野生天麻与栽培天麻药理作用比较研究

野生天麻与栽培天麻药理作用比较研究 野生天麻与栽培天麻药理作用比较研究 50中药药理与临床2006;22(1) 参考文献 lNicoleC.FreeRadjcalBiologyMedicine,1996;20:35 2R.J.Mehlhorn.Ascorbatc-anddehydroascorbicacid—mediatedreduction offreeradicalsinthehumanel'ythrocyte.J.Bio1.Chem.1991;266:2724, 273O 野生天麻与栽培天麻药理作用比较研究 刘建英,莫志贤 (南方医科大学中医药学院,广州510515) 摘要目的:比较野生和栽培天麻的中枢神经系统作用.方法:采用小鼠自主活动检测,戊巴比妥钠阈下催眠和戊巴比妥 钠诱导睡眠试验观察药物的镇静催眠作用.结果:野生和栽培天麻高剂量对小鼠自主活动有明显的抑制作用,并能明显增加戊巴 比妥钠的阈下睡眠个数和显着延长睡眠时间.两种天麻的低剂量组和的各项检测指标均无明显改变.天麻高低两剂量组之间有 显着性差异,但在用药剂量相等的条件下,野生天麻与栽培天麻的作用则无明显差异.结论:栽培天麻对中枢神经系统的抑制作用 与野生天麻基本一致. 关键词天麻;自主活动;阈下催眠;中枢抑制作用 野生天麻资源紧缺,目前市售的天麻多为栽培天麻.天麻 经人工栽培后是否具有与野生天麻相同的药效?这方面的报 道较少本文通过小鼠自主活动测定及镇静催眠试验,对野生 与栽培天麻的中枢神经系统抑制作用进行比较研究. 1材料和方法 1.1试验药物贵州产一级野生和栽培天麻,贵州都匀市制药 厂提供药物制备:天麻药材切碎后用80%乙醇回流提取两 次,合并提取液,回收乙醇,过滤后浓缩至2g生药/ml,置4?冰 箱存放,用前用蒸馏水配成所需浓度使用. 1.2动物清洁级昆明种小鼠,辛6各半,18,22g,第一军医 大学实验动物中心提供.动物合格证号:粤检证字第2000A058 号. 1.3仪器YLS.1A型多功能小鼠自主活动仪,山东省医 学科学院设备供应维修站提供. 1.4小鼠自主活动测定小鼠放人自主活动仪内测定5min, ,辛 剔除个体差异较大的小鼠,取自主活动度近似的小鼠5O只6各半,随机分为5组,灌服天麻提取液0.8mE/只,连续7天. 第7天给药60min后,将小鼠分别放人小鼠自主活动记录仪的 活动箱中,预先适应5min,然后每隔1min记录1次各组小鼠 活动数,连续观察5min后取平均值,比较各给药组与对照组小 鼠的自主活动次数. 1.5戊巴比妥钠阈下催眠试验小鼠100只,辛6各半,随机 分为5组,每天灌胃给予各天麻提取液,0.8ml/只连续7天. 第7天给药60min后,各组小鼠腹腔注射戊巴比妥钠30mg/kg, 以小鼠翻正反射消失lmin以上为人睡指标,记录15min内各 组入睡的小鼠数. 1.6戊巴比妥钠睡眠时间测定小鼠5O只,辛6各半,随机分 为5组,每天灌胃给予天麻提取液0.8ml/只,连续7天.第7 天给药60rain后,各组小鼠腹腔注射戊巴比妥钠50mg/kg,以小 ?通讯作者 鼠翻正反射消失1min以上为人睡指标,立即记录各组小鼠的 睡眠时间(min). 2结果 2.1药物对小鼠自主活动的影响连续给予天麻7天后,野生 和栽培天麻高剂量组小鼠的自主活动数明显减少,野生和栽培 天麻同剂量组之间相比,差异无显着性意义,见表1. 表1对小鼠自主活动的影响(.n=10) Lj对照组比较P<0.05;与栽培天麻商剂量组比较槲P<0.Ol; 栽培天麻高剂量组比较??P<0.Ol 2.2药物对小鼠入睡个数的影响实验结果如表2所示,各组 小鼠入睡个数经X检验表明,x=24.722,P=0.002(双侧), 差异有显着性意义,可认为5个实验组之间的差异有显着性意 义,其中野生和栽培天麻高剂量组小鼠的入睡个数最多,见表 2 表2对戊巴比妥所致小鼠睡眠的影响(i?s) 2.3对小鼠睡眠时间的影响野生和栽培天麻高剂量组小鼠 中药药理与临床2006;22(1)51 的睡眠时间明显延长,与培养天麻高剂量组比较,差异有显着 性意义,见表3. 表3药物对小鼠睡眠时间的影响(i蜘.n=10) 与对照组比较十十P<0.Ol;j栽培天麻高剂量组比较#P<0. o5,槲P<O.01 3讨论 作为平肝息风药,镇静催眠是天麻的基本药理作用.本研究 通过基本的镇静催眠药理试验,比较贵州产的野生天麻与栽培天 麻对小鼠中枢神经系统的抑制作用.结果表明,野生和栽培天麻 高剂量对小鼠自主活动有明显的抑制作用,能增加戊巴比妥钠诱 导的小鼠阈下睡眠个数,并显着延长睡眠时间.天麻高低两剂量 组之间有显着性差异,表明天麻用量增加可加强该药的药理作 用,但在用药剂量相等的条件下,野生天麻与培养天麻的作用则 无明显差异.提示培养天麻对中枢神经系统的抑制作用与野生 天麻基本一致.据报道,天麻注射液能降低大鼠脑内的多巴胺和 去甲肾上腺素的含量.在离体脑片中观察到,天麻注射液可使皮 层,脑干,纹状体的人工脑脊液中的多巴胺含量增多,同时也使 去甲肾上腺素含量增加J.故认为天麻的镇静催眠作用可能与 其降低脑内多巴胺和去甲肾上腺素含量有关.但天麻对中枢神 经系统的作用机制仍有待进一步研究. 参考文献 1黄彬,石京山.天麻对大鼠脑内多巴胺禽量及释放的影响.贵州医 药,1993;17(1):35,37 生津口服液对干燥综合征动物模型治疗作用的初步研究 孙宇扬,张丽h,王旭丹,贾波,葛东宇.刘建勋 (中国中医科学院西苑医院实验研究中心,北京100091;北京中医药大学免疫教研 室.北京100029) 摘要目的:观察生津口服液对干燥综合征小鼠模型的治疗作用.方法:利用免疫诱 导法建立了干燥综合征小鼠模型,观 察了生津口服液对干燥综合征模型小鼠颌下腺病理学,唾液分泌功能的影响;采用 ELISA法检测血清特异性抗体.结果:模型小鼠 出现明显的颌下腺病理学改变,组织学为2.83?O.98,唾液分泌量减少,血清特 异性抗体升高,生津口服液对上述指标有明显 的改善作用.结论:生津口服液对干燥综合征有治疗作用. 关键词干燥综合征;生津口服液;颌下腺 干燥综合征(Sj6gren,sSyndrome,SS)是一种侵犯外分泌腺 体尤以唾液腺和泪腺病变为主的慢性自身免疫病,其确切病因 和发病机制尚不清楚.北京中医药大学东直门医院针对干燥 综合征气阴两虚的特点,研制了以益气养阴,生津润燥为主的 生津口服液用于干燥综合征取得了一定的疗效.本文用免疫 诱导法建立ss小鼠模型,探讨了生津口服液对ss的作用. l材料与方法 1.I试验药物生津口服液:北京中医药大学东直门医院产 品,批号:010809. I.2动物Bab~c鼠.雌性,体重l8,20g.Lewis大鼠,雌性, 2月龄.购于医科院动物所. 1.3试剂EHSA试剂盒:北京现代高达公司提供.辣根酶 (HRP)标记山羊抗小鼠IgG:北京中山生物技术有限公司产品. 1.4方法小鼠随机分为4组:正常对照组;佐剂对照组(注 射CFA,0.1mL/只鼠);模型组;治疗组(生津口服液灌胃给药, 26g生药/kg).取Lewis大鼠颌下腺制成匀浆,采用差速离心法 进行抗原的纯化,取100000g×2h分离出的组分作为免疫用抗 原,免疫BMb/c小鼠0.1mL/只,首次免疫后,每间隔l5天加强 一 次,共加强3次.首次免疫第6O天处死小鼠进行药效学评 价. 1.4.1病理学观察一侧颌下腺和腮腺经10%中性福尔马林 固定,常规石蜡包埋,切片,HE染色,光镜下观察.参照Cut. 1er?的方法进行评价:0分,偶见淋巴细胞浸润;1分,少量散在 淋巴细胞浸润;2分,淋巴细胞中度浸润(未成灶),伴有轻度实 质损伤;3分,偶见0,1个淋巴细胞浸润灶/5个低倍视野,伴有 中度实质损伤;4分,易见2,3个淋巴细胞浸润灶/5个低倍视 野,伴有重度实质损伤.2分以上为发病. 1.4.2血清特异性抗体的检测分别于首次免疫后第2O,40, 6O天眼眶取血,分离血清备用.ELISA法测定血清特异性抗 体,用差速离心分离得到的抗原包被酶标板,包被后每孔加1: 100稀释的待测血清,于37?孵育60min,PBST洗涤5次,加入 HRP标记羊抗小鼠IgG(1:10000),于37?孵育60min,PBST 洗涤5次后,加入底物TMB,37oc反应30min后加2mo~L HSO终止反应,酶标仪上450nm测定OD值. 1.4.3唾液腺分泌功能的测定分别于给药后第0天,第lO 天,第3O天,第6O天测定小鼠唾液分泌量.将无菌的脱脂棉制 成干重为5mg的棉球,放入小鼠口腔后颊部,3mln后取出,分 +圆家中医药管理局中医药科学技术研究基金资助项目(蝙号2000JP13)一通讯作 者