【论文范文】大孔吸附树脂比色法测定柴胡口服液中总皂苷的含量

【论文范文】大孔吸附树脂比色法测定柴胡口服液中总皂苷的含量 论文范文 目:大孔吸附树脂比色法测定柴胡口服 液中总皂苷的含量 编辑:司马小 【摘要】 目的进一步完善柴胡口服液的质量标准～建立该制剂中总皂苷的含量测定。方法样品中的柴胡皂苷经大孔吸附树脂富集后～以柴胡皂苷a为对照品～采用对二甲氨基苯甲醛磷酸法显色～于545 nm波长处测定总皂苷的含量。结果柴胡皂苷a在18.7，66.4μg〃ml-1范围内与吸光度有良好线性关系～r= 0.999 6～平均加样回收率为98.06%～RSD= 1.1%。结论该方法稳定、准确、可靠～可作为柴胡口服液中皂苷类成分的质量控制方法。 【关键词】 柴胡口服液 柴胡总皂苷 大孔吸附树脂 比色法 柴胡口服液为柴胡药材经加工而制成的单味药制剂～具有退热解之功效～用于外感发热～症见身热面赤、头痛身楚、口干而渴,1,等～其主要成分为柴胡皂苷和挥发油。2005版《中国药典》中的柴胡口服液质量标准对该制剂中挥发油的含量进行了规定～而对另外一类 有效成分——柴胡总皂苷仅进行了定性鉴别～这与柴胡总皂苷类成分具有解热、抗炎、抗病毒、调节内分泌及免疫系统等重要药理作用的事实极不相符,2,。同时～柴胡口服液中总皂苷的含量测定方法还未见报道。因此～柴胡口服液中皂苷类成分定量方法的建立～对于完善其质量标准～更好地控制制剂质量～提高制剂的安全性和有效性均具有重要意义。基于此～本文以柴胡口服液为研究对象～首次采用大孔吸附树脂-比色法建立其中总皂苷类成分含量测定的方法。现报道如下。 1 仪器与试药 1.1 仪器 U型紫外可见分光光度计,日本岛津仪器公司,～ 型电子天平,瑞士梅特勒公司,～ 型旋转蒸发仪,郑州长城科工贸有限公司,。 1.2 试药柴胡口服液,河南天方药业生产的柴胡口服液3批～批号为:070901～071004～071101,～柴胡皂苷a对照品,作者自制～HPLC面积归一法测定纯度,98%,～型大孔吸附树脂,天津南开大学化工厂,～无水乙醇、磷酸、氢氧化钠、对二甲氨基苯甲醛均为分析纯。 2 方法与结果 2.1 对照品溶液的制备 称取柴胡皂苷a对照品4 mg～置于10 ml量瓶中～精密称定～加适量甲醇～超声溶解～再用甲醇稀释至刻度～摇匀～即得。 2.2 供试品溶液的制备,3～4,精密移取柴胡口服液3 ml～上样于装有10 ml已经处理好的大孔吸附树脂的层析柱,内径1 cm,～进行动态吸附。待吸附完毕后～用质量-体积分数为5,的氢氧化钠水溶液洗脱至近无色～再用蒸馏水洗脱至中性～接着用体积分数为30,的乙醇洗脱至近无色～最后用体积分数为95,的乙醇50 ml进行洗脱～收集该部分洗脱液并浓缩蒸干～再用体积分数为50,的乙醇0.5 ml定量转移至10 ml具塞玻璃试管中～即得供试品溶液。 2.3 测定波长的选择精密吸取对照品溶液及供试品溶液各0.5 ml～分别置于不同10 ml具塞玻璃刻度试管中～加质量-体积分数为 0.1%对二甲氨基苯甲醛乙醇溶液0.5 ml～于70 ?水浴中加热10 min～然后取出放置至室温～加磷酸4.0 ml～摇匀～再置于70 ?水浴中加热5 min～放置至室温。在400，800 nm进行扫描。结果显示:标准品及样品均在545 nm处有最大吸收峰～故最终确定测定波长为545 nm。 2.4 线性关系考察精密吸取“2.1”中对照品溶液0.2～0.3～0.4～0.5～0.6～0.7～0.8 ml～分别置于不同10 ml具塞玻璃刻度试管～按照“2.3”项下～从“分别加质量体积分数为0.1%对二甲氨基苯甲醛乙醇溶液0.5 ml～”开始～依法显色～于545 nm处测定吸光度。以对照品浓度,C,为横坐标～吸光度,A,为纵坐标进行线性回归～得回归方程A = 0.009 2C+ 0.040 9,r = 0.999 6,。结果表明～柴胡皂苷a在18.7，66.4 μg〃ml-1浓度范围内与其吸光度呈良好线性关系。 2.5 精密度实验精密吸取同一供试品溶液0.5 ml～依法显色后～于545 nm处测定吸光度值～连续测定5次～RSD为0.60 %～表明仪器精密度良好。 2.6 加热时间及稳定性实验取同一批号样品5份～每份3 ml～按照“2.2”项下方法制备供试品溶液5份～分别置于不同10 ml具塞刻度试管中～加质量体积分数为0.1%对二甲氨基苯甲醛乙醇溶液0.5 ml～摇匀～置于70 ?水浴～加热10 min～取出放置至室温～加磷酸4.0 ml～摇匀～再于70?水浴中加热不同时间,5～10～15～20～30 min,～取出后放置至室温～分别于5～10～30～60～90～120 min时间点处测定其吸光度。结果表明～加热5 min时样品吸光度值已达到最大～且样品显色后2 h内基本稳定～RSD为0.58%。 2.7 重复性实验 取同一批号样品6份～每份3.0 ml～按照“2.2”项下方法～制备供试品溶液～依法显色～采用外标两点法计算各供试品中总皂苷的含量。结果得总皂苷含量的平均值为61.79 μg〃ml-1～RSD为2.0 %～表明重复性良好。 2.8 加样回收率实验 精密吸取“2.7”项下同一批号的柴胡口服液9份～每份1.5 ml～分别精密加入适量柴胡皂苷a对照品～依法制备样品、显色、测定含量～并计算回收率。结果见表1。 表1 回收率实验结果,略, 2.9 样品含量测定取河南天方药业生产的柴胡口服液3批～批号分别为:070901～071004～071101～每批3份～每份3.0 ml～依法制备供试品溶液～显色～并测定含量。结果见表2。 表2 柴胡口服液中总皂苷含量测定结果,略, 3 讨论 柴胡皂苷是柴胡中的主要活性物质～也是柴胡口服液发挥药效的主要成分～由于柴胡口服液中其它成分对含量测定的干扰～无法直接用比色法对其皂苷类成分进行测定～经过试验发现采用大孔吸附树脂柱层析～通过不同浓度溶剂对其进行洗脱～可有效地去除测定干扰～并对柴胡皂苷进行富集纯化～有利于含量测定。 本文采用大孔吸附树脂分光光度法测定柴胡口服液中的总皂苷含量～该方法稳定、准确、可靠～可作为柴胡口服液的中总皂苷含量测定的方法～为进一步完善其质量标准提供了科学依据。 【参考文献】 ,1, 国家药典委员会.中国药典～?部,S,.北京:化学工业出版社～2005:562. ,2, 谢东浩～蔡宝昌～安益强～等.柴胡皂苷类化学成分及药理作用研究进展,J,.南京中医药大学学报～2007～23,1,:63. ,3, 王胜春～李晓玮～王俊琴(反相高效液相色谱法测定柴胡及柴葛颗粒中柴胡皂苷D的含量,J,.时珍国医国药～2004～15,5,:262. ,4, 刘 岱～杨立新～崔淑莲(高效液相色谱法测定柴贯冲剂中柴胡皂苷A的含量,J,.中国中药杂志～1998～23,2,:92.