血小板输注无效患者血小板抗体的检测

血小板输注无效患者血小板抗体的检测 血小板输注无效患者血小板抗体的检测 何吉,金蕾,洪小珍,傅启华,严力行 (浙江省血箍中心,浙江杭州310020) 长期依靠血小板支持治疗的患者,常发生血小板 输注无效(PlateletTransfusionRefractories,PTR).其 免疫性因素主要为HLA抗体,HPA抗体等一.Doughty 等坝道,44%的恶性血液病患者血小板输注无效,其中 88%是与非免疫性原因有关,单独非免疫性原因占 67%,另21%与免疫性原因共同存在.血小板抗体存在 于25%的PTR患者中.国内对PTR患者血小板抗体的 仍缺乏足够的研究.笔者采用美国GTI- 筛选和鉴定, MACE1试剂盒,通过ELISA方法对PTR患者血清中的 血小板抗体进行鉴别,现报道如下 l材料与方法 1.1器材血小板抗体检测试剂盒(美国GTI公司), 离心机(德国HERMLE),洗板机(IMMUCOR公司). 1.2检测对象100例,年龄9~72岁,其中男47例,女 53例.皆为多次输血或(和)输注血小板并发生血小板 输注无效者. 1.3方法 3ml富血小板血浆5000~ll~00rpm离心,弃去血 浆,用血小板保养液洗两遍,取100l,5000--ll~00rpm 离心5min,沥千,加1001.tl患者血清混匀,37?孵育 30rain取出,洗两遍,沥千,加1201.tl细胞离子缓冲液, 混匀以备用. 从4?冰箱中取出试剂盒,平衡至室温.取对应的 两排反应条,上端分别用蓝色和红色标明含单克隆 HLAI类抗体和GPIIb/ma抗体,分别加50l上述 致敏的血小板于对应的孔中,37孵育30min.取出,洗 涤,加50l抗人IgG,37%孵育30rain.洗涤,显色,室温 避光孵育30min终止反应后测405nmOD值.OD值等 于或大于2倍阴性对照OD值的结果即为阳性. 2结果 见表1 袅1瑚倒FrR患者血小扳抗体检测结果 3讨论 随着联合化疗等的广泛应用,血小板制品的用量已 一 39一 逐年上升,由于临床上绝大多数忠者的输血仅考虑红 细胞系统血型相合,而不做血小板系统和HLA抗原的 因而不少多次输血或(和)输注血小板的患者在输 检测, 注血小板后血小板计数的增加值低于预期的回升值, 即发生血小板输注无效.国外资料报道免疫性因素引 起的PTR主要是HLA抗体,其次是血小板特异性抗体. 本文结果表明,PTR患者血小板抗体阳性率仅为16%,说 明PTR大多由非免疫性原因所致:在引起PTR的血小板 抗体中,又以HLA抗体为主(93_75%),HPA抗体仅占 6.25%,说明免疫性原因所致的PTR主要为HLA抗体,这 一 结果与文献报道基本一致. 目前用于筛选血小板抗体的方法主要有ELISA, 固相红细胞粘附试验,单克隆抗体特异性血小板抗原 免疫捕获试验(MAIPA)等,其中只有MAIPA可以鉴 别HLA抗体和HPA抗体,我们所采用GTI—MACE1试 剂盒,其原理类同于MAIPA,1次实验便能鉴定出HLA 抗体或HPA抗体,具有方法简便,快速,特异等优点. 通过本法可对血小板输注无效患者进行血小板抗体筛 选和分类,为含有HPA抗体和HLA抗体的患者有针对 性地选择合适的血小板供者,进而对含有血小板抗体 的患者进行"适合性血小板输注",以提高血小板输注 疗效,避免宝贵血源的浪费. 参考文麓: [1】phIi0nD儿FarrellDH.Donaldsonc,da1.Developmenlofly一 皿pl-nand#~ehtJB8cljveantibodies:pr~peetivestudyin Davdthacuteleukemla[J].VoxSzng.1989.57:177? 圆GodeauBtFromontP.SerarT.eta1.Plateletalloimmunizafion出口 multipletrar-~usioas:AprospectiveB【udy0f50P蚰en埘J】-BrJH em~tol1992.81',395 [31Kekomakis,YdiaLKoi~tinenP.etSueeessfidteatmerttofpl— tttelettranffwfionrefractoriness:theuofplatdettransfusionmatched forbothhtmaaaleaeyteantigenP.tm.A)andhumanplateletall~ntigens Cm'-qi1Ialloimmunlzedpafienswilhleakaemi~EJHaemamL1998, 60:.112. DglI耳rlA,MurphyMF.Mete.a.1feP'eta1.RelativeimPonence0f imm衄eandnon-immunecmlseafIllatle]etzeftactorin~V艘Sang 1994,65:.2.00 【5]ElleaTgAnneCatrmeSimon~n,EHjeImetplate.1eta11- oimmuni~alonaf~extIanjo?U】VoxSang,1997,72:238 (收稿日:200—09)