用HPLC法同时测定六味安消胶囊中土木香内酯、异土木香内酯、大黄素和大黄酚的含量（可编辑）

用HPLC法同时测定六味安消胶囊中土木香内酯、异土木香内酯、大黄素和大黄酚的含量（可编辑） 用HPLC法同时测定六味安消胶囊中土木香内酯、异土 木香内酯、大黄素和大黄酚的含量 药学服务与研究 ;纪松岗,等.用法同时测定六味安消胶囊中土木香内酯、异土木香内酯、大黄素和大黄酚的含量论 著? 用 法同时测定六味安消胶囊中土木香内酯、异土木香内酯、大黄 素和大黄酚的含量 纪松岗 ,金柔男。,赵 亮 ,张国庆 .中国人民解放军海军 医院药剂科,青岛 ; .第二军医大学东方肝胆外科医院药材科,上海 摘 要 目的:建立 法同时测定六昧安消胶囊中土木香内酯、异土木香内酯、大黄素和大黄酚含量的方法。方法: 采用一二极管阵列检测器法 ? ,色谱柱: 柱 ×。 ,,流动相:乙腈一 .甲酸:,流速: . / ,检测波长: ,柱温: ?,进样量: 。结果:土木香内酯、异土木香内酯、 大黄素和大黄酚的线性范围分别是: . ~ . 、 . . 、 . ~. 和 . ~./ ,色谱响应线性关系良好。 日内和日间均 ;最低检测限分别为 . 、 . 、 . 和 . / / 。稳定性结果为峰面积的分别为 . %、 . 、 . 和 . ,在内稳定。加样回收率结果分别为. 、. 、 . %和.一 ,分别为 . 、 . 、 . 和 .。结论:本法快速、简便,重现性好,精密度高,测定结果准确可靠,可作为该制剂的定量测 定方法。 关键词 土木香内酯;异土木香内酯;大黄素;大黄酚;六味安消胶囊;含量测定;色谱法,高压液相 中图分类号 . 文献标识码 文章编号 ?? ?,, ,?。, ,?。. ,. , , ; . ,, , ,: , ,??. : × ., ? 一 . :./ . , , / . : , , ? . ? . , . ? . , . ?.. ?. / , , . 。?,;. ,. , . ./ , . . , . , . . , .. ,. , . . 一 ,. , . , . . , . : , , ?,, . . ; ;; ; ;;? ,&, , : ? 六味安消散系蒙古族、藏族民间验方,由土木 大黄酚为大黄中主要抗菌成分,含量较高 。 香、大黄、山奈、诃子、寒水石、碱花六味中药组成,具 六味安消胶囊为其剂型改革产品,《中华人民共 和国药典 年版对六味安消散采用 法测 有和胃健脾、消积导滞、活血止痛之功效,用于脾胃 定,但样品前处理工艺复杂,需经多次回流和萃取, 不和、积滞内停所致的胃痛胀满、消化不良、便秘、痛 操作繁琐耗时,结果不易重现?。有文献报道利用 经等症 。土木香为方中君药,具有健脾和胃,调气 解郁,止痛安胎之功效? 。土木香内酯和异土木香 内酯为一对同分异构体,是土木香中主要活性成分, 作者简介 纪松岗 一 ,男 汉族 ,博士,主任药师 具有显著的抗炎、保肝活性? 。大黄为方中臣药,具 ? : . 泻热通肠、?血解毒、逐瘀通经之功效口 。大黄素、 通讯作者, ? : .药学服务与研究 ; 纪松岗,等.用 法同时测定六味安消胶囊中土木香内酯、异土木香内酯、大黄素和大黄酚的含量 香内酯 . ,异土木香内酯 . ,大黄素 法测定六味安消胶囊中大黄素、大黄酚的含 量 ,但仅对其中的臣药进行控制,不能完全反映 . ,分别置于 个容量瓶中,取对照品 该制剂的质量。本研究采用二极管阵列检 大黄酚 . 置于 容量瓶中,分别加甲 醇溶解并稀释至刻度,摇匀,得浓度分别为土木香内 测器法 ?法 ,样品经甲醇超声提取,可 同时测定君药土木香中土木香内酯和异土木香内 酯 . / ,异土木香内酯 . / ,大 酯,以及臣药大黄中大黄素和大黄酚的含量,方法简 黄素. / ,大黄酚. / / 的对照品 便、快速、准确,可用于六昧安消胶囊的质量控制。 储备溶液。置于 ?冰箱内保存。 分别精密吸取土木香内酯、异土木香内酯和大 材料 黄素对照品储备液 . ,大黄酚对照品储备液 . 仪器 仪在线脱气机、四 . 置于同一 容量瓶中,用甲醇稀释至 元泵、自动进样器、二极管阵列检测器 , ? 刻度,摇匀,即得 种成分的混合对照品溶液 , 种 成分浓度分别为 . 、 . 、 . 、 . / 。置 /联用仪, 色谱工作 站; 型十万分之一电子天平 瑞士梅特勒公 于 ?冰箱内保存。 司 ;超声波清洗器上海科导超声仪器有限公司 。 . . 供试品溶液的制备 取干燥至恒重的六味 . 试剂和药品 对照品土木香内酯 批号 ? 安消胶囊内容物约 ,精密称定,置具塞锥形瓶中,、异土木香内酯 批号 、大黄素 批 精密加入甲醇 ,密塞,称定重量。超声处理 号 ? 和大黄酚 批号 ? 均购 ,放冷。用甲醇补足减失的重量,摇匀,用 白中国药品生物制品检定所;六味安消胶囊 贵州信 . 扯 微孔滤膜过滤,取续滤液,即得。 邦制药股份有限公司, . /粒,批号、 . . 空白溶液的制备 色谱进样瓶中仅加入溶、;甲醇 国药集团化学试剂有 剂甲醇,用于检测试剂对待测物峰形的影响。 . 结果 限公司 为分析纯;乙腈 公司 和 甲酸 公司 为色谱纯;水为娃哈哈纯净水。 . . 系统适应性实验 按 . 项下方法分别制 备混合对照品溶液 、供试品溶液及空白溶液,在上 方法和结果 述色谱条件下分别进样,得相应的色谱图,见 . 色谱条件 色谱柱:图 。土木香内酯、异土木香内酯、大黄素和大黄酚 柱× .,;流动相:乙腈一 .均与其他组分分离完全,分离度 . ,分别在约 甲酸 :;流速:. / ;检测波长: . 、 、 、 .处出现大黄素、异土木香内 ;柱温: ?;进样量:。 酯、土木香内酯和大黄酚的色谱峰。理论塔板数以 . 溶液的制备 大黄素峰计不低于. × ,以土木香内酯峰计不 低于 × 。 . . 对照品溶液的制备 精密称取对照品土木: : ::::: ::::: ::::一 时 /图 六昧安消胶囊的 谱图 :空白溶液; :对照品溶液; :供试品溶液; :大黄素; :异土木香内酯; :土木香内酯; :大黄酚 . . 线性关系考察 精密吸取 .按 得混合对照品溶液 。取两种浓度的混合对照品溶 . . 项下方法配制的混合对照品溶液 ,置于 液 、 ,在 . 项色谱条件下分别进样 、 、 , 容量瓶中,加甲醇稀释定容至刻度,摇匀,即 以对照品溶液的浓度 , / 对峰面积 进行? & 药学服务与研究;.. .. . / ? ? 线性回归处理。土木香内酯、异土木香内酯、大黄素 . 、 . 和 . /粒,其峰面积的分别为 . 、 . 、 . 和 . 一 。 和大黄酚的回归方程分别是 一 .. . . 加样回收率实验 取已测含量的六 味安消一 , 一.. 一 ., 一 胶囊内容物 批号 份,每份 ,精密称. 一 . 一 ., 一.定,分别精密加入 与样品含量约 : 比例的 种对 . ,.一 . ;线性范围分别是 . ~ . 、 照品储备液适量,按 . . 项下方法操作,测定并计 . ~ . 、 . ~. 和 . ~. “ / 。 算回收率,结果见 。 . . 精密度实验 按 . . 项下方法分别配制 低、中、高 种浓度混合对照品溶液,在 . 项色谱 表 加样回收率实验结果 条件下分别在 内重复测定 次,以及连续 每 天分别进样,根据所得峰面积分别考察日内和日间 精密度,结果表明本方法的精密度良好 见表 。 表 精密度实验结果一 对照品徘 / 日 ? 日? 土木香内酯 . . 样品测定 取 个批号干燥至恒重的六味 安消胶囊内容物各 份,每份,精密称定,按 . . 项下方法操作制备供试品溶液,在 . 项色 异土木香内酯 谱条件下进行测定,每批平行测定 份,计算样品中 种成分的含量,结果见表 。 大黄素 表 样品含量测定结果 大黄酚 ”一 大黄酚 土木香内酯 异土木香内酯 大黄素 含量 批号 声量, 声量, 声【‘ // 粒 /【 粒 粒 / 粒 粒. . 检测限考察 以甲醇分别稀释各对照品溶 ” 粒 ” 液,按信噪比 / 一 : 计,确定其最低检测限分 别为土木香内酯 . / / ,异土木香内酯 ./ ,大黄素 . / / 和 大黄 酚 . . / 。 . . 稳定性实验 按 . . 项下方法制备六味 讨 论 安消胶囊的供试品溶液,在 、 、 、 、 、 、 、 . 前处理条件考察 分别测定 种成分的峰面积,考察其含量的变 . . 提取方法考察 本研究参考《中华人民共和 化。结果 种成分峰面积的分别为土木香内 国药典 年版一部中六味安消散样品前处理方 酯 . 、异土木香内酯 . 、大黄素 .和 法和相关文献。 ,分别考察了 种提取方式:加热 大黄酚 .一 ,表明供试品溶液在 内稳 回流、超声水解后溶剂萃取和直接超声法。结果表 定。 明,加热回流和直接超声法提取的大黄素和大黄酚 . . 重复性实验 精密称取六味安消胶囊批号 含量接近,而采用超声水解后溶剂萃取法测得的大 份,按 . . 项下方法操 作,以各成分 黄素和大黄酚含量较低,并且加热回流和超声水解 峰面积的平均值代人相应线性方程计算 种成分的 后溶剂萃取法提取出的土木香内酯和异土木香内酯 含量,结果六味安消胶囊中土木香内酯、异土木香内 含量很少。苏子仁等 报道大黄素在提取时,因多 酯、大黄素和大黄酚的含量平均值分别为 . 、