刺芹侧耳菌丝相对生长性状的研究

刺芹侧耳菌丝相对生长性状的研究 刺芹侧耳菌丝相对生长性状的研究 食用菌?2007.14(4):9--13 文章编号:1005—9878(2007)04—0009—05 刺芹侧耳菌丝相对生长性状的研究 尚晓冬,程继红,谭琦 (上海市食用菌技术研究中心,上海市农业遗传育种重点实验室,上海市农业科学院食用菌研究所,上海201106) 摘要:刺芹侧耳两菌株于特定培养基上对峙培养至菌落接触后,菌落相对大小的形成遵循内在规律而非随 机变化,即条件依赖的可重复性和秩序性,据此可以定义特定条件下这两个菌株的菌丝相对生长.确定群体 内各菌株间菌丝相对生长存在相对稳定的比较优(劣)势.菌丝相对生长与菌丝生长速度之间存在较高程度 的相关性.菌丝相对生长结合了营养体不亲合和菌丝生长速度两方面的信息量,用该性状表现的菌株遗传多 样性的结果更为可信. 关键词:刺芹侧耳;菌丝相对生长;遗传多样性 中图分类号:$646.140.1文献标识码:A 食药用真菌生物多样性的研究离不开各种 性状或标记,如菌丝生长速度,子实体颜色,同功 酶,DNA标记等,其中菌丝生长反映了一定条件 下食药用菌菌株占领有限的生存资源,进而获得 竞争优势的能力.在食药用真菌栽培过程中,对 菌株生长进行描述时也经常用到菌丝长势的指 标,菌丝长势好往往意味着菌株发菌快而且健 壮,定殖时间短,因而降低了受污染的机会.因 此,无论是遗传研究还是育种实践,菌丝生长一 直作为一个最基本,最重要的性状而倍受重视. 但是,通常用菌丝生长速度作为考察的 菌丝生长却不似看起来那么简单.即使在拥有 相同遗传背景的条件下,菌株仍可根据环境,营 养条件调动相应的生理生化机制,菌丝生长是这 一 系列复杂生物学过程的外部表象,其中任何一 个环节的变化都可能影响最终结果.这些特性 决定了菌丝生长速度不如DNA标记稳定,受很 多因素的影响而变得"测不准",特别是当菌株间 差异较小时,这种差异很容易淹没在实验的噪音 中而检测不出.因此,如何将菌丝生长的特性表 现得更为简单,可靠和实用一直是研究人员想解 决的问.另一方面,菌落的对峙培养是食用菌 研究中经常使用的技术,主要用于根据营养体亲 合性的结果研究群体的遗传结构及菌株间遗传 相似性的大小(遗传关系的远近).在以往的对 峙培养中,除了分界线有无及具体形态,对峙双 方菌落的相对大小极少有研究提及.我们在对 刺芹侧耳(Pleurotuseryngii)菌株的遗传多样性 进行研究时发现,对峙培养菌落的相对大小能一 定程度上反映它们的遗传差异,并和菌丝生长之 间存在着一定的相关性,这一特性可用于菌株资 源的评价及管理.现将研究结果报道如下. 1材料与方法 1.1供试菌株 供试刺芹侧耳1,13及19号菌株来自上海 市农业科学院食用菌研究所,14,18号来自武汉 市新宇食用菌研究所. 1.2培养基 PDA培养基(DIFCO),MEA培养基 (DIFCO),木屑培养基(硬杂木木屑,0.5 琼脂). 1.3刺芹侧耳自交双核菌体群体的建立 19号菌株鲜子实体由上海丰科生物科技股 分有限公司赠送,室温下用平皿收集孢子,用无 菌水稀释孢子至2×10个/mL(血球计数板法), 每皿约4滴涂布于PDA平板(培养皿直径为 9cm,培养基量为约20mL/]ff1..下同).23?, 黑暗中倒置培养8,10天,当平板上出现肉眼可 见小菌落时,用手术刀挑取适当大小的菌丝块转 收稿日期:2007—04—10原稿;2007—07—12修改稿 基金项目:上海市科委标准化专项"食用菌品种区别性检测技术研究"(项目编 号:04DZ05004) 作者简介:尚晓冬(1973一),男,1999年毕业于南京农业大学植保系,硕士,副研,主要 从事食用菌遗传研究,发表主 笔论文6篇. 1O食用菌第14卷 接于PDA平板上,继续培养5天(条件同上),重 复挑取转接1,2次,直到获得纯培养.最后在 菌落外缘挑小菌丝块压水玻片于显微镜下(放大 300倍)观察菌丝有无锁状联合,菌丝有锁状联合 的为所需自交双核体. 1.4刺芹侧耳菌丝相对生长测试 在培养平板中央对峙接种待测双核体菌丝 块(菌龄5天,大小约为lOmm.,相距约为3cm), 在25?,黑暗条件下倒置培养8,10天,记录两 菌落交界处分界线的形态及相对菌落大小. 1.5刺芹侧耳双核菌株生长速度测定 挑取活跃生长的菌丝块(菌龄5天,大小约 为10mm.)接种于PDA平板的中心.接种平板 在25?,黑暗中倒置培养7天.培养结束后用 直尺测量菌落直径(不同方向测3次,取平均 值),每菌株3次重复. 2结果 2.1部分菌株在不同培养基中菌丝相对生长情况 在培养皿中进行对峙培养时,不同菌株菌丝 生长至接触后形成的分界线可分两种类型,一种 菌落交界处会出现由菌丝生长受抑制而形成的 A 稀疏分界线,培养时间延长后有些会出现棕色色 素沉淀(图1A),这种分界线由营养体不亲合所 致;另一种营养体亲合的菌株菌落能很好地生长 至完全接触,菌落的分界可通过菌落形态的不同 而加以辨别(图1B).无论哪种类型,菌落的分界 线多数情况下会由于菌丝生长速度差异而引起 弯曲,少数情况下呈直线,据此可以界定对峙菌 落的相对大小即菌丝相对生长.在菌龄,培养 基,环境相同的情况下,对峙菌落的相对大小可 重复,而改变培养基后则可能发生不同.如在本 研究中,在PDA(图1C)和MEA(图1D)培养基 中,14号菌株菌丝生长均较慢,所形成的菌落较 小,表现出生长劣势;而在木屑(图1E)培养基上, 14号菌株生长较快,形成的菌落较大,表现出生 长优势.此外,菌丝相对生长呈传递规律,如在 木屑培养基上,14号菌丝生长较8号占优,8号 较12号优,14号相应地较12号优,这种传递现 象在其它培养基上也是如此.这些结果初步表 明,一定条件下菌株对峙生长后菌落的相对大小 及据此确定的相对生长优劣遵循内在规律而非 随机变化,即条件依赖的可重复性和秩序性.下 面的实验在较大的范围内表明了这一规律. B 图l部分菌株在不同培养基茵丝相对生长情况 Fig.1CompetitivemyceliagrowthofP.eryngiistrainsondifferentmedia 2.2供试菌株相对生长势排序 本研究对19株不同来源的供试菌株在PDA 培养基上进行了两两对峙培养,相对生产结果见 表1.供试菌株营养体不亲合线有无的表现很容 易区别.营养体不亲合性的结果表明,1,3, 5,12,15,17和19菌株构成一个亲合群,2,6,7, E 13和18菌株构成一个亲合群,其余8,9,10,11, 14,16,4等菌株各自为一个亲合群,以上19株菌 株共分为9个亲合群,各亲合群所含菌株数差异 较大.结果还显示,同一营养体亲合群的菌株彼 此之间多数情况下不表现相对的生长优劣,对群 外菌株在相对生长上的表现基本一致,但也有例 第4期尚晓冬,等:刺芹侧耳菌丝相对生长性状的研究 外.例如,比较15号和17号菌株,就会发现这两 个菌株对其它菌株的表现完全相同,而7号菌株 的表现与亲合群内其它菌株的表现却差异较大. 结果表明,营养体亲合性和相对生长之间的关系 以协调一致为主,同时,相对生长揭示出菌株间 更丰富的多态性,这也说明它们反映的本质是一 致的,只是侧面和层次有区别. 其次,从相对生长势的两两比较中,可以发 现这些菌株间有一种固定顺序.如8号菌株对 所有菌株所形成的菌落均大于或等其它菌株,不 表现出生长劣势,而4号对其余所有菌株都表现 出劣势,它俩分别占据序列的强弱两端.在剩余 的菌株中,2号菌和14号菌株又分别占据了序列 的两端.依此类推,可得到全部菌株相对生长由 优到劣的排序,即8,2(6,18),13,9,7,1(3,5, l2,l5,l6,l7,l9),lO,11,l4,4共lO个秩. 表1供试刺芹侧耳菌株菌丝相对生长和营养体亲和群结果 TablelCompetitivegrowthdataandsomaticcompatibilitygroupingsofP.eryngiiisolates 菌株编号26187134910111435151719121 6 18 7 13 4 9 1O <>> << <<> > >> >> 2.3菌丝相对生长性状与菌丝生长速度的关系 图2菌丝相对生长分级 Fig.2CompetitivemycelialgrowthpatternsbetweenP.eryngii,isolate#19,andinbredproge nies <<<<>>>><<一大" >><>>>>><> 一一,一 <<<<>一奎m >>>>>><>>一形0 <<>><<<<>一崎 食用菌第14卷 本研究首先以19号菌株作为测试菌株,分别 与其自交双核体后代菌株(148株)一一对峙培养, 同时测试它们的生长速度.如图2(上排从左至 右,下排从右至左),根据对峙菌落的相对大小的差 异,将自交双核体后代菌株(图2培养皿中右侧菌 株)对其亲本19号菌株的相对生长分成10级,依 次为2,1,0,一1,一2,一3,一4,一5,一6,一7,其中 2及1级表示自交后代在对峙生长后形成的菌落 大于测试菌株19号,生长占优;0级表示对峙菌落 相等,对峙任何一方均不占优;一1,一7级表示自 交后代在对峙生长后形成的菌落较小,生长呈劣 势,且数值越小,劣势越明显.在分级的基础上,除 了一7等级内2个生长极慢的菌株外,统计所有其 余分属同一等级自交双核体菌株的菌丝生长速度 (平均值及标准偏差),分析相对生长与菌丝生长平 均速度两者的相关性,结果见图3. 一 75—7—6.5—6—5.5—5—45—4—3.5—3—2.5—2—1.5—1—0.500.511.5225 菌丝相对生长势等级Gradeofcompetitivegrowthofmycelia 图3菌丝相对生长与菌丝生长速度相关性 Fig.3Correlationbetweenthegradeofcompetitivegrowthandmycelialgrowthrate 从图2及图3结果可知如下几方面内容.首 先,超9O%自交双核体对其亲本的相对生长等级 小于或等于0,超过96自交双核体后代菌株生 长速度慢于或等于亲本(亲本所在等级菌丝生长 速度为68.6ram),表明在相对生长和菌丝生长速 度上,自交后代绝大多数个体在整体上表现出劣 势,但仍有少数菌株表现出超亲优势.其次,分 属同一相对生长等级的菌株,其菌丝生长速度差 异较大,菌株生长速度的极差或相对偏差可以表 明这一点.另外,菌丝生长速度相同的菌株在进 行相对生长测试时会分到不同的等级中.但最 重要的是,若以各等级生长速度的平均值对相对 生长势进行相关性分析,两者仍表现出高度的相 关,本研究中这两个因素的相关系数R为 0.9318. 进一步扩大测试样本,增加2个测试菌株 (编号分别为l5和a1的19号菌株自交双核体后 代),共3个菌株对19号菌株自交双核体后代相 对生长与菌丝生长速度相关性分析的综合结果 显示,两者间仍然表现出较高的相关性(图4). 这种相关性说明,相对生长和菌丝生长速度是菌 株同一属性的两种表象. E 基 善 0 0 E 旦 矧 蜓 {匾 35 30 25 ? = 20要 15d Z l0 :【噩 5 0 = 07501900 . ? .5 r ? ?,/()() : /??200 : 一 8.0—60—40—200.02.04.0 菌丝相对生长指数Relativegrowthindexofmycelium 图4菌丝相对生长与菌丝生长速度相关性 Fig.4Correlationbetweencompetitivegrowth andmyceliumgrowthrate 3讨论 以往的研究中,对峙培养较多用于考察菌株 间的营养体亲合性,定性地描述菌株问遗传差异 的大小和群体内的遗传多样性,营养体亲合的菌 株遗传差异小或无,不亲合的菌株差异大.在生 产实践中,基于该特性的所谓拮抗实验也是进行 菌株区别与鉴定的一项基本手段.如在本研究 中,用该技术将19株供试菌株分为9个营养体亲 ??加?如加?加 一g邑.J0重盘自矧粗 第4期尚晓冬,等:刺芹侧耳菌丝相对生长性状的研究 合群,亲合群所含菌株数差异较大.从菌株来源 分析,所含菌株数最多的一个群可能由一个主要 生产用品种的不同分离株组成,这也可能是造成 本研究中群内菌株对外表现趋于一致的原因,这 不代表不同来源菌株组成一个群的情况.除此 以外,菌落交界后对峙菌落的相对大小界定了双 方的领地,这是对峙双方获得生存资源能力的反 映.本研究通过培养条件(主要是培养基)和对 峙培养与生长速度相关性研究,认为对峙培养后 所形成的菌落的相对大小反映了菌株间的遗传 差异,而且在亲合的情况下仍然可以过分界线获 得这些遗传差异,虽然尚不清楚这种比较差异表 现的生理过程,但它应该是菌株在竞争中相关遗 传和环境因素共同作用的结果.我们认为,作为 表象,无论是营养体不亲合性还是菌丝相对生 长,它们对遗传本质的反映在侧面和层次上各有 侧重,也都只是部分的而不是全部的反映,两者 有效结合应用,才能更全面地反映本质.在菌株 鉴定的实践中,营养体亲合性和相对生长势的应 用可分为两个层次,一是直接考察待测菌株间的 营养体亲合性及相对生长势,二是以其它一些标 准菌株作为参考,考察待测菌株对这些标准菌株 在营养体亲合性和相对生长势上的表现.我们 认为在有些情况下,这种间接地,侧面地测试结 果对于全面,精确地判断待测菌株间的异同更为 重要. 在研究菌丝相对生长和菌丝生长速度的关 系中,原始数据的真实可靠性有很大影响.有关 接种块活力,培养基批次和厚度,温度,湿度及光 照的任何微小变化都会对菌丝生长速度的测试 结果产生影响.本研究尽管最大程度地从实验 和操作上考虑了实验条件及分级主观性的 因素,但它们还是不可必免地会影响到结果的准 确度.如,有些分属同一相对生长等级菌株的菌 丝生长速度差异较大,而有些菌丝生长速度相同 的菌株在进行相对生长测试时也可能分到不同 的等级中.这种相对生长与生长速度不协调的 原因就包括在检测过程中的误差.相比之下,环 境条件变化对于同时接种于同一块培养皿中进 行对峙培养的两个菌株的影响是一致的,因此对 结果的影响相对较小.从这一点来讲,相对生长 的结果比菌丝生长速度更加可信. 秩序是自然界最基本,最重要的属性之一, 也是人类认识自然,认识自身的一个重要途径. 由于事物总是以多角度,多层次展示的,其中的 秩序也是随着人们的认识深入而逐渐显露的. 本研究认为菌丝的相对生长势是丝状食药用真 菌的一个秩序.由于确定的群体中各菌株间菌 丝相对生长势存在稳定的比较优(劣)势,使原本 无序可排的菌株群体可以用选择排序的方法使 其按相对生长势排序,对于有序群体以外的菌 株,可用二分插人排序法确定其在群体中的位 置.因此,菌丝相对生长势对于菌株资源的多样 性研究,开发利用及管理有重要的实用价值. 参考文献 [1]LARRAYALM,IDARETAE,ARANAD,eta1. Quantitativetraitlocicontrollingvegetativegrowth rateintheedibleBasidiomycetePleurotusostreatus [J-I.AppliedandEnvironmentalMicrobiology,2002 (68):1109—1114. [2]GIOIATD,SISTOD,RANAGL,eta1.Genetic structureofthePleurotuseryngiispecies—complex [J].MycologicalResearch,2005(109):11,71—8o. [3]GEORGIOSI.ZERVAKIS,GIUSEPPEV,eta1. Geneticpolymorphismandtaxonomicinfrastructure ofthePleurotuseryngiispecies—complexas determinedbyRAPDanalysis,isozymeprofilesand ecomorphologicalcharacters[J].Microbiology,2001 (147):3183—3194. [本文编辑]曹晖 ACTAEDULISFUNGI@2007.14(4):14,18 CharacterizationofCompetitiveMycelialGrowthin Pleurotuseryngii SHANGXiaodong,CHENGJihong,TANQi (ShanghaiBiotechnologyandEngineeringResearchCenterfortheEdibleFungi;KeyLaboratoryofAgriculturalGenetics andBreeding;InstituteofEdibleFungi,ShanghaiAcademyofAgriculturalSciences,Shanghai,201106,China) Abstract:Competitivemycelialgrowth(CMG)betweenPleurotuseryngiiisolatesisgeneticallycontrolled, andstableCMGresponses(positive,neutralornegative)wererecordedamongthestrainstested. CorrelationsbetweenCMGresponsesandmycelialgrowthratewereobserved.CMGsimultaneouslyreflects informationrelatingtosomaticincompatibilityandmyceliagrowthrateinediblemushrooms,andcanbe readilyandreliablyappliedtostudiesongeneticpolymorphismamongthisgroupoffungi. Keywords:Pleurotuseryngii;Competitivemycelialgrowth;Geneticpolymorphism Morphologicalandphysiologicalcharac— teristicssuchasmyceliagrowthrateandfruit bodycolor,aswellasisozymepatternsand DNAmarkers,areessentialforstudying biodiversityamongediblemushrooms.引.Of theseparameters,scientistsconductinggenetic researchandfarmersengagedinmushroom cultivationhavealwaysplacedconsiderable emphasisonmycelialgrowthsincethisfeature isthoughttobestreflectthecompetitive capabilityofmushroomsunderagivensetof growthconditions.Myceliathatgrowrapidly andvigorouslyarethusconsideredlesslikelyof becomingcontaminatedbeforethecompletion ofthespawningstage.Paradoxically, considerablecautionisnecessarywhenusing myceliagrowthtoevaluategenetic polymorphismamongmushroomresources sincemyceliagrowthrateisextremelysensitive toexperimentalparameterssuchasthevigorof theinoculum.environmentalfactorsand nutrientlimitation.Forsuchcomplicated phenotypes,itisoftendifficulttodistinguish differencesbasedongeneticfactorsfrom experimentalbackgroundeffects,particularly whenonlyveryslightdifferencesinmycelial growthrateareevident.Consequently, researchershavefocusedmuchattentionon myceliagrowthevaluationsystemsthatare simple,reliableandpracticable.Conversely, competitivemycelialgrowth(CMG) assessment(inwhichtheresponsesoftwoor moreconfrontingfungalcoloniesareappraised andcharacterisedunderadefinedsetofgrowth conditions)isatechniquecommonlyusedto studydifferencesingeneticconstitutionand polymorphismamongstrainsbasedonsomatic incompatibility.However,inpreviousstudies, emphasishasbeenplacedonthemorphologyof thedemarcationlineswhereastherelativesizes ofthetwocompetitivecoloniesarerarely mentioned.Inthispresentstudyofgenetic polymorphisminPleurotuseryngii,wehave demonstratedthatthesizeofthecolonies formedinconfrontationa1cu1tivationtests reflectsgeneticdifferencesamongthe strainsandrelatestomyceliagrowth Thisparametercan evaluationand resourees. thereforebeapplied managementof 1MaterialsandMethods 1.1Fungalstrains Received:April10,2007;Accepted:July12,2007 SponsoredbyprojectofShanghaiSciencesCommittee(No.04DZ05004) Tel:+86.21—62209760E-mail:xdshang@163.com fungal rates. tothe strmn No.4SHANGXiaodong,CHENGJihongandTANQi15 OfthenineteenP.eryngiiisolatesexamined inthisstudy,14(strainflOS.1.13andno.19) wereobtainedfromtheInstituteofEdibleFungi, ShanghaiAcademyofAgriculturalSciences,and five(strainnos.14,18)fromtheXinyuEdible FungiInstitute,Wuhan. 1.2Growthandcultivationmedia Potatodextroseagar(PDA)(Difco),malt extractagar(MEA)(Difco)andhardwood sawdustmedium(hardwoodsawdust supplementedwith0.5%agar,65%water content)wereusedinthisstudy. 1.3Preparationofinbreddikaryoticprogeniesof P.eryngii P.eryngii,strain19,wascultivatedat FincBio-tecInc.,Shanghai,accordingto normalcommercialpractices.Wholefresh basidiocarpswereplacedverticallyinsterile Petridishesovernightinordertoobtain basidiosporeprints.Sporesweresuspendedin , 0.5mLsterilewaterandthesuspensions dilutedtoapproximately2×10spores/mLas determinedusingflhaemocytometer.AIiquots ofthedilutedsuspensionswerespreadoverthe surfaceofPDAplatesandincubatedat23? for8—10daysuntilsmallcoloniesappeared. Hyphaefromtheedgeofthesecolonieswere transferredtofreshPDAplatesandtheprocess repeated1-2timesinordertoobtainpure cultures.Progenieswithhyphaepossessing clampconnectionswereretainedandstoredat 4?forfurtherstudy. 1.4CompetitivemyceliagrowthamongP.eryngii strains Piecesofagar(,10mm.)containing myceliumfrom5-dayoldstockculturesoftwo differentstrainswereplaced,,3cmapartat thecenterofPDAandMEAplatesand incubatedat23?for8.10days.Mycelial morphologyatthedemarcationlineandthe relativesizesofthetwocolonieswere recorded. 1.5Myceliaigrowthrate Anactively—growingplugofmycelium (5daysold,,10mm.)wasplacedatthe centerofaPDAplateandthecolonydiameter wasmeasuredafterincubationat25?for 7days.Growthrateexperimentswere conductedintriplicateforeachstrain. 2Results 2.1CompetitivemyceliagrowthamongP. eryngiistrainsondifferentmedia. Twotypesofdemarcationlinesareformed betweentwoP.eryngiicoloniesgrowingon thesamePetridish.Type1consistsoffllineof sparsemycelialgrowth,formedasaresultof mycelialgrowthinhibitionwherethetwo coloniescomeintocontact(seeFig.1Ainthe Chineseversion),whichturnsbrownincolor afterprolongedincubation.Thistypeoccurs betweensomaticallyincompatibleisolates. Type2demarcationlinesareformedbetween somaticallycompatibleisolatesandareless clearbecausethetwostrainsgrowwell together.Thistypeisrecognizedfrom differencesbetweenthetwocolony morphologies(seeFig.1BintheChinese version).Althoughthedemarcationlinemay belinear,inthemajorityofcases,bothtypes formcurvedlinesduetothedifferentgrowth ratesofthetwoisolates.Competitivemycelia growthisdefinedbytherelativesizesofthe coloniesformedbythetwoisolates.The relativesizesofcompetitivecoloniesarestable whentheexperimentalconditionsrelatingto fungalinoculum,growthmediumand environmentalfactorsarekeptconstant.Our datashowthatisolate14grewmoreslowly, andproducedflcorrespondinglysmallercolony (i.e.flnegativecompetitivegrowthresponse), comparedwithisolates8and12onbothPDA (seeFig.1CintheChineseversion)andMEA (seeFig.1DintheChineseversion)media. However,onhardwoodmediaum,isolate14 grewatflfasterrateandproducedfllarger colony(flpositivecompetitivegrowth response)comparedwiththetwootherisolates 16ACTAEDULISFUNGIV01.14 (seeFig.1EintheChineseversion).Relative competitivegrowthresponsepatternswerealso constantamongthedifferentisolateswhen grownunderthesameconditions.For example,onhardwoodmedium,isolate14 grewatafastergrowthratethanisolate8, isolate8atafasterratethanisolate12,and isolate14atafasterratethanisolate12.This constancyofcompetitivegrowthresponse amongthedifferentisolateswasalsoobserved onthetwoothergrowthmedia. 2.2RankingofP.eryngiicompetitivegrowth responsepatterns Whenconfrontationaltestsbetweenthe19 isolateswereconductedonPDAmedium, demarcationlinescharacteristicofbothsomatic incompatibilityandsomaticcompatibilitywere readilydistinguishable.Resultwassummarized inTable1(intheChineseversion).Ourdata revealedthatisolates1,3,5,12,15,17and 19comprisedonesomaticcompatiblegroup (SCG1),andisolates2,6,7,13and18a secondgroup(SCG2).Isolates8,9,10,11, 14,16and4eachcomprisedaseparateSCG (SCG3.SCG9)sothatthe19isolates collectivelyformednineSCGs.Isolateswithin aparticularSCGusuallyexhibitedno competitivegrowthadvantageovereachother andgenerallygavesimilarresponseswhen confrontedwithisolatesfromanotherSCG. However,therewereexceptions;forexample, isolates15and17fromSCG1displayedparallel responseswhenconfrontedwithisolates belongingtootherSCGs,whereasthe responsesofisolate7fromSCG2were irregular.Theparallelresponsesindicatethat somaticcompatibilityisconsistentwithCMGin reflectinggeneticfactorscontrollingmycelial growth.However,CMGisamorepowerful toolfordetecting?