RP—HPLC法测定酚酞片的含量

RP—HPLC法测定酚酞片的含量 RP—HPLC法测定酚酞片的含量 安徽医药AnhuiMedicalandPharmaceuticalJournal2006Dec;10(12) RP.HPLC法测定酚酞片的含量 万庆,钱世兵 (安徽省铜陵市药品检验所,安徽铜陵244000) 摘要:目的建立用RP-HPLC法测定酚酞片的含量.方法 用c.柱,甲醇.05tool?L磷酸二氢钾溶液(60:40),用磷 酸调pH至3.50?0.1为流动相,检测波长为275am.结果 酚酞在10—200mg?L范围内,线性关系良好,相关系数 r=0.99999.平均回收率在99.5%一100.5%,RSD均小于 0.5%.结论本法简便,灵敏,准确,重现性好. 关键词:RP-HPLC法;酚酞 酚酞片为《中国药典》…所收载品种,其主要成分就是酚 酞.笔者在Ft常检验中发现不同厂家的乙醇甚至同一厂家不 同批号的乙醇对含量测定结果有影响;经过摸索,采用反相高 效液相色谱法对酚酞片含量进行测定,取得了良好的效果. 实验结果明,该法精密度,重现性均较好,结果准确可靠. 1仪器与试药 1.1仪器Ft本岛津SPD.IOAVP高效液相色谱仪,LC.IOAT 输液泵,浙江大学N2000色谱工作站.AE240电子天平 mvmV l2O l00 8O 6O 40 2O O O2468 mln l20 l00 8O 6O 40 20 O (瑞士梅特勒仪器有限公司). 1.2试药酚酞片(批号:040920<大同市云岗制药有限公 司>,050208<北京太洋药业有限公司>,20060204<临汾 宝珠制药有限公司>):酚酞对照品(批号:100091— 199601):中国药品生物制品检定所提供;甲醇为高效液相色 谱淋洗剂;磷酸二氢钾,磷酸等其他试剂均为分析纯. 2方法与结果 2.1色谱条件色谱柱:C18柱(PhenomenexGemini,150mm x4.6mm,5m)流动相:甲醇.05tool?L磷酸二氢钾溶 液(60:40),用磷酸调pH至3.50?0.1.检测波长:275am; 流速1.0ml?rain一;柱温:40~C;进样量:20;理论板数按酚 酞计算不低于2500. 2.2供试品贮备液及溶液的制备取研磨后的片粉.精密称 定(约相当于酚酞50mg)置50ml量瓶中,加甲醇超声溶解并 稀释至刻度,摇匀,经0.45m微孔滤膜过滤,作为供试品贮 02468 mln mV l20 l00 8O 6O 40 20 O 02468 mln 图l供试品I-IPLC色谱图图2空白溶剂I-IPLC色谱图图3对照品I-IPLC色谱图 备液,精密量取贮备液1.0ml置25rIll量瓶中,加流动相稀释液,在上述色谱条件下,每种浓度重复进样3次,测定峰面积. 至刻度作为供试品溶液,见图l.空白溶剂在酚酞相同保留以峰面积为纵坐标,对照品浓度(mg?L)为横坐标,计算得 时间处无吸收峰,见图2.回归方程Y=19050.8X+8886.8,相关系数r=0.99999,结 2.3对照品贮备液的制备精密称取酚酞对照品0.02521果表明,酚酞在10—200mg?L范围内,线性关系良好. g置25ml量瓶中,加甲醇超声溶解并稀释至刻度,摇匀,经表1加样回'趺试验 0.45Ixm微孔滤膜过滤,作为对照品贮备液. 2.4精密度试验精密量取对照品贮备液1.0ml置25ml 量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀,制成酚酞浓度为40.34 mg?L的对照品溶液,连续进样5次,见图3.以酚酞峰面 积计,峰面积为783451.6,782086.8,782784.1,782393.6, 784196.9,RSD=0.11%(n=5),表明精密度较好. 2.s重复性试验取同一批号样品6份,按2.2项下方法处 理后,分别进样,测得平均含量为100.1%,RSD为0.4%.结 果表明,本品在所建色谱条件下重现性较好. 2.6稳定性试验取上述对照品溶液,分别放置2,4,8,12, 24h后重复进样测定,测得酚酞峰面积分别为781065.8, 782191.3,783666.4,782734.1,783385.4.I1SD=0.13%,说明 溶液在24h内稳定. 2.7线性关系精密量取对照品贮备液适量,用流动相分别 配成含酚酞10.08,20.17,40.34,80.67,201.68mg?L的溶 批号HPLC法测得的含量RSD(%)药典方法测得的含量 安徽医药AnhuiMedicalandPharmaceuticalJournal2006Dec;10(12)?923? 2.8加样回收试验分别精密量取已知含量的供试品储备 液1.0ml,置9个50ml量瓶中.另精密称取酚酞对照品: 0.00813,0.01024,0.01201g;分别置l0ml量瓶中,加甲醇超 声溶解并稀释至刻度,摇匀,经0.45肌微孔滤膜过滤.每个 浓度对照品溶液各精密量取1.0ml三份,分别加入上述50 ml量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀,即得对照品加入量分 别为样品量的80%,100%,120%的溶液,各取20分别注 入液相色谱仪,记录色谱图,按外标法以峰面积计算其回收 率,分别为100.2%,99.7%,100.1%,结果见表1. 2.9样品的含量测定分别取上述3批样品,按2.2项方法 制备供试品溶液,进样测定,按外标法计算酚酞含量,结果见 表2. 3讨论 在流动相的选择上,经多次实验比较,发现甲醇一水(加:80)作 为流动相,30min内没有出峰;采用甲醇一水(80:20)作为流动 相,出峰时间为3.4min,虽然较纯甲醇延迟半分钟,但因拖 尾,柱效大幅度下降;而加入三乙胺作为扫尾剂会使pH呈碱 性,酚酞溶液会呈红色,不宜上机分析,必须调pH至酸性,柱 效上升,以pH为3.50最好;最后发现在采用甲醇.05mol? L磷酸二氢钾溶液(60:40),用磷酸调pH至3.50-I-0.1为流动相时,5.7min出峰且柱效也大幅度提高,拖尾因子也都 小于或等于1.05,各方面指数较合理.波长的选择,是参照 中国药典,把用流动相配好的对照品溶液经UV-2401PC紫外 可见分光光度计扫描,发现酚酞最大吸收波长为275nm.因 此选择275nm作为测定波长. 该方法所测得的样品含量与药典方法比较,结果相差不 大,但原质量采用的是紫外分光光度法测定组分含量,因 分三步稀释,实验烦琐,误差也较大;且笔者在日常实验中曾 发现不同的乙醇对本品含量测定结果有影响.本文采用反相 高效液相色谱法测定酚酞含量,专属性强,准确,快速,简便, 可为同类药品的质量分析提供参考. 参考文献: ,?部. [1]国家药典委员会编.中华人民共和国药典[S],2005年北京:化学工业出版社,2005.(收稿日期:2006—05—23) ?药物与临床? 丙泊酚,芬太尼麻醉胃镜检查860例临床观察 戴晓荣,朱跃华,陈永康 (江苏省泰兴市人民医院消化内科,江苏泰兴225400) 胃镜检查是消化内科最常用的诊疗方法,但在检查中常 因恶心,呕吐,腹痛使病人难以忍受,部分患者因此拒绝或长 期推迟胃镜检查及复查,延误诊断.我科自2003年5月.一 2006年2月应用丙泊酚,芬太尼静脉麻醉下行胃镜检查(无 痛胃镜)860例,效果良好,在消除患者痛苦和恐惧的同时,使 患者耐受性明显提高,现如下. 1资料与方法 1.1临床资料全部病例均为在本院就诊的门诊及住院病人, 年龄l4—69岁(镐.3?11.9岁),其中男性642例,女性218例. 1.2检查方法常规麻醉前准备,人室开放静脉通路,受检 前常规给予1%Dicain喷喉局麻1次.患者取左侧卧位,麻醉 医师监测患者生命体征的同时,给予鼻导管供氧.麻醉医师 先以芬太尼0.05—0.1mg静脉缓慢注射,继以丙泊酚1—2 mg?kg静脉注射,速度(2—3mg?s),必要时追加0.05 mg?kg,,至患者睫毛及角膜反射消失开始插镜. 2结果 860例患者检查过程中处于安静睡眠状态,术后5—10 min清醒,20,30min完全清醒.胃镜检查期间l8例出现心 率明显减慢(45—60bpm),经静脉注射阿托品0.5—1mg后 迅速恢复正常;13例出现呼吸减慢,血氧饱和度降至80%, 95%,暂停操作,给予面罩吸氧,抬起下颌,咳痰,保持呼吸道 通畅,待血氧饱和度恢复正常后,继续完成检查;50例发生注 射部位疼痛,持续时间短,麻醉药起效后疼痛消失,不须特殊 处理;全部患者未发生过敏,麻醉意外及呼吸,循环骤停. 3讨论 胃镜检查会给患者带来一定的生理和心理的刺激,可导 致患者交感神经系统极度兴奋或不良的神经反射j.丙泊 酚具有强镇静作用,芬太尼是中枢性镇痛药,二种药物均起效 较快,联合应用其催眠,镇痛作用明显增强,在效消除胃镜检 查带来的不良反应同时,能减少单一药物的用量及副作用. 须警惕的是,丙泊酚对呼吸系统有一定抑制作用,表现为呼吸 频率减慢,低氧血症和呼吸暂停j,对心血管系统有一定负 性肌力,负性频率作用,对外用血管有接扩张作用,可导致血 压下降,心率减慢. 本组观察结果显示,绝大多数患者在检查过程中无明显 呼吸抑制,血压下降,心率减慢等现象,仅有少数患者表现为 一 过性呼吸减慢,血氧饱和度下降至80%一95%,心率减慢 至45—600~/min,常在注射丙泊酚2—3min后发生,保持呼 吸道通畅,静注阿托品后,上述症状均迅速缓解.为了防止并 发症发生,注射丙泊酚时应因人而异,掌握恰当药物剂量和给 药速率,同时注意患者循环功能,及时对症处理.尤其对于高 龄患者,推注丙泊酚要缓慢,适当降低用量.检查过程中应全 程供氧,保持呼吸道通畅.麻醉状态下胃镜检查患者吞咽,呛 咳等保护性反射受抑制,发生返流误吸的危险增加,必须强调 麻醉前准备和急救物品的准备,尽可能保证麻醉安全. 参考文献: [1]刘俊杰,赵俊主编.现代麻醉学[M],第二版.北京:人民卫生 出版社,1998:934. [2]张婉雯,邵晓刚,王敏.异丙酚镇静麻醉胃镜检查并发症的预 防和治疗[J].中华消化内镜杂志,2004,21:328—30. [3]周少丽.异丙酚对心血管系统的影响[J].国外医学?麻醉学及 复苏分册,2002,23:329.(收稿日期:2006—07—10)