高效液相色谱法测定不同产地天麻中天麻素含量

高效液相色谱法测定不同产地天麻中天麻素含量 高效液相色谱法测定不同产地天麻中天麻 素含量         &nb sp;             作者:乔怀耀 张兴国 郭健 党连慧 张大全 【摘要】  目的检测不同产地天麻中的天麻素含量。方法参照《中国药典》HPLC法。结果四川省金口河地区所产乌天麻中天麻素含量最高。结论金口河地区乌天麻是优良的天麻栽培品种资源～尽快建立符合国家GAP要求的天麻基地切实可行。 【关键词】  天麻 不同产地 天麻素 高效液相色谱 含量 天麻是兰科植物天麻Gastrodia elata Bl.的块茎～具有平肝熄风止痉的功效～其中有效成分主要为天麻素,1,～临床应用十分广泛～为我国传统名贵药材。早在两千多年前就被《神农本草经》列为上品。有关天麻道地产区的记载很多～如《名医别录》中记载:“赤箭生陈仓川谷、雍州、太 山、少室诸地”,《药物出产辨》亦记载“四川、云南、陕西、汉中所产者佳”。现代研究认为天麻在我国的分布区包括云南、贵州、四川、重庆、湖北、山东、陕西、辽宁、吉林、黑龙江等省区,2,。本专题采用高效液相色谱,HPLC,法测定了四川、云南、陕西、贵州等4个产地的8个样品中天麻素的含量。     1  仪器与材料     1.1   仪器岛津LC-20AT HPLC仪,超纯水机,国产,等。     1.2  试剂乙腈,天津市科密欧化学试剂有限公司,～甲醇,天津市科密欧化学试剂有限公司,～均为光谱纯。     1.3    样品     1.3.1    对照品天麻素～购自中国药品生物制品检定所,批号: 110807-200205,。     1.3.2    天麻样品    采自不同产地的天麻样品按袁崇文,3,方法进行处理～烘干。     2  方法     2.1    样品溶液的制备精密称取天麻样品粉末0.500 0 g～平行重复3次～加稀乙醇40 ml～称重～回流3 h后～称定重量～稀乙醇补足。摇匀后过滤～滤液用0.45 μm微孔滤膜过滤即得样品溶液。     2.2    对照品溶液的制备精密称取对照品0.007 0 g～加流动相溶解并定容至50 ml～混匀即得。     2.3    色谱条件色谱柱为Phenomenex C18柱,250 mm×4.6 mm～5 μm,～柱温30?～流动相为乙腈?0.05%磷酸溶液,3?97,～检测波长220 nm～流速1.0ml〃min-1。     2.4    曲线 制作吸取上述对照品溶液2～4～6～8～10 μl～按上述色谱条件进样～以进样量为横坐标～天麻素峰面积为纵坐标～绘制标准曲线～标准曲线方程为:Y=152 884X+1 529～R=0.999 9。     2.5    样品含量测定取待测样品～按上法制成待测样品～精密吸取样品溶液4 μl～测定天麻素峰面积～计算天麻素含量～计算结果～取平均值。天麻素对照品及样品色谱图见图1，2。     2.6    稳定性实验精密吸取样品溶液4 μl～每隔4 h进样1次～进样6次～6次测得的峰面积的RSD为0.31%～表明样品在24 h内稳定。     2.7    精密度实验精密吸取对照品溶液4 μl～连续进样6次～测得6次天麻素峰面积的RSD为0.25%～表明该实验方法精密度良好。     2.8    重现性实验按样品制作流程～取同一天麻样品～平行制作5份样品～测得天麻素含量的RSD为1.02%～重现性良好。     2.9    加样回收率实验取已知含量的天麻样品适量～加入一定量的对照品～按待测样品制作方法制作成待测样品～测定天麻素含量～结果平均回收率为98.70%,n=6,～回收率较好。     3  结果     本专题按“2.5”样品测定方法测定了不同产地天麻中天麻素的含量。结果见表1。表1  不同产地天麻中天麻素的含量     4  小结     经过对以上几个产地天麻的天麻素含量测定实验的结果显示～产于四川省乐山市金口河区的乌天麻天麻素含量最高～其中云南昭通所产天麻中天麻素含量不及四川峨眉山所产天麻～与文献报道一致,4,。虽然有报道野生天麻中的天麻素含量高于栽培天麻,4,～但野生天麻远远不能满足天麻的市场需求～另外金口河地区所产乌天麻和红天麻中天麻素含量远高于或达到药典标准,1,～陕西、四川等天麻的道地产区所产的天麻中天麻素的含量均超过《中国药典》标准～因此～在天麻传统产区之一的金口河地 区建立符合国家GAP要求的乌天麻培育基地来满足市场 【参考文献】   ,1, 国家药典委员会.中国药典,S,.北京:化学工业出版社～2005:39. ,2, 徐锦堂.中国天麻栽培学,M,.北京:北京医科大学～中国协和医科大学联合出版社,1993:32. ,3, 袁崇文,刘 智,袁玉清,等.中国天麻,M,. 贵阳:贵州科技出版社, 2002:115. ,4, 关 萍～高玉琼～石建明～等.不同产地野生及栽培天麻 1中天麻素含量比较,J,. 中国中药杂志～2005～30,11,:1698.