第十一章 革兰氏阴性需氧杆菌

第十一章 革兰氏阴性需氧杆菌 Brucella 布氏杆菌是一类革兰氏染色阴性的短小杆菌，系英国医生布鲁氏（Bruce）首先从发病的羊体内发现的，故名布鲁氏菌。布氏杆菌是人畜共患传染病——布氏杆菌病的病原体，危 害很大。 一、分类 根据因子血清、染料抑菌、二氧化碳需求、硫化氢产生、噬菌体裂解、对某些氨基酸和 糖类代谢分解情况以及寄生宿主等特点，将布氏杆菌分为 6个种19个生物型。 1．羊布氏杆菌（羊种布氏杆菌，马尔他布鲁氏菌）：1887年发现，3个生物型。 2．牛布氏杆菌（牛种布氏杆菌，流产布鲁氏菌）：1897年发现，9个生物型。 3．猪布氏杆菌（猪种布氏杆菌，猪布鲁氏菌）：1914年发现，5个生物型。 4．沙林鼠布氏杆菌（沙林鼠种布氏杆菌）：1956年在美国沙漠野鼠中发现。 5．绵羊布氏杆菌（绵羊附睾种布氏杆菌）：1953在新西兰公绵羊中发现。 6．犬布氏杆菌（犬种布氏杆菌）：1967年由猎犬中发现。 驯鹿布氏杆菌，前苏联学者发现，与其它6种不同，但还未被国际微生物分类委员会正 式列入分类表中。 二、形态染色特性 革兰氏染色阴性，球杆菌或短杆菌，三无，用沙黄-孔雀绿染色法，本菌染成红色，其 它菌染成绿色（兰色）。 三、培养与生化特性 1．需氧菌，初代分离培养时，对营养要求较高，且生长缓慢（20-30天） 2．常用肝汤、胰蛋白胨肉汤、马铃薯培养基或特制的布氏杆菌肉汤培养 3．牛布氏杆菌初代培养时需5-10% CO 2 4．对糖类的分解能力弱 四、抗原构造 布氏杆菌存在A、M和G抗原，牛布氏杆菌A抗原与M抗原之比约为20：1，羊布氏杆菌A抗原与M抗原之比约为1：20。猪布氏杆菌A抗原与M抗原之比约为2：1，G抗原三个种布氏杆菌皆有。 五、抵抗力 1．本菌对干燥和寒冷抵抗力较强 （1）土壤、水中存活1-4个月；（2）肉、乳类食品中存活2个月；（3）羊毛上可存活80-115天。 2．对热、常用消毒剂、紫外线和各种射线都很敏感，对各种抗生素和化学药物有不同 程度的敏感性（对链霉素、土霉素、庆大霉素、卡那霉素、氯霉素、金霉素敏感，对磺胺类 中度敏感，对青霉素不敏感）。 六、致病性 1．本菌为细胞内寄生菌，产生内毒素，可导致人和60多种动物发病。 2．各种布氏杆菌的感染范围（宿主） （1）羊布氏杆菌：主要感染绵羊和山羊，牛、猪、鹿、骆驼等也可感染。 （2）牛布氏杆菌：主要感染牛、马、犬，有时感染水牛、羊和鹿。 （3）猪布氏杆菌：主要感染猪，也可感染牛、鹿和羊。 3．人类对布氏杆菌易感，以羊种多见（致病性强），猪种次之，牛种最少。 流行病学调查表明，未见到从同一机体内同时分离到两个不同的布氏杆菌种，或在较小 范围内（一个畜群或一个畜牧场等），几乎也未分离出两个不同种的布氏杆菌。 七、微生物学诊断 （一）细菌学检查 病料：整个流产胎儿或其胃内容物，羊水，胎盘的坏死部分，乳汁或尿等。 1．涂片染色镜检：用鉴别染色法，但检出率低。 2．分离培养：营养要求高，生长慢，危险。 3．动物试验：常用豚鼠皮下或腹腔接种。 （二）血清学检查 主要是检查血清或乳汁中的布氏杆菌抗体，常用试管凝集试验、平板凝集试验、虎红平 板凝集试验、乳汁环状试验、补体结合试验等 （三）变态反应检查 此法可用于绵羊、山羊和猪的布氏杆菌病的诊断，对慢性病例的检出率高。 动物患病后，首先出现凝集反应，其消失亦早；其次出现补体结合反应，其消失较晚； 最后出现变态反应，保持时间较长。 凝集反应 补体结合反应 变态反应 结果 + +或- - 布病初期阶段 - - + 布病停止或康复阶段 八、免疫防治 1．一般为带菌免疫，初代感染后，体内存在细菌，对再次感染有较强的免疫力。 2．免疫力以细胞免疫为主，兼有体液免疫。 3．发病后3-6周生成?型变态反应，且存在时间较长，可达数年。 4．目前，布氏杆菌的菌苗已有50多种 （1）牛型19号弱毒活菌苗：为国外弱毒菌株，主要用于牛和绵羊，猪无效。该苗对牛 免疫效果好，已经过50多年的考验，免疫期9个月，影响检疫，对孕牛、孕羊和山羊不安 全。 ）弱毒活菌苗（羊布氏杆菌5号苗）：1969年哈兽研研制成功，对5 （2）羊型5号（M牛、绵羊、山羊及鹿均有效，可气雾或皮下接种，免疫期：羊1.5年，牛、鹿1年。对孕牛、 孕羊不安全，可能发生流产。现用M5-90株。 （3）猪型2号（S）弱毒活菌苗（猪布氏杆菌2号苗）：1964年中监所研制成功，适2 用于牛、羊、猪和鹿等多种动物，可采用皮下注射、肌肉注射、气管接种或口服等方法进行 免疫，把菌苗拌入水中或饲料中给动物口服更能发挥作用，免疫期一年。该苗对孕畜安全， 也可用于紧急接种。缺点是影响正常的检疫。 （4）布鲁氏杆菌活疫苗（M—111株）：内蒙古生物药品厂生产，用于预防绵羊和山羊 的布氏杆菌病，免疫期一年，接种方法为皮下或肌肉注射及口服，接种前后应停止使用抗生 素和含抗生素的饲料及发酵饲料，孕羊不能使用。该苗优点是不影响正常的检疫。 Pseudomonas 假单胞菌属是一类革兰氏阴性、直或微弯的杆菌，极大多数有鞭毛，专性需氧。本属细 菌在自然界分布很广，存在于水，土壤，污水，空气和动、植物体表，种类繁多。兽医上常 见的有鼻疽杆菌、绿脓杆菌。 一、鼻疽假单胞菌 （一）形态及染色特性 革兰氏染色阴性，直或微弯的中等大杆菌，无鞭毛、荚膜和芽胞， （二）培养 需氧菌，营养要求较高，在马铃薯培养基上呈黄色粘稠的蜂蜜样菌苔；麦康凯琼脂上不 生长；鲜血琼脂平板上不溶血。 （三）致病性 本菌以其产生的内毒素导致动物发病，主要感染马、驴、骡，狗、猫、虎、豹、狼等， 人也可感染，是人畜共患的重要病原菌；牛、羊、猪、禽不感染。 （四）微生物学诊断 1．动物感染试验 2．变态反应检查：常用鼻疽菌素点眼，此法操作简便，对急性、慢性、隐性以及病后 初愈的马匹都能出现反应。 二、绿脓杆菌（铜绿假单胞菌，绿脓假单胞菌） 1．培养：需氧，普通培养基上生长良好，产生色素，使培养基带有颜色（蓝绿色）；本 菌能在41?生长，这是有其他假单胞菌的鉴别要点之一。 2．致病性：本菌为条件致病菌，常因大量使用抗生素、大面积烧伤、机体免疫功能低 下，引起皮肤、粘膜（尿道）感染，肺炎，脑膜炎和牛乳房炎，如果侵入血流，还可引起败 血症。