牛黄解毒片黄芩、大黄非法添加控制方法和提取

牛黄解毒片黄芩、大黄非法添加控制方法和提取 牛黄解毒片黄芩、大黄非法添加控制方法和提取 牛黄解毒片黄芩、大黄非法添加控制方法和提取 目的:对牛黄解毒片中黄芩主要有效成分黄芩苷的转移率进行研究，考察实际生产过程中黄芩苷的动态变化情况，为制定科学、合理的黄芩苷含量限度提供技术支持。对牛黄解毒片中黄芩和大黄的定性鉴别方法系统研究，并对黄芩中黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素的含量进行测定，建立多成分的质量控制体系，有效控制生产投料和非法添加，确保药物的安全、有效、可控。同时，对牛黄解毒片中黄芩、桔梗、甘草、石膏四味药的提取工艺进行研究，探索不同工艺参数对有效成分的影响，为药品生产提供技术依据。方法:以黄芩苷为指标，采用高效液相色谱法测定原料、半成品、成品中黄芩苷的含量，计算转移率。采用HPLC-FLD法检测牛黄解毒片中非法添加成分(土大黄苷)。选用高效液相梯度洗脱法对黄芩药材、黄芩水提物和牛黄解毒片进行特征指纹图谱分析，研究制剂中黄芩成分与黄芩药材、黄芩水提物指纹图谱相关性。同时采用高效液相色谱法对黄芩药材、牛黄解毒片中黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素的含量进行测定，对不同厂家牛黄解毒片三种成分含量进行方差分析和聚类分析，模拟牛黄解毒片样品拟定黄芩素含量限度。采用正交试验法，以黄芩苷和甘草酸含量作为考察指标，优选黄芩、桔梗、甘草、石膏最佳水提工艺，确定适宜提取工艺条件。结果:现行中黄芩苷含量限度偏低，不能有效控制牛黄解毒片中黄芩的投料。对20批次不同生产厂家牛黄解毒片中土大黄苷进行了检测，其中有8批次样品呈阳性，部分生产企业存在非法投料现象。通过指纹图谱分析，发现牛黄解毒片中相对稳定的共有峰有8个，其中黄芩特征峰7个，确定了牛黄解毒片中黄芩的特征指纹图谱。方法差分析不同厂家17批次牛黄解毒片中黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素的含量测定结果差异显著，聚类分析得到不同厂家聚类关系，制定黄芩素含量限度为 1.6mg/片。正交试验结果明提取次数为水提取主要影响因素，确定最佳工艺为加7倍量水，提取3次，每次1h，有效成分黄芩苷转移率提高。结论:本试验对黄芩苷的动态转移率研究，为标准中黄芩苷限度的制定提供了依据。采用HPLC-FLD法检测非法添加成分土大 黄苷，操作简单，灵敏度高，对严格控制处方中大黄来源、确保用药安全具有重要意义。黄芩的特征指纹图谱研究及其中黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素的含量测定，为牛黄解毒片中黄芩多成分、多指标质量控制提供了参考。大黄、黄芩非法添加控制方法的研究，适用性强、重现性好，能较好的应用于该制剂的质量控制。运用正交设计法优选出的水提工艺，指标成分黄芩苷转移率提高，所得工艺参数，可为厂家提供一定技术支持。 提要3-5Abstract5-10引言10-12第一章 文献综述12-211 牛黄解毒片质量控制方法研究现状12-15 1.1 化学法12 1.2 光谱法12-14 1.3 色谱法14-152 处方水提物研究概况15-18 2.1 黄芩15-16 2.2 桔梗16-17 2.3 甘草17 2.4 石膏17-183 牛黄解毒片临床应用研究进展18-19 3.1 临床新用18-19 3.2 不良反应194 小结19-21第二章 大黄非法添加控制方法研究21-311 仪器与试药21-222 实验方法与结果22-29 2.1 对照品溶液的制备22 2.2 供试品溶液的制备22 2.3 色谱条件的选择22-26 2.4 检出限度的考察26 2.5 样品检测结果26-293 讨论29-31第三章 黄芩非法添加控制方法研究31-651 牛黄解毒片黄芩特征图谱研究31-54 1.1 仪器、试药与样品31-32 1.2 实验方法32-41 1.3 指纹图谱系统适用性试验41-43 1.4 黄芩药材特征图谱研究43-46 1.5 黄芩水提物特征图谱的建立46-49 1.6 牛黄解毒片黄芩特征图谱的建立49-52 1.7 小结与讨论52-542 牛黄解毒片中黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素 含量测定54-65 2.1 仪器与试药54 2.2 方法与结果54-58 2.3 样品含量测定58-63 2.4 黄芩素限度制定63-64 2.5 讨论64-65第四章 牛黄解毒片中黄芩苷含量动态变化分析65-701 仪器与试药652 实验方法与结果65-69 2.1 色谱条件65 2.2 对照品溶液的制备65 2.3 供试品溶液的制备65-66 2.4 牛黄解毒片模拟样品黄芩苷转移率测定66-67 2.5 厂家样品转移率测定67 2.6 牛黄解毒片中黄芩苷限度的拟定67-693 结论69-70第五章 提取工艺研究70-791 仪器与试药702 方法与结果70-78 2.1 黄芩苷含量测定70-72 2.2 甘草酸的含量测定72-74 2.3 水提工艺优选74-76 2.4 黄芩、桔梗、甘草醇提工艺研究76-78 2.5 水提与醇提结果比较783 结论78-79第六章 结语79-831 牛黄解毒片中大黄非法添加成分的检测792 牛黄解毒片中黄芩非法添加控制方法研究79-803 牛黄解毒片中黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素的含量测定804 牛黄解毒片中黄芩素的含量限度拟定80-815 牛黄解毒片中黄芩苷动态变化研究816 提取工艺研究81-827 试验不足之处82-83第七章 课创新点83-84 参考文献 84-88致谢88-89论文著作89-94详细摘要94-98