010转铁蛋白测定

010转铁蛋白测定 标题:转铁蛋白测定 版本号:A 文件编号:PLA301-LJK-ZY-MY-10 发布日期:2003年3月1日 生效日期:2003年3月15日 发布部门:临检科质量管理小组 编制人:马骏龙、白洁、杨丽 审核人:马骏龙 批准人(签章):秦小玲 页码:第1页～共4页 转铁蛋白测定 1 检验目的 转铁蛋白(transferrin, TRF)又名铁糖蛋白或嗜铁蛋白～系血浆中β-球蛋白与铁合成1的一种复合体。主要功能是作为一种铁的传递体～从肝实质细胞和肠上皮细胞等处将铁运转给骨髓。 检验血清中转铁蛋白含量变化对机体营养失调、急性炎症、感染、贫血疾病的诊断～观察疾病的变化及治疗效果具有重要参考价值。 检验尿液中转铁蛋白含量变化可帮助监测慢性病如糖尿糖、高血压及系统性红斑狼疮等导致肾功能早期损伤的情况。 2 检测原理 用抗人转铁蛋白抗体和样品中转铁蛋白相结合～利用动力学原理观察单位时间内抗原与抗体结合的量来测定其浓度。 本免疫检验室使用Beckman公司的ARRAY 360型特种蛋白分析仪及东方珠峰公司提供的Beckman配套试剂、品等进行转铁蛋白测定。 3 标本 3.1 静脉抽取病人空腹血标本2ml～臵于含分离胶(黄色盖)或促凝剂的真空试管内。 3.2 采血后应立即送到临床检验科免疫检验室。 3.3 样品收到后立即分离血清。不能及时测定的血清应于2?，8?冰箱保存。 3.4 严重溶血或脂血的标本不能测定。 4 设备和试剂 4.1 ARRAY 360 特种蛋白免疫分析仪(主机号:10053或10909)。 4.2 转铁蛋白抗体(Beckman试剂P/N 446770),血清转铁蛋白校准品(Beckman试剂P/N 449560),尿转铁蛋白校准品(Beckman试剂P/N 441470),稀释液(Beckman试剂P/N 663630),缓冲液(Beckman试剂P/N 663600)。 4.3 转铁蛋白抗体和转铁蛋白校准品应于2?，8?冰箱保存～稀释液和缓冲液应放室温保存～防紫外线、防潮。 4.4 在上机前～须将稀释液和缓冲液来回颠倒彻底混匀。超过失效期的所有试剂不能使用。 5 校准步骤 5.1 ARRAY 360特种蛋白分析仪每14天对仪器进行一次定标。 5.2 仪器在进行定标之前必须对仪器的光路进行设定(OPTICS SET)和外光路进行 1 检查～操作过程详见ARRAY 360特种蛋白分析仪仪器登记文件。 5.3 仪器校准包括“试剂卡和校准卡的读取和仪器校准”两方面～操作步骤详见ARRAY 360特种蛋白分析仪仪器登记文件。 6 操作步骤 6.1 样本的准备:将编好号的样品离心～取血清加入编好号的样品盘的规定位臵～放在仪器相应的标本位臵。 6.2 试剂的检查:仪器开机后～检查各种试剂的位臵、体积、批号等～确认无误后方可进行测定。 6.3 操作方法:测定样本项目必须在仪器校准通过的情况下～且每天测试前对仪器的外光路进行检查通过后才能进行样品测定。其操作步骤详见ARRAY 360特种蛋白分析仪仪器登记文件。 7 质量控制 每天操作过程中应使用Beckman公司的转铁蛋白校准品至少做一次质量控制。请参见ARRAY 360特种蛋白分析仪仪器登记文件。 8 干扰因素 严重溶血或脂血的标本会影响测定～导致结果测不出来。反应液中团块、颗粒可干扰测定。 9 计算 ARRAY 360特种蛋白分析系统会自动地计算出结果。 10 生物参考值区间 本法的健康人群血清转铁蛋白参考值区间为212，360mg/dl,尿转铁蛋白为0，0.2mg/dl。 11 实验室解释 血清中转铁蛋白增高:见于各种慢性缺铁如缺铁性贫血、妊娠后期、口服避孕药妇女或雌激素注射。 血清中转铁蛋白降低:急慢性肝炎、肝硬化、肾病综合征、肾功能衰竭、蛋白质丢失性肠病、严重烧伤、恶性肿瘤、慢性病性贫血、遗传性无转铁蛋白血症。 尿转铁蛋白测定主要用于蛋白尿选择指数、选择性蛋白尿θ角～用来评价肾脏功能。尿转铁蛋白增高主要见于:肾小球肾病、局灶性肾炎、慢性肾炎、隐匿性肾炎、糖尿病性肾炎、妊高症、肾移植后排异反应。 12 异常结果处理 转铁蛋白试验结果异常需与临床诊断相符合～不符合的结果应复查。 13 时间与标本保存 13.1 转铁蛋白试验4小时出结果,病房患者的检验结果报告单在24小时内发回科室～门诊病人的检验结果报告单在收到标本的第二天下午送到化验单领取处。 2 13.2 转铁蛋白试验检查过的标本应放2?，8?冰箱保存24小时。 14 操作性能 14.1 本仪器的血清转铁蛋白原始线性为75，750mg/dl～量程为12.5，4500mg/dl。尿液转铁蛋白原始线性为0.2，4.0mg/dl～量程为0.2，864mg/dl。 14.2 本仪器的转铁蛋白试验的精密度见附表。 附表1 血清转铁蛋白试验批内精密度(n=20) 样品 低值 中值 高值 (mg/dl) 173 524 838 , SD(mg/dl) 2.68 9.49 26.4 CV(%) 1.55 1.81 3.16 附表2 血清转铁蛋白试验批间精密度(n=20) 样品 低值 中值 高值 (mg/dl) 175 281 427 , SD(mg/dl) 6.15 10.22 16.6 CV(%) 3.51 3.63 3.89 附表3 尿转铁蛋白试验批内精密度(n=20) 样品 低值 中值 高值 (mg/dl) 0.33 1.50 3.30 , SD(mg/dl) 0.01 0.01 0.12 CV(%) 3.39 0.85 3.62 附表4 尿转铁蛋白试验批间精密度(n=20) 样品 低值 中值 高值 (mg/dl) 0.33 1.50 3.30 , SD(mg/dl) 0.01 0.04 0.07 CV(%) 1.57 1.76 1.95 14.3 本仪器的血清转铁蛋白试验的准确度:与AIP法比较:n=50～Y=0.91X+20～r=0.985,与RID法比较:n=55～Y=0.912X+28～r=0.969,尿液转铁蛋白试验的准确度:与同等方法比较:n=50～Y=1.01X-0.53～r=0.99。 15 参考文献 1 Array Systems, Chemistry Information Manual. Beckman Instruction 015 249712 AB.Jar. 1996. Beckman Instruments, Inc. Brea. CA 92621-6209. USA. 2 National Committee for Clinical Laboratory Standards, How to Define, Determine and Utilize Reference Intervals in the Clinical Laboratory; Approved Guideline, NCCLS 3 publication C28-A, Villanova, PA(1994). 3 National Committee for Clinical Laboratory Standards, Method Comparison and Bias Estimation Using Patient Sample; Tentative Guideline, NCCLS publication EP29-T, Villanova, PA(1993). 4 National Committee for Clinical Laboratory Standards, Precision Performance of ndClinical chemistry Devices; Tentative Guideline, 2 Edition, NCCLS publication EP5-T2, Villanova, PA(1992). 5 叶应妩, 王毓三主编. 全国临床检验. 中华人民共和国卫生部医政司. 南京. 第二版. 1997. 6 Datti F, et al: Consensus of a group professional societies and diagnostic companies on guidelines for interim reference ranges for 14 proteins in serum based on the standardization against the IFCC/BCR/CAP reference material (CFM 470). Eur J Clin Chem Biochem. 1996; 34: 517. 4