射干抗病毒注射液黄酮类成分的含量测定

射干抗病毒注射液黄酮类成分的含量测定 2011年2月第6卷第4期ChinaPracMed.Feb2011,Vo1.6,No.4 射干抗病毒注射液黄酮类成分的含量测定 史志刚 射干抗病毒注射液为八味中药组成的复方制剂,仅对绿 原酸,次野鸢尾黄素等个别指标性成分进行含量测定,不足以 保证其有效性.本文通过实验建立了对射干抗病毒注射液中 四种活性成分鸢尾苷,野鸢尾苷,野鸢尾黄素和次野鸢尾黄素 的含量同时进行测定的方法,实现了该制剂的多指标含量 控制. 1与方法 1.1仪器与试药仪器Agilent1100型液相色谱仪(配有 DAD检测器,四元梯度泵,在线脱气装置,自动进样器), ChemStation工作站(Agilent科技有限公司). 药品与试剂乙腈(色谱纯,山东禹王实业有限公司禹城 化工厂),冰乙酸(色谱纯,天津市科密欧化学试剂开发中 心),无水乙醇(分析纯,康科德科技有限公司),水为去离子 水.鸢尾苷(TED),野鸢尾苷(IRD),野鸢尾黄素(IRG),次 野鸢尾黄素(IRF)(自制,纯度?99.3%),S1-S10为1O批自 制SGKBDI供试品溶液,M1.M9市售SGKBDI供试品溶液,由 ? 155? 07030501,070314,070313,07030601),陕西金麒麟药业有限 公司(批号:07052202,07052201,07052102)提供. 1.2溶液的制备对照品溶液的制备分别精密称取鸢尾 苷,野鸢尾苷,野鸢尾黄素和次野鸢尾黄素的对照品适量(自 制,纯度399.3%)置同一个25ml量瓶中,加甲醇溶解并稀 释至刻度,摇匀,制成含鸢尾苷836g/ml,野鸢尾苷221/ lIll,野鸢尾黄素19/lIll和次野鸢尾黄素152la,g/ml的混合 对照品储备液.精密量取储备液5?Il,置1Ornl量瓶中,加甲 醇溶解并稀释至刻度,摇匀,作为对照品溶液. 自制SGKBDI供试品溶液的制备取自制SGKBDI1ml, 置l0IIll量瓶中,加蒸馏水稀释至刻度,摇匀,用0.45滤 膜滤过后作自制SGKBDI供试品溶液. 市售SGKBDI供试品溶液取同批市售SGKBDI5支混 匀,用0.45胂滤膜滤过后作市售SGKBDI供试品溶液. 1.3色谱条件CenturySILC18BDS(250nlln×4.6nlnl,5 )色谱柱,流动相系统见下表流速1.0ml/min,紫外检测波 西安高科陕西金方药业有限公司(批号:07030201,070312,长265nni,柱温(30.00? O.15),进样量20. 表1梯度洗脱程序 2结果 取1O批自制SGKBDI和9批市售SGKBDI样品,按 "1.2"项下处理制备供试品溶液,各进样分析三次,测定结果 见表2. 表2含量测定结果 直观比较发现,1O批自制SGKBDI供试品溶液除s3,s5 外,其余8批样品中4种成分的含量变化趋势相似,3批陕西 金麒麟SGKBDI(M7,M8,M9)与这8批样品的变化趋势也较 类似.6批金方SGKBDI中4种成分的含量变化趋势相似,但 作者单位:134001鞍山市食品药品检验所 与其他样品有很大差别.以上结果说明两个厂家生产SGKB- DI所有射干药材来源基本固定,陕西金麒麟所用射干药材用 自制8批合格SGKBDI所用射干药材的这四种黄酮类成分分 布比例相似,而金方药业与它们的相似度较差. 自制SGKBDI供试品溶液浓度为处方注射液浓度的4%, 所以自制SGKBDI中实际鸢尾苷,野鸢尾苷,野鸢尾黄素和次 野鸢尾黄素的含量应为其供试品溶液浓度的25倍.所以自 制SGKBDI中4种黄酮类成分的含量远远高于市售SGKBDI. 3讨论 3.1多指标定量成分的选择射干抗病毒注射液由八味药 材组方,射干为其君药,即针对主病或主证,起主要作用的药 物,而黄酮类化合物又为其主要活性物质,所以本文选择射干 中的鸢尾苷,野鸢尾苷,野鸢尾黄素及次野鸢尾黄素这四种重 要的黄酮类物质,作为指标性成分进行同时含量测定,可以较 科学,可靠,简便的控制射干抗病毒注射液的质量. 3.2流动相的选择射干抗病毒注射液药味较多,成分复 杂,要选择一种流动相系统对其进行四种组分同时定量难度 很大,本文参照射干药材中的异黄酮类成分含量测定的流动 相条件,对流动相系统及梯度程序进行优化,分别考察了水 (含0.o5%磷酸)一乙腈,水(含1%醋酸)-乙腈(含1%醋酸), 水(含1%醋酸)-乙腈等系统,经过多次梯度程序优化,最终 确定了本文的流动相条件. 本文利用HPLC法对射干抗病毒注射液中的四种黄酮类 成分进行了同时定量分析,分别测定了1O批自制制剂及9批 两个厂家市售制剂,结果表明自制射干抗病毒注射液中这四 种成分的含量远远高于市售射干抗病毒注射液.本方法快速 简便,准确可靠,可以用于射干抗病毒注射液的质量控制.