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【doc】HPLC法测定克霉唑栓的含量

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【doc】HPLC法测定克霉唑栓的含量【doc】HPLC法测定克霉唑栓的含量 HPLC法测定克霉唑栓的含量 ? 1486?实验诊断 迅速取出并放入增菌培养基中增菌,同时用尿沉渣培养 法实验作为对照组.对检出的病原菌(包括L型菌),鉴 定其菌种,用于两组间结果的对比. 2结果 2.1普通细菌增菌实验结果:在用过抗生素的215例 拟诊为泌尿系感染的标本中,实验组检出72例占 33.4%,对照组检出46例占21.4%,两组相比差异显 着(P<0.05).对照组中有41例与实验组检出菌种完全 相同,符合率为89.13%.实验组中检出3例污染菌. 2.2L...
【doc】HPLC法测定克霉唑栓的含量
【doc】HPLC法测定克霉唑栓的含量 HPLC法测定克霉唑栓的含量 ? 1486?实验诊断 迅速取出并放入增菌培养基中增菌,同时用尿沉渣培养 法实验作为对照组.对检出的病原菌(包括L型菌),鉴 定其菌种,用于两组间结果的对比. 2结果 2.1普通细菌增菌实验结果:在用过抗生素的215例 拟诊为泌尿系感染的标本中,实验组检出72例占 33.4%,对照组检出46例占21.4%,两组相比差异显 着(P<0.05).对照组中有41例与实验组检出菌种完全 相同,符合率为89.13%.实验组中检出3例污染菌. 2.2L细菌增菌实验结果:在本次实验中,实验组共检 出L型菌13例占6.04%;对照组检出9例占4.18%, 其中7例与实验组相同,符合率为77.8%,另外2株变 形杆菌的L型菌在实验组中漏检. 3讨论 来我院就诊的怀疑泌尿系感染的患者中,绝大部分 已经使用过抗生素治疗未愈.在这种情况下,患者体内 的抗生素经肾脏滤过并随尿液排出,即使浓度较低,也 能抑制细菌的繁殖,致使尿中只有少量的细菌存活.这 样的尿标本增菌实验往往是阴性.本次实验对照组检出 率只有21.4%,而且只检出了9例L型细菌,说明普通 现代中西医结合杂志2002年第11卷第15期8月号 的增菌培养法不适用于用药后的尿细菌培养.因此我科 针对普通增菌法尿标本用量少,抗生素浓度高时,细菌 数量少并受抑制的特点,采用0.5m滤菌膜过滤中段 尿来增加菌株数量,除去尿中抗生素,使大量的菌株可 以在增菌培养基中正常生长繁殖,因此实验组细菌检出 率高达33.4%,与对照组相比差异具有显着性. 由于肾髓质与尿液中有大量的尿素,抗生素和钠 盐,造成高渗环境,且高浓度尿素有破坏细胞壁的作 用,有利于L型菌的产生和存活,尤其是尿路感染的复 发,L型菌起一定的作用….本次实验组L型菌检出率 为6.04%,高于对照组的4.18%.由于L型菌无细胞 壁,菌体柔软有可塑性,各种细菌的L型相差很大,因 而有些细菌的L型可以改变形态通过0.5m孔径滤菌 膜.本次实验组漏诊的2株变形杆菌的L型,其直径仅 有0.1,0.2m.同时由于实验组操作较复杂,耗时长, 因而在操作过程中稍有不慎,即会出现污染,实验组出 现的3例污染菌就说明了这一点.因此,采用中段尿滤 过膜培养法时,必须严格无菌操作,避免污染. 参考文献 l余贺.医学微生物fM1.北京:人民E,阜出版社,I983:33—35 HPLC法测定克霉唑栓的含量 浙江省绍兴市人民医院药剂科(312000)丁洁卫 克霉唑(Clotrimazole)为咪唑类抗真菌药,用于深部 及全身霉菌感染,其栓剂在临床上主要用于真菌性阴道 炎.克霉唑栓的含量测定《中国药典)2000年版采用双 相溶液阴离子面活性剂滴定法,但在滴定时,若振摇 不够充分,会使终点不易判断.有报道用HPLC法测定 复方制剂中克霉唑的含量?J.该法操作简便,省力,灵 敏度高,专属性强,结果满意,现报道如下. 1与方法 1.1仪器与药品:Agilentl100高效液相色谱仪系列. 克霉唑对照品(中国药品生物制品检定所标定).克霉唑 栓3批(批号:O0l121,010614,010727).甲醇为色谱 纯,水为重蒸水. 1.2色谱条件.色谱柱:Nova—PakC】8(200inin× 4.6ram,4m);流动相:磷酸二氢钾溶液(取磷酸二氢 钾4.40g,加水溶解并稀释成1000mL),甲醇(30:70), 流速为1.OmL/min;检测波长220nm,进样量lOp.L. 1.3线性关系:精密称取克霉唑对照品25rag,置于 25mL量瓶中,加甲醇使其溶解并稀释至刻度,摇匀.分 别取1.0,2.0,2.5,3.0,4.0,5.0mL置于25mL量瓶中, 加流动相至刻度,摇匀,进样,记录色谱图.以峰面积A 对浓度C回归,回归方程为:A=246179.3+458551.7C, r=0.9999,说明浓度在40,200mg/L范围内呈良好的 线性关系. 1.4精密试验:取100mg/L克霉唑对照品溶液,重复 进样5次,记录峰面积,结果RSD=03%. 1.5样品测定:取克霉唑栓10粒,精密称定,置烧杯 中于温水浴融化,搅拌均匀,放冷至室温.精密称取适 量(约相当于克霉唑50mg)置50mL量瓶中,加甲醇适 量,置温水中使其溶解,放冷至室温,加甲醇稀释至刻 度,摇匀.精密量取5mL,置50mL量瓶中,加流动相 稀释至刻度,摇匀.经0.45m微孔滤膜滤过,取续滤 液及对照品溶液(100mg/L)各10L进样,记录色谱图, 按外标法计算样品含量.结果3批样品含量分别为 97.7%,99.5%,98.7%(:3). 1.6重复性试验:取批号为010614样品5份,按样品 测定方法测定,并计算含量,得平均含量为100.1%, 现代中西医结合杂志2002年第11卷第15期8月号 RSI)=0.4%. 010..010 AB 图1克霉唑对照品(A)与样品(B)色谱图 1.7稳定性试验:取批号为010727样品1份,按样品 测定项下方法,将样品溶液分别在放置0.5,1,2,3, 5,8,12,24h进样测定,记录峰面积并计算含量,得平 实验诊断?1487? 均含量为98.2%,RSI)=0.7%.样品溶液在24h内含 量基本不变. 1.8回收率试验:取批号为010614样品5份,各约0.5g, 精密称定.分别加入克霉唑对照品约25rag,精密称定, 按样品测定项下方法测定,结果平均回收率为100.2%, RSD=0.7%(,2=5). 2讨论 用本法测定克霉唑栓的含量,样品处理简便,操作 省力,结果准确.色谱图主峰峰形较好,基质不影响含 量测定,理论板数达5000以上. 参考文献 1王桂芳,沈霞,张守尧,等.高效液相色谱法测定复方克霉唑霜中克霉 哗和盐酸达克罗宁含量.中国医院药学杂志.1996.16(2):66 前列腺炎患者前列腺液检测分析 江苏省南京市中医院检验科(210001)陈雪辉张晓玲吴雪芸 前列腺炎是中青年多发病,笔者对我院泌尿外科 1998年10月一1999年11月收治的184例前列腺炎患 者的EPS(前列腺液)进行细胞分类及细菌培养,现将结 果报道如下. 1临床资料 1.1一般资料:本组患者年龄18,52岁,其中18,20 岁18例,2】,35岁105例,36,52岁61例.均做过淋 球菌,衣原体,支原体培养,结果为阴性.对镜检白细 胞(+),(卅)的EPS进行白细胞分类,并做细菌培养. 1.2实验材料:各种培养基,微量生化管购于浙江省 军区后勤部卫生检疫所,经标准菌株鉴定合格.瑞姬染 料由本科自配. 1.3检测方法:无菌操作,第1滴前列腺液做常规检 查,高倍报告.卵磷酯小体以?25%,50%,?75%报 告,白细胞以(+),(卅)报告J.将镜检后的前列腺液 推出薄片,自然干燥,瑞姬染色,油镜作细胞分类.第2 滴做淋球菌和普通细菌培养,然后用尿道拭子插入尿道 3,4cm深处,分别取材做衣原体和支原体培养. 2结果 184例前列腺液中,镜检白细胞(+)有27例,占 14.67%;(++)有75例,占40.76%;(卅)有70例,占 38.04%;(H{{)有12例,占6.53%.分类平均数:淋巴 细胞占5.02%,前列腺上皮细胞占4.78%,嗜中性分叶 核占90.2%. 184例前列腺液中共分离出病原菌128株,分离阳 性率为69.56%.病原菌共有15种,其中球菌类100 株,杆菌类28株.128株细菌中表皮葡萄菌40株,金黄 色葡萄菌39株,大肠杆菌16株,粪肠球菌6株,其它 27株(包括B族链球菌5株,奇异变形杆菌4株,A族 链球菌,模仿葡萄球菌,腐生葡萄球菌,微球菌属,肺 炎克雷伯菌,摩根菌,阴沟肠杆菌,四联球菌,黏液沙 雷氏菌各2株). 3讨论 184例EPS常规检查中自细胞(+),(H{{),其分类 以嗜中性分叶核为主,中性占71%,98%,平均 88.76%;淋巴细胞均低,占1%,17%,平均5.56%. 前列腺上皮细胞占1%,19%,平均占4.02%.菌群分 布球菌占78.13%,杆菌占21.87%,病原菌以表皮葡萄 球和金黄色葡萄球菌多见.彭少华等2J报道泌尿外科和 生育门诊的慢性前列腺炎细菌分离阳性率为71.0%,细 菌种类以金黄色葡萄球菌(44.9%),大肠杆菌(11.2%) 占多数.本组前列腺液细菌分离结果与上述结果相似. 本文结果提示:前列腺炎时,EPS中自细胞均以嗜中性 分叶核为主,不同细菌引起的前列腺炎,EPS细胞分类 均以嗜中性分叶核为主,且前列腺上皮细胞有随炎症的 加重而增加的趋势. 参考文献 1黄宇烽,朱忠勇实用医学检验学.北京:人民军医出版社,1992: lOO1一lOO2 2彭少华,余建华,施雪梅,等慢性细菌性前列腺炎病原学调查及药敏 分析.湖北医科大学.1996,17(4):388—398
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