计使用前先进行校准,探头插入深度为2cm左右,每个样品取三个测量点,每个点测两次,最后取其平均值。 1.4.2色泽 将经过处理的肉从真空包装袋中取出,在空气中暴露15min,用色差计测定样品的的L宰(亮度)、a木(红度)、b半(黄度),每个样品测六次并取其平均值。 1. 4.3系水力 采用离心法。精确称取59左右于离心管中,1500r/min离心30min,取出肉样用定性分析滤纸 吸去表面渗出的多余水分,称其质量,计算系水力。每个样品做3次平行,取其平均值。 1.4.4蒸煮损失 称取509左右的马肉切分成小块,放于蒸煮袋中,置于90。C水浴锅中加热。当马肉的中心温度达到70。C时,取出样品,快速冷却至常温,用滤纸擦干表面水分,然后称重。1.4.5剪切力取适量大小的肉块置于蒸煮袋中,尽量将蒸煮袋中的空气排出,将袋口密封,在80。C恒温水浴锅中加热,当马肉中心温度达到70。C时,维持约30min,然后冷却至室温取样。沿着肌纤维方向切取lcm厚,lcm宽的肉条,然后在TA—XT2i型物性仪上测定其剪切力,重复测量五次并取其平均值。剪切力测定参数:探头:HDP/BSW;测试模式:TPA;测试前速度:2.OOmm/s;测试速度:2.00mm/s;测试后速度:10.OOmm/s;下压距离:30.OOmm;负载类型:Auto一209;数据获得率:500PPS;样品规格5cm X Icm×1cm。 1.4.6肌原纤维小片化指数(MFI值)的测定肌原纤维小片化指数的测定按照R.D.Culler[3]的方法,略加修改后进行。取49剪切好的肌肉(除去肉眼可见的脂肪和结蹄组织),在40mL 4 oC的MFI缓冲液(100mmol/LKCI,1 1.2mmol/L K2HP04,8.8mmol/L KH2P04,l mmol/L EGTA,lmmol/L MgCl2,l mmol/LNaN,)中,用组织捣碎机捣碎摇匀。匀浆液在1 0000r/min离心2min,将上清液缓慢倒出,沉淀继续在40mL缓冲液中,搅拌制成悬液,10000r/min离心2min。慢慢倒出上清液。沉淀在10mL的缓冲溶液中制成悬液,通过铜制筛网(20目)以除去结缔组织和碎片。肌原纤维悬液的蛋白质浓度根据Gomall等双缩脲法测定。然后用MFI缓冲溶液调整悬浮液蛋白浓度为0.5mg/mL,在540nm测吸光度,将所得的结果乘200后便得到MFI值。 1.4.7胶原蛋白含量及溶解度分析 可溶性胶原蛋白和不溶性胶原蛋白的分离采用童鲨堡兰捌恭谶渊 士、^。。.。中国食品添加剂Ringer’S试剂溶解法,参照Hill…和Bergman[4]的方法,并作了部分修改。 1.4.8感官评价 将肉放置于将经过处理的马肉置于蒸煮锅中蒸制2h,自然冷却至室温后切块品尝,品尝者在评定前进行专业细致的培训,品尝实验会在独立的安静隔间内进行,Table 1 Sensory evaluation table 项目——评定指标和分值 1 2 3 4 5 嫩度非常硬/软很硬/软中等硬/软有点硬/软软硬适中咀嚼性非常硬/软很硬/软中等硬/软有点硬/软软硬适中风味 没有 轻微 中等 强烈 极强萋翼 不喜欢 煞 有点喜欢 喜欢 非常喜欢 1.4.9超微结构观察 扫描电镜观察样品制备参考Nishimura,et a1.(1999)方法191,并作了部分修改。将所制备好 的肉样切成0.5 x 0.5 X0.5cm的肉柱,于戊二醛中4℃固定3d,然后用磷酸缓冲液(PBS)清洗三次,每次30min,用50%、70%、80%、90%的乙醇梯度脱水各15min,100%无水乙醇脱水3次,每次30min;样品脱水后,用叔丁醇置换3次,每次30min;置换后的样品直接移到样品台上,冷冻干燥,随后用离子溅射仪给样品表面镀一层金属膜,扫描电子显微镜(SEM)在电压为20kV下放大500倍和3000倍观察肌束膜和肌内膜结构的变化。 2结果与分析 2.1实验结果 2.2实验分析 2.2.1木瓜蛋白酶对马肉pH的影响 动物肌肉在宰后由于糖酵解作用使乳酸在肌肉中积累使pH下降,肌肉pH下降的速度和程度对肉的颜色、系水力、蛋白质溶解度以及细菌的繁殖速度等均有影响。木瓜蛋白酶对pH的影响极显著(P<0.01),随着木 能是木瓜蛋白酶可以将肌原纤维蛋白水解,产生瓜蛋白酶添加量的增加,pH下降的更快。原因可 一部分酸性氨基酸,进而导致pH的下降。 2.2.2木瓜蛋白酶对马肉色泽的影响 肉的色泽是消费者对肉品质量的第一印象,同时也是消费者对其质量进行评价的主要依据。肉的颜色主要取决于肌肉中的色素物质肌红蛋白和血红蛋白;其中肌红蛋白是决定肉色的关键物质,肌肉中肌红蛋白的含量和化学状态决定了肉的颜色,由于它受到多种因素的影响,造成了不同动物、不同肌肉颜色深浅不一[11]。3结论木瓜蛋白酶对马肉的pH影响极显著(P<0.01),木瓜蛋白酶添加量越大,pH下降的速度就越快;木瓜蛋白酶会使L值和a值降低,对b值的影响不显著(P>0.05);木瓜蛋白酶 对马肉的系水力和蒸煮损失率影响极显著(P0.05),不溶性胶原蛋白含量下降;在感官评价中,木瓜蛋白酶对嫩度和咀嚼陛的影响极显著(P
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