超敏C反应蛋白和脂蛋白（a）试剂对血清铁测定的交叉污染分析

超敏C反应蛋白和脂蛋白（a）试剂对血清铁测定的交叉污染分析 超敏C反应蛋白和脂蛋白(a)试剂对血清 铁测定的交叉污染分析 2226中国误诊学杂志2007年5月第7卷第1O期ChinJMisdiagn,May2007Vol7No.10 超敏C反应蛋白和脂蛋白(a)试剂对血清铁测定的交叉污染分析 张文静,李国权 , 【主题词】C反应蛋白质;脂蛋白(A);指示剂和试剂;铁/血液;设备污染 【中图分类号】R446.112.1【文献标识码】A 近来,我们发现了在测定血脂项目后血清铁(Fe)的测定值 很低而单独测定时结果却正常的现象,为此我们对超敏c反应 蛋白(US—CRP)和脂蛋白(a)[Lp(a)]试剂对铁测定的交叉污染 进行了观察,如下. 1材料和 1.1材料选取我院门诊及住院患者无黄疸,无脂血,无溶血 的血清,考虑到高,中,低值血清受到的影响可能会不同,因此 以我院血清铁的参考值13,32~mol/L为分界,分别挑选测定 值%13~mol/L的血清,13,32~mol/L的血清和>32~mol/L 的血清各2O份. 1.2方法仪器选用日本日立7170A型全自动生化分析仪. Fe,Lp(d)试剂均由日本第一化学株式会社提供,US—CRP试剂 公司提供.Fe测定采用Ferrozine终点法. 由英国IRAND0x US-CRP,Lp(a)测定均采用免疫比浊法.先将仪器进行系统维 护,清洗比色杯,样本针,试剂针和搅拌棒,以排除仪器本身造 成的影响.将高,中,低值血清均按以下方式依次测定:方式A: 单独测定血清Fe.方式B:按照US—CRP,Fe的顺序测定.方式 C:按照Lp(a),Fe的顺序测定. 1.3统计学处理所测得数据利用SPSS10.0软件包进行处 理,采用配对t检验进行比较.所有数据均以?示,P< 0.05为差异有显着性. 2结果 高,中,低值血清分别按照方式A,方式B和方式c测定的 结果:无论是高,中,低值血清,采用方式B和方式c的方法测 定的血清铁结果均明显低于方式A的测定结果,其差异具有显 着性(P<O.01).测定结果见表1. 表1Fe的测定结果(士S,gmol/L) 注:方式B和方式C分别与方式A相比,P<0.01. 3讨论 自动生化分析仪中交叉污染的种类很多,主要包括样品探 针携带污染,试剂探针及搅拌棒交叉污染,样品杯交叉污染等. 本次实验我们主要探讨试剂探针的交叉污染,它的产生主要是 作者单位:北京大学第三医院检验科,北京100083 【文章编号】1009-6647(2007)10—2226—01 由于很多生化分析仪仅具有一根试剂探针,而仪器设定的清洗 程序往往难以将试剂探针上携带的残余试剂完全清洗干净,从 而使一个项目对随后的一个或几个项目造成试剂污染.除了前 面试剂中含有下一项目所要测定的物质外,造成试剂交叉污染 的原因还有两种可能,一是试剂中含有下一测试所要测定的底 物或是含有的某种试剂成分与下一反应所要测定的底物有作 用,二是该试剂所引导的反应对下一个项目的反应进程带来了 间接的干扰_1]. 应蛋白和脂蛋白(a)试 通过本次实验,我们发现超敏c反 剂会对血清铁的测定产生明显的负干扰,其测定值的差异具有 统计学意义.探究交叉污染产生的原因,笔者认为很可能与试 剂的PH值有关.血清铁的测定原理是:Fe件在酸性条件下反 应,转变为Fe,再与Ferrozine反应生成红色的复合物,根据 吸光度的变化来计算血清铁的含量.超敏c反应蛋白和脂蛋白 (a)的测定均为免疫比浊法,试剂中仅含有磷酸盐缓冲液和相 应的抗体,这些物质与铁试剂中的Fe,Fe和Ferrozine均不 发生反应,但超敏c反应蛋白和脂蛋白(a)试剂均呈弱碱性,这 些呈碱性的试剂被携带到血清铁的酸性反应环境中势必会造 成Fe件向Fe抖转变的反应减弱,生成的红色复合物的量大大减 少,因此血清铁的测定值就会明显降低. 由于试剂成分的复杂性,实时仪器状况的独特性,可能发 生的试剂间的交叉污染的情况也不尽相同_1].为了避免交叉污 染的产生,我们必须合理安排试剂摆放顺序,原则是将具有相 同反应原理的放在一起,将相同酸碱度的放在一起,试剂内含 相同被测成分的要相隔开来,易污染项目测定前吸样针设置清 洗两次以上等[2].一般同一厂家配套试剂的仪器参数,项目之 间位置设定都是经过反复论证的,不随意改动,可避免交叉污 染_3].除此之外,我们在安排标本顺序和项目组合的时候也应 当考虑到交叉污染的问题,这就要求实验人员不仅能够熟练操 作仪器,而且能够掌握各项目的反应原理及试剂组成,积极避 免交叉污染. 【参考文献】 [1]于雷.生化自动分析仪项目间试剂的交叉污染及其避免方法[J]. 临床检验杂志,2003,21(3):168. [23顾国宝,陈洁,李燕,等.全自动生化仪使用中项目问交叉污染的探 讨[J].上海医学检验杂志,2002,17(3):176—177. [35张海明,徐建业.全自动生化分析仪使用中项目间交叉污染的探讨 [J].山西医药杂志,2003,32(4):402—403. 收稿日期;2007—02—08;修回日期:2007—03—12责任编辑:郭怀勇