猪细小病毒的诊断与防治

猪细小病毒的诊断与防治 编号 云南农业职业技术学院 #毕业# 论文目 猪细小病毒病诊断与防治 学 生 汤中洁 系 部 畜牧兽医系 系部名称 畜牧兽医系 专业年级 2010级 指导教师 朱兴贵 职 称 副教授 专 业 兽医医药 2012 年 10 月 8日 摘要:猪细小病毒是由猪细小病毒引起的繁殖障碍性疾病,特别是以出产母猪产出死胎、畸形胎、木乃伊胎、弱仔,而母猪无明显病状为特征。母猪早期怀孕感染时,其胚胎、胎猪死亡率可高达80%~100% 。随着对猪细小病毒研究的不断深入,目前已经在猪细小病毒病原学、诊断与防制以及分子生物学等方面取得了进展。 关键词:猪细小病毒 诊断 防治 前言 据调查，猪细小病毒病发病率有升高趋势，可能与未经免疫或免疫程序不科学，引种不慎有关。为此要加强该病的引种检疫及免疫工作，实施科学的免疫程序。 猪细小病毒病免疫一定要谨慎，免疫时，最好使用灭活苗。严格消毒和人员进入管理，做好平时消毒工作，防止闲杂人员进入养殖场，管理不当可人为传入病情。该病毒对理化因素有很强的抵抗力，广泛分布于世界各地并在大多数猪场呈地方性流行，严重地影响着养猪业的发展，该病的严重危害受到了国内外许多学者的关注，对PPV诊断及免疫防制的研究成为了热点之一。 1. 猪细小流行特点及病理变化 1.1流行特点 本病见于出产母猪。一般呈地方流行或散发。多发生在每年4~10月份或母猪产仔和交配的一段时间。本病发生后可持续多年。本病具有易感性，猪是唯一的已知宿主，不同年龄的猪及野猪都可感染，有的动物血清中也可存在本病病原的特异性抗体。感染的公猪和母猪是主要传染源。交配、胎盘感染、感染母猪所产死胎、弱胎、活胎、仔猪及子宫内分泌物等均含有高滴度的病毒，可造成传染。垂直感染的仔猪至少可带毒9周以上，病毒传染过的猪舍空舍四个半月以后仍可感染。本病可经胎盘垂直传染和水平传染。消化道、呼吸道、交配均可感染，出生前后的猪最常见的感染途径是胎盘和口鼻。污染物及鼠亦是重要媒介。 1.2病理变化 一般情况下，感染本病的母猪死亡率不高，主要影响下一代。如果对个别患病严重的死亡母猪进行剖检，病理变化主要变现为子宫内膜有轻度的炎症反应，胎盘部分钙化，胎儿在子宫内有被溶解吸收的现象。胎儿在没有免疫力之前感染PPV，可出现不同程度的营养不良，淤血、水肿和出血，胎儿死亡后颜色变黑，并有脱水和木乃伊变化。镜检病变主要是多数组织和血管广泛的细胞坏死、炎症和核内包涵体等。胎儿对PPV具有免疫反应能力后再受到感染时，不产生明显变化，镜检观察，可出现内皮细胞肥大和单核细胞浸润等病变。受感染的细胞在大脑灰质、白质和脑脊膜上可见到脑膜炎的病变，以外膜细胞、组织细胞和少量浆细胞增生形成血管套为特征的变化，是其最主要的病理变化。 2. 临床症状 本病主要表现为妊娠猪特别是出产母猪的繁殖失能或称繁殖紊乱，即妊娠母猪受到感染后，会引起流产、产死胎、胚胎坏死、木乃伊化胎儿和弱仔及母猪发情不正常、久配不孕等临床症状;也有妊娠母猪和幼仔感染初期出现体温升高和白细胞减少的情况。 2.1繁殖母猪感染后的临床症状 2.1.1 胚胎死亡、母猪返情 妊娠母猪在怀孕30~36d之前受到感染时会发生胚胎死亡，死亡的胚胎在下一个发情期临近时完全被母体吸收，母猪可能重新发情。 2.1.2 木乃伊胎 胎儿在50d后感染死亡时，由于胚胎骨骼钙化，死胎不能被完全吸收，导致胎儿干尸化:50~65d死亡者会严重干尸化;65~100d死亡的则部分干尸化。 2.1.3 流产 当有严重的胎盘炎或全部胎儿死亡时，则发生流产，但此内现象比较少见。 2.1.4 死产 母猪在妊娠55~65d被感染时，胎儿已逐渐发生免疫应答，可以产生抗体，多能正常生产，但母猪内膜有轻度炎症，胎盘有部分钙化。感染的胎儿表现不同程度的发育障碍和生长不良，可见胎儿充血、出血、水肿、体腔积液及坏死等畸变。受感染胎猪存活但太衰弱，不能耐受分娩时的逆境因素，多在分娩时或临近分娩时不能呼吸而死亡。 2.2 公猪感染 公猪被感染，对性欲和受精率无明显影响，但精液可长期排毒。 3. 诊断 猪细小病毒感染可依据临床症状和流行病学作出初步诊断，一般认为，如果仅妊娠猪发生流产、死胎、木乃伊胎、胎儿发育异常，同时有证据表明是传染性疾病时，则应考虑到PPV感染的可能，但进一步确诊必须进行实验室诊断。自1967年， Cartwright等首次报道PPV病以来，有关该病诊断方法的较多，从最初的病毒分离鉴定，到血凝及血凝抑制试验、酶联免疫吸附试验等免疫学方法，直到核酸探针、聚合酶链式反应等分子生物学技术应用到PPV病的诊断中。 3.1临床诊断 根据猪病的临床症状，即母猪发生流产、死胎、木乃伊胎、胎儿发育异常等情况，母猪本身没有明显的症状等，结合流行情况和病理剖检变化，即可做出初步诊断。若要确诊还须进一步做实验室检查。 3(2实验室诊断 有关该病诊断的方法的研究报告较多，从最初的病毒分离鉴定，到血凝及血凝抑制试验，梅联免疫吸附试验等免疫学方法，直到核酸探针、聚合酶链式反应等分子生物学技术应用到PPV病的诊断中。 3.2.1血凝和血凝抑制试验 (1)血凝试验(HA) 此试验操作简便易行，且能进行快速、大量的诊断，但是其灵敏度低、特异性不强，只能作为辅助诊断方法。 (2)血凝抑制试验(HI) 此试验一般采用试管法和微量法，是检测PPV抗体最常用的经典方法。利用HI试验检测人工感染PPV的猪，发现感染后5d即可检测到相应抗体，12,14d抗体滴度高达1024,4096，并能持续多年检出抗体。待检血清进行HI试验时需要首先进行热灭活处理，然后再用红细胞吸附，以除去血清中的非特异性血凝素，进一步用高岭土吸附以除去或减少血清中非特异性抑制因子。目前，该方法在国内外已得到广泛应用。 3.2.2血清中和试验 原理是利用被检血清的抗体中和PPV，然后根据培养细胞的病变情况来计算血清抗体的滴度。SN的特异性比HI高，但是SN的操作较为复杂，首先要进行病毒感染力的测定，而 PPV在低剂量时并不引起细胞病变，从而限制了该方法的使用。 3.2.3琼脂扩散试验 此法是一种操作简便，特异性较强的血清学诊断方法。刘诤(1996年)用此法取妊娠期延长，产后死胎，木乃伊胎的初产母猪血清与 PPA抗原作常规琼扩试睑。结果均出现明显沉淀线。 3.2.4免疫荧光抗体技术 结合血清学特异性，敏感性与显微术的精确性的一种技术，具有独特的优点。 Rivera等(1986)利用固相免疫荧光技术(IBA)检测 PPV的抗原和抗体获得成功，其具有特异、敏感、快速、检出率高的特点，是实验室进行病毒分离鉴定常用的方法。1996年，黄骏明等用此法对疑为猪伪狂犬病和猪细小病毒病混合感染的初产母猪流产胎儿的肝，肺，肾冰冻切片进行检查，结果为阳性，且与猪瘟病毒。猪伪狂犬病毒无交叉反应。目前更主要的是研究其非特异性染色的问题。 4(防治措施 猪细小病毒感染，目前无特效药进行治疗。为避免该病的发生，只能采取预防措施，主要是加强饲养管理、环境消毒和疫苗免疫。疫苗目前主要分灭活苗和弱毒疫苗。 4.1引种 健康猪场应防止PPV从外界传入，坚持自繁自养。引进种猪时，必须从未发生过本病的猪场引进，引进种猪后隔离饲养半个月，经过2次血清学检查，效价在1:256以下或为阴性时，再合群饲养。 4.2消毒 坚持经常性消毒，用0.5%漂白粉或1%烧碱可杀灭病原体，减少猪与病毒的接触。 种群管理，加强检疫工作，引进种猪，要隔离观察并检疫，从未发生过猪细小病毒病的猪场和地区，应该杜绝引进病猪和带毒猪，发病猪场应特别防止小母猪在第1胎受孕时被感染，或把其配种期拖延到9月龄，此时母源抗体己消失，自动免疫力已经产生，经免疫后方可正常饲养。 4.3免疫接种 疫苗免疫，目前对易感猪进行疫苗免疫是最有效的。现主要使用灭活苗。灭活苗分为组织灭活苗和细胞培养灭活苗，以油佐剂细胞灭活苗最为常用。 免疫程序，实行程序化免疫，健康猪、假定健康猪在配种前1个月接种灭活疫苗。新生仔猪细小病毒疫苗的免疫接种可以选择在20周龄左右进行，后备种猪要在配种前20天以前接种，经产母猪应在产后15天进行，每年接种2次，连续3年即可;种公猪每年春秋两季分别进行;对于曾发生过细小病毒病的猪，大多数猪感染后获得免疫力，体内已产生抗体，可以获得良好的保护，这些猪不需再接种。 致谢, 之所以能完成本论文,首先我要感谢我的导师朱新贵副教授,他严谨细致、一丝不苟的作风一直是我工作、学习中的榜样;他循循善诱的教导和不拘一格的思路给予我无尽的启迪。毕竟“经师易得,人师难求”我希望借此机会向朱新贵老师表示最衷心的感谢。此外,我还要感谢我的室友,我们从各地相聚到一起实属不易,这三年大家对我如同自己的亲姐妹,我们相处的很融洽,无论时间过的有多久,我都不会忘记这份情谊,希望大家以后有个美好的将来,最后我要感谢我的父母,没有他们就没有今天的我,父母把所有的爱给了我,让我在成长的路上不曾受过任何伤害,今后我只有更加努力的学习和工作,不辜负父母对我的期望,我一定会做一个孝顺的女儿。 参考文献 【1】 曹伟，李敏.猪细小病的防治与诊断.猪传染病策略防控大讲堂.中国农业出版社， —2008,175~181 2005 【2】 姜平，郭爱镇..兽医全攻略猪病.中国农业出版社.2009,84~88 【3】 张宏伟，董永森.猪细小病毒感染.动物疫病.中国农业出版社(第二版)，2009,63~64 【4】 张朝 阳，猪病毒细小病毒感染及防治.中国畜牧兽医.2006,86-89 【5】 李昌文，仇华吉，董光志.猪细小病毒研究进展.动物医学进展.2004,36~38 【6】 丁永龙，猪细小病毒感染.新编猪病诊疗手册.科学技术文献出版社(第一版)， 2006,76~79 【7】 丁壮，猪细小病毒及其防治.蓄禽流行病防治丛书.金盾出版社(第一版)，2008 【8】 伊安成，和平.浅谈猪细小病毒的诊断与防治.中国畜牧种业.2012