梅花鹿魏氏梭菌病的诊治

梅花鹿魏氏梭菌病的诊治 J; 捣花鹿魏梭病诊台 ?梁占学马海利吴国清程志学(山西农业大学动物科技学院030801) 2007年l2月,山西省太原卧虎山动物园梅花鹿 发生了一起急性传染病,发病急,病程短,死亡快,病 鹿肠黏膜呈现大面积出血性,坏死性炎症.根据流行 特点,临床症状,病理剖检和实验室检验,确诊为A型 梅花鹿魏氏梭菌病,经防制收到了良好的效果. 1发病情况及I临床症状 梅花鹿突然死亡,死亡的鹿约为2岁,营养良 好.据饲养人员介绍,梅花鹿生前出现食欲不振,腹 泻,精神萎顿,还伴有轻微的神经症状,如转圈,血便 等,1-2天死亡.发病后在饲料中加入磺胺二甲基嘧 啶片(2次/天,3片/只),并用青霉素治疗,均未见 效.另据动物园工作人员介绍,该园为新建动物园, 以前该场地经常有养羊户放牧. 2病理剖检变化 尸僵完全,肛门松弛.肠系膜严重充血,腹膜出 血.肺脏眼观变化不明显.心脏内血液凝固不良,心内 膜明显出血.肝脏肿大,呈黄褐色,半熟状,质脆,局部 有针尖大出血点,并有l,1.5cm灰白色坏死灶.大小 网膜严重出血.瘤胃浆膜有出血斑,瘤胃臌气,瘤胃黏 膜脱落,易剥离,瘤胃底部严重出血,瘤胃内积有大量 草料;瓣胃和真胃黏膜严重出血,黏膜大面积脱落,幽 门肿胀变小.肠道黏膜普遍弥漫性充血,出血,呈血肠 样,尤以空肠,回肠,结肠为重,十二指肠变薄,几乎透 明,内有多量肠液;直肠病变不明显,但在肠道内有陈 旧性血液,肛门有暗红色血迹;肠系膜淋巴结充血,有 针尖大坏死点.肾脏包膜不易剥离,质软脆弱,皮质和 髓质界限不清.脾脏肿大,瘀血,出血,边缘钝厚,面 有针尖大坏死灶. 3实验室检验 3.1涂片镜检 取死亡梅花鹿肠内容物涂片,革兰氏染色镜检, 见有带荚膜的革兰氏阳性粗短杆菌,单个或成双排 列,有的呈短链状. 3_2细菌分离培养 l2特种经济动植物2009.10 将所采集病料划线接种于葡萄糖血琼脂平板培 养基中,分别在有氧和厌氧的环境中37?过夜培养. 有氧培养,仅肠内容物接种的培养基长出非致病菌, 其他脏器接种未见病菌生长;厌氧培养,血平板上长 出灰白色表面光滑,边缘整齐,周围有双重溶血环的 菌落,内环透明(B),外环为浅绿色(),之后将其放 置在有氧条件下1天,菌落变灰绿色. 取溶血菌落进行涂片,染色镜检,见革兰氏阳性 粗短杆菌.与肠内容物涂片可见细菌形态相似. 3.3纯培养物接种动物试验 选健康的小白鼠6只,16%,20%随机分为2组, 一 组为试验组,一组为对照组.将纯培养物0.3mL注 射于试验组鼠腹腔内,对照组鼠腹腔注射生理盐水 0.3mL,观察结果,试验组4,l0小时内死亡,对照组无 死亡. 3.3.1毒素的检查无菌操作取梅花鹿病变明显 的肠内容物,1:l稀释,在4?温度条件下3000转/分 钟离心20分钟.取上清液,在鼠尾静脉注射0.4mL/只, 对照组注射灭菌生理盐水.结果,试验组小鼠12小时内 全部死亡,对照组小鼠无异常反应,说明有毒素存在. 3.3.2细菌培养物最小致死量的测定取分离 纯化的典型菌落,接种于厌氧肉肝胃酶消化汤培养基 中,37?增菌.然后取培养液,按培养基总量的1%接 种于另一厌氧肉肝胃酶消化汤培养基中,37?培养7 小时.然后在4?温度条件下3000转/分钟离心20 分钟,吸取上清液,以0.3,0.01mL/只的不同剂量分别 静脉注射小鼠,并设生理盐水对照,根据死亡情况确 定小鼠的最小致死量为0.025mL.剖解死鼠,用其肝, 脾触片镜检可见到与组织涂片一致的,带荚膜的革兰 氏阳性粗短杆菌. 3.3.3中和试验用魏氏梭菌血清(A,B,C,D, E)分别与肠内容物上清液37?温度条件下中和4O分 钟,然后将l2只健康小白鼠随机分为6组,每组2 只,同时设注射生理盐水对照组.每只注射0.025mL, 结果发现,只有注射生理盐水组与A型血清组的小白 鼠存活,其他小组的小白鼠死亡,判定为A型. 3.3.4生化试验试验结果能分解葡萄糖,乳 糖,麦芽糖,蔗糖,果糖,产酸产气,不分解水杨酸,鼠 里糖,甘露醇,硫化氢阳性,紫奶培养基中牛奶凝固成 多孔海绵状,卵磷脂酶阳性. 3.4药敏试验 通过药敏试验发现,庆大霉素抑菌圈为20mm, 属高敏;而磺胺类药物,青霉素,阿莫西林抑菌圈< lOmm,环丙沙星抑菌圈为12mm,中度敏感. 4诊断结果 4.1根据发病症状,解剖变化,肠毒素测定,细菌 生化鉴定等结果,认为该鹿场梅花鹿急性死亡是由A 型魏氏梭菌引起的肠毒血症造成. 4.2魏氏梭菌引起的猝死症诱因很多,如环境污 染,饲料霉变都可引起发病.本病的发生可能与动物 园原址是羊放牧的场地有关,加上天气突然下雪降 温,梅花鹿的抵抗力下降,病原菌趁虚而入. J; 5防控措施 对病死梅花鹿焚烧,深埋.对圈舍及污染场地彻 底清理,用220g/L漂白粉处理,其后用60g/L烧碱彻 底消毒.对全群梅花鹿进行观察,用庆大霉素饮水,可 疑梅花鹿隔离治疗,健康梅花鹿紧急注射羊魏氏梭菌 四联苗.采取防控措施后,再未出现新病例.基本上控 制了该病的扩散. ,, 《中国毛皮动物》\《中国鹿业》征订,征稿启事 《中国毛皮动物》,《中国鹿业》是由中国农业科学 院特产研究所和中国农学会特产学会联合主办的业 内权威性刊物. 1办刊宗旨 为业内人士搭建—个更广阔的交流平台,加强信息 沟通,准确把握产业走势,确保产业健康,有序地发展. 2主要栏目 政策法规,专家论坛,综述,研究报告,养殖技术, 疾病防治,产品开发与加工,行业新闻,交流平台,市 场动态(国内外发展趋势,前景及价格),产业文化,知 识库,企业风采等. 3订阅 两刊均为双月刊,每本4元(含邮费),全年定价 均为24元.请直接从邮局汇款至编辑部订阅. 4来稿要求 4.1短小精悍,新颖实用,吸引人,最好是近期的 热点问或业内关注的问题. 4.2有较高的科学性,综述和评述性文章要观点 明确,论述有据,数据可靠. 4.3投稿方式自选.最好用E—mail方式,收到稿 件后将回复告之,文件可以是Word或纯文本格式.请 附作者姓名,工作单位,通汛地址,邮政编码,电话号 码,E—mail地址,以便联系. 4.4稿件采用与否由编委会审定,无论刊登与 否,恕不退稿. 4.5编辑部有权做必要的删改,不同意者请事先 声明. 本刊承办各种广告和供求业务,有意者请与编辑 部联系. 地址:吉林省吉林市左家镇鹿鸣大街15号 单位:中国农业科学院特产研究所《中国毛皮动 物》,《中国鹿业》编辑部邮政编码:132109 电话:(0432)6513067传真:(0432)6513069 E—mail:zgmpdu@126.con(中国毛皮动物) zgly08@126.conzgly09@126.con(中国鹿业) 特种经济动植物2009.1013