广西地方标准《剑叶龙血树组培种苗规范化生产技术规程》(征求意见稿)

广西地方《剑叶龙血树组培种苗化生产技术规程》(征求意见稿) ICS 65.020.20 B 38 DB45 广西壮族自治区地方标准 DB45/T XXXXX—2014 剑叶龙血树组培种苗规范化生产技术规程 (征求意见稿) (本稿完成日期:2014-9-29) 2014 - XX - XX发布 2014 - XX - XX实施 发布广西壮族自治区质量技术监督局 DB45/T XXXXX—2014 目 次 前言 ................................................................................ II 1 范围 .............................................................................. 1 2 规范性引用文件 .................................................................... 1 3 术语和定义 ........................................................................ 1 培育技术 .......................................................................... 2 4 5 病虫害防治 ........................................................................ 4 6 包装 .............................................................................. 4 7 运输 .............................................................................. 4 8 生产档案 .......................................................................... 4 附录A ............................................................................. 5 I DB45/T XXXXX—2014 前 言 本标准按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草。 本标准由广西壮族自治区卫生和生育委员会提出。 本标准由广西中药材标准化技术委员会归口。 本标准起草单位:广西壮族自治区药用植物园。 本标准主要起草人:韦莹、韦坤华、李林轩、李翠、黄宝优、缪剑华、王一诺、农东新。 II DB45/T XXXXX—2014 剑叶龙血树组培种苗规范化生产技术规程 1 范围 本标准规定了剑叶龙血树(Dracaena cochinchinensis)组培苗的术语和定义、组培快繁技术、包装、运输和生产档案。本标准适用于广西境内剑叶龙血树通过组织培养技术规范化生产种苗。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB 3095 环境空气质量标准 GB 4285 农药安全使用标准 GB 5084 农田灌溉水质标准 GB/T 6001 育苗技术规程 GB 15569 农业植物调运检疫规程 LY/T 1000-1991 容器育苗技术 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 外植体 用于组织培养的植物的组织或器官。 3.2 组培苗 通过组织培养获得的完整小植株。 3.3 丛生芽 继代增殖培养获得的具有3个芽以上的无菌芽丛。 3.4 生根苗 1 DB45/T XXXXX—2014 将生长粗壮的芽苗接种到生根培养基上，在适宜的光温条件下，经过一段时间的培养，株高30mm 以上，长有2条以上不定根，具2片以上真叶的完整小植株。 3.5 出圃苗 将组培生根苗移栽到炼苗大棚苗床上，经过培育可供大田定植的株高70mm以上，具有4片以上真叶的完整小植株。 4 培育技术 4.1 组培苗培育技术 4.1.1 外植体取材 4.1.1.1 取材选择 选择健壮、无病虫危害的植株，选取籽粒圆润的成熟果实。 4.1.1.2 取材时间 晴天上午9点,10点采集。 4.1.1.3 记录 每份外植体材料按株系记录品种名称、种植地点、取材时间、取材人等，建立信息档案。 4.1.2 外植体灭菌 4.1.2.1 预处理 用2%洗洁精水溶液浸泡5min、用纱布擦洗种子面污垢，线状自来水冲洗15min,30min，置于超净台上。 4.1.2.2 灭菌 用添加了2滴,3滴吐温-20的0.1%100ml升汞浸泡8min,10min、无菌水冲洗3次,5次，最后用消毒滤纸除去表面水分。 4.1.3 外植体接种 在超净台上将种子斜插入瓶中的诱导培养基(参见附录A的A.1)中，每瓶接种3个,5个，拧紧瓶盖。 4.1.4 诱导培养 接种好的组培材料，培养期间温度白天保持在23?,25?，夜间保持在20?,24?,光照强度为 10h/d,12h/d. 4.1.5 继代培养 2 DB45/T XXXXX—2014 将长势良好的无菌苗剪切成1cm,1.5cm长的带芽块茎接入继代培养基(见附录A的A.2)中培养，刺激腋芽萌发增殖。继代代数<30代。 4.1.6 壮苗培养 将继代培养的丛生芽切成带有2个,4个芽的芽丛，接入壮苗培养基(见附录A的A.3)中培养。 4.1.7 生根培养 将继代培养后叶片展开、生长健壮、高3cm,5cm的无根苗剪切成带叶片的单芽，接入生根培养基 中(见附录A的A.4)，直至叶绿茎粗苗壮生根。当苗高?5cm时，移至大棚炼苗。 4.1.8 培养条件 光照强度为1 500Lx左右。培养温度为23?,27?。光照10h/d,12h/d，基本培养基为MS，蔗糖 为30g/L，琼脂为3.4g/L，PH为5.8。 4.2 组培种苗生产技术 4.2.1 苗床选址 选择背风向阳，排灌良好的地方搭建育苗大棚，配备70,,80,遮阳网和防虫网。 4.2.2 苗床的构建及灭菌 苗床宽1.2m, 长10m,15m。可用腐殖土、泥炭土、河沙各1份混合作基质，按照GB-4285 的规定， 对基质淋施杀菌剂，15d,20d后可以移栽。 4.2.3 移栽炼苗前处理 获得带根的完整植株后，选择生长良好、整齐、健壮的瓶苗，在室温为25?的室内打开瓶盖，在 瓶中加入少量自来水，炼苗2d,4d，表面角质形成后将苗取出，洗净根部培养基，移栽到沙床中，在沙床中生长一个月后移栽大田。 4.2.4 移栽炼苗 取出试管苗，洗净培养基后移栽到基质中，淋透定根水。 4.2.5 田间管理 4.2.5.1 温度控制 18?,30?。 4.2.5.2 湿度控制 60%,80%。 4.2.5.3 光照控制 在遮光率为70%,80%的条件下栽培。 3 DB45/T XXXXX—2014 4.2.5.4 施肥 生长季节每月施复合肥1次,2次，保持土壤湿润，夏季应多喷叶面，提高空气湿度。 病虫害防治 5 植株叶片的背面易生长红蜘蛛等螨类害虫，按GB-4285的规定，防治可选用20%的三氯螨醇乳剂，加 入800倍,1000倍的水，制成溶液喷洒，还可用50%的敌敌畏乳剂加入1000倍,1500倍水，制成溶液喷洒。 6 包装 选取植株健壮、叶色浓绿、具3张以上完全叶并已洗掉培养基的无菌苗，按苗高整齐分装入规格统 一、高出苗顶面5cm 以上的竹筐或塑料筐内，并及时浇透水，在装载物外表面标上标注有品种名称、质量指标、生产日期、种苗经营许可证编号、检疫证明编号、生产单位名称及地址的种苗标签。 7 运输 运输前做好植物检疫，向外调运应附有病虫害检疫合格证，手续随车同行;苗有序叠放，不能过度挤压、随意堆叠;长途运输应有防风、防晒、防雨措施，避免高温烧苗。 8 生产档案 对生产技术、病虫害防治等各环节所采取的措施进行详细记录，建立生产档案。 4 DB45/T XXXXX—2014 附 录 A (资料性附录) 培养基配方 A.1 诱导培养基配方 MS，6-BA 1.0 mg/L，IAA 0.2 mg/L，白糖 3,，琼脂 3.4 g/L，pH 5.8。 A.2 继代培养基配方 MS，6-BA 1.0,5.0 mg/L，IAA 0.1,0.5 mg/L，白糖 3,，琼脂 3.4 g/L，pH 5.8。 A.3 壮苗培养基配方 MS，6-BA 1.0,3.0 mg/L，IAA 0.5,1.5 mg/L，白糖 3,，琼脂 3.4 g/L，pH 5.8。 A.4 生根培养基 MS，ABT 0.1,0.5 mg/L，IAA 0.1,1.0 mg/L，白糖 3,，琼脂 3.4 g/L，pH 5.8。 5