铁氰化钾—罗丹明6G化学发光体系测定维脑路通

铁氰化钾—罗丹明6G化学发光体系测定维脑路通 铁氰化钾—罗丹明6G化学发光体系测定维 脑路通 第28卷 Vo1.28 第4期 No.4 西南师范大学学报(自然科学版) JournalofSouthwestChinaNormalUniversity(NaturalScience) 2003年8月 Aug.2003 文章编号:1000—5471(2003)04—0606—03 铁氰化钾一罗丹明6G化学发光体系测定维脑路通 何树华2,吕弋,何德勇,胡玉斐,章竹君 1.西南师范大学分析科学研究所,重庆400715;2.涪陵师范学院化学系,重庆408005 摘要:铁氰化钾在碱性条件下能氧化维脑路通产生微弱化学发光,罗丹明6G能大大增强此发光基于此,建立了 一 种直接测定维脑路通的流动注射化学发光方法.该方法线性范围为5.0×10,一5.0×10g/mL,检出限为1.0× 1O.mL ,对1.0×10g/mE维脑路通溶液连续11次测量的相对标准偏差为2.5%.利用该方法对维脑路通注射 液及片剂含量的测定,结果令人满意. 关键词:维脑路通;化学发光;流动注射;铁氰化钾;罗丹明6G 中图分类号:6o.7;0657.3文献标识码:A 维脑路通(Troxerutin,维生素P4)能降低毛细血管的通透性和脆性,能抑制血小板的凝集,有防止血栓 形成的作用,是临床上治疗闭塞性脑血管病的常用药物,21.目前报道维脑路通的测定方法有紫外分光光 度法.4],薄层色谱法],电化学伏安法]和高效液相色谱法.8J,这些方法灵敏度大都不高,有的样品处 理复杂.而利用化学发光测定维脑路通尚未见报导. 化学发光分析法因其具有灵敏度高,线性范围宽,仪器和操作简单等优点,而广泛用于药物的直接测定. 本文研究发现,在NaOH碱性介质中,Fe(CN)可以直接氧化维脑路通而产生微弱发光,而一定浓度的罗丹 明6G能大大增强该发光.据此,本文提出一种测定维脑路通的化学发光新体系,并结合流动注射分析技术, 建立一种简单快速测定维脑路通的新方法.该方法已成功地用于药片及针剂中维脑路通的测定. 1实验部分 1.1仪器与试剂 BPCL超微弱化学发光仪(中国科学院生物物理研究所),HL-2型恒流泵(上海青浦沪西仪器厂).整个 分析系统如图1所示,实验数据的采集和处理均由Windows98系统下BPCL软件完成. 维脑路通标准溶液1.0×10-4g/mL:准确称取维脑路通化学对照品(中国药品生物制品检定所)0.0100g,用水定 容于100mL棕色容量瓶中,贮于冰箱,使用时逐级稀释;K3Fe(CN)6:1.0×10-4mol/L;NaOH:1.0tool/L;罗 丹明6G-7.0×10tool/L;所用试剂均为国产分析纯,水为二次蒸馏水. 1.2实验方法 如图1所示,分别将K3Fe(cN)6溶液,NaOH溶液和载流(罗丹明6G)通过相应的管道以2.0mL/min的 流速输入流通池.打开分析系统,待基线平稳后,通过六通注射阀注入100ttL样品溶液于载流中,样品与 K3Fe(CN)6和NaOH溶液在流通池中混合,产生化学发光,在线性范围内,根据发光强度定量. 收稿日期:2o02一lO一3l 基金项目:国家自然科学基金资助项目(20175039). 作者简介:何树华(1971一),女,四川南江人.讲师,主要从事流动注射化学发光的研究 第4期何树华,等:铁氰化钾一罗丹明6G化学发光体系测定维脑路通607 2结果与讨论样品 2.1铁氰化钾浓度的影响 铁氰化钾浓度对该体系的化学发光强度影响 非常大.因此本文在固定了NaOH和罗丹明6G浓 度的条件下,试验了不同浓度的铁氰化钾(从5.0 X10,,1.0X10-3mol/L)对化学发光强度的影 响,发现当铁氰化钾的浓度为1.0×10-4mol/L时, 发光强度最大. 2.2氢氧化钠浓度的影响 初步试验表明,铁氰化钾一罗丹明6G一维脑路 通化学发光体系只有在碱性条件下才能产生较强 的化学发光.试验了不同浓度的氢氧化钠(从0.5 , 2.0tool/L)对该体系化学发光强度的影响,发现 氢氧化钠的最佳浓度为1.0mol/L.? 2.3表面活性剂和荧光物质的影响 罗丹明6G NaOH 铁氰化钾 P P:蠕动泵;V:六通阀;F:流通池; w:废液;D:检测器;PC:计算机. 图1流动注射化学发光测定维脑路通示意图 Fig.1SchematicDiagramoftheFlowInjection ChemiluminescenceDeterminationofTroxerutin W 表面活性剂和荧光物质对许多化学发光体系都有影响,有的能显着地增强发光强度.本文试验了体积 百分浓度为1%的吐温一20和吐温一80,质量百分浓度为1%的十六烷基三甲基溴化铵和十二烷基磺酸钠, 浓度为1×10-4mol/L的荧光素,二氯荧光素,罗丹明B以及罗丹明6G对碱性条件下铁氰化钾一维脑路通 发光体系的影响,发现只有罗丹明6G能明显地增强发光,并且罗丹明6G的浓度不同,对铁氰化钾一维脑路 通发光的增强程度也不同.本文试验了从1.0X10,,1.0X10-4mol/L浓度范围内的罗丹明6G,发现罗丹 明6G的浓度为7.0×10mol/L时,其增敏效果最好. 2.4流速的影响 流动注射分析中,流速通常是一个重要的影响因素,本文实验的不同流速对该体系化学发光强度的影响, 结果表明该体系中罗丹明6G溶液,铁氰化钾溶液,氢氧化钠溶液的最佳流速分别为2.5,3.0,3.0mL/min. 2.5干扰实验 在选定的最佳实验条件下,试验了维脑路通片剂中常见组分及一些共存组分的干扰情况,结果表明: 对1.0×10g/mL的维脑路通,1000倍的Na,K,cl一,Br一,No3一,s一,c一;100倍的淀粉和糊精;10 倍的葡萄糖,果糖和蔗糖;同倍的维生素c对维脑路通的测定不产生干扰. 2.6标准曲线,精密度及检出限 在选定的最佳实验条件下,维脑路通浓度在5.0×10,,5.0X10g/rnL范围内与发光强度呈良好的 线性关系,其回归方程为AI=7.3C一9.9(C:样品浓度~g/mL,,=0,9951).根据IUPAC建议,计算得其检 测限为1.0×10,g/mL,对1.0×10g/mL的维脑路通平行测定11次,得到相对标准误差为2.5%. 2.7样品分析 取维脑路通片剂(标示含量为100rag)20片,将其剥去糖衣,研磨,称量求得每片的平均重量.取适量 样3份溶解于水,过滤,准确定容,再稀释到线性范围内进行分析.在选定的最佳条件下,对其进行测定, 据其峰高测定维脑路通含量,并进行回收实验.另取维脑路通针剂(标示含量100ms)3支,直接稀释至线性 范围内进行测定,并进行回收实验.实验结果见表1.. 表1样品分析结果 Table1DeterminationofTroxerutininTabletaandInjections . a,b:3次测定平均值.’ 608西南师范大学学报(自然科学版)第28卷 参考文献: [1]陈新谦,金有豫.新编药物学[M].北京:人民卫生出版社,2000.408. [2]任娟清,马鸿宾,张鉴,等.实用药物[M].济南:山东科学技术出版社,1999.939. [3]王淑香,孙华,端木祥,等.维脑路通,胞二磷胆碱注射液在低分子右旋糖酐注射液中的配伍 实验[J].中国药学杂 志,1991,26(9):538—540. [4]邓树海,王晓静,钱萍,等.维脑路通胶囊剂与片剂体外溶出度的研究[J].中国医院药学杂 志,1989,9(10):456—457. [5]何丽一,李宝明.维脑路通的组分分析[J].药物分析杂志,1987,7(4):251—253. [6]赫春香,张淑敏.维脑路通的伏安法行为及其二阶导数卷积伏安法测定[J].分析试验 室,2001,20(2):23—26. [7]WilhelmK,KarlZ.QuantitativeDeterminationof0一(p—Hydroxyethly)一 RutosidesinSerumbyHPI.E[J].JChromatogr,1983,272: 333—340. [8]陈镇生.高效液相色谱法测定三羟乙基芦丁的血药浓度[J].药物分析杂 志,1999,19(2):111—113. FlowInjectionChemiluminescenceDeterminationof TroxerutinWithFerricyanideandRhodamine6G HEShu—hua,LVYi,HEDe.yong,HUYu.fei,ZHANGZhu—jun 1.InstituteofAnalyticNScience.SouthwestchinaNormalUniversity.Chongqing400715,China; 2.Dopt.ofChemistry,FulinTeachersCollege,Chongqing4c.Ch/na Abstract:Anovelflowinjeetionchemiluminescence(CL)systemfordeterminationofTroxerutinwasd escribed.Itwas basedontheCLreactionofferrieyanidewithtroxerutininsodiumhydroxidemediasensitizedbythefluor escentdyerho— damine6G.eproposedprocedurehadalinearrangeof5.0×10,一5.0X10, g/mL.thedetectionlimitWas1.0X 1OwithaRSDof2.5%(1.0X10_..g/mL,n:11).ThismethodWassensitive,simple,rapid,andWassucces sful— lYappliedtodeterminationoftroxerutinintabletsandinjections. Keywords:troxerutin;flowinjeetionanalysis;chemiluminescence;ferrieyanide;rhodamine6G 责任编辑潘春燕