活血定眩丸的毒理学研究

活血定眩丸的毒理学研究 DOC格式论文,方便您的复制修改删减 活血定眩丸的毒理学研究 (作者:___________单位: ___________邮编: ___________) 作者,宋敏 徐乐勤 蒋宜伟 景明 蔺兴遥 【摘要】 目的观察动物口服活血定眩丸的急性毒性和长期毒性 反应。方法以最大浓度、最大体积的活血定眩丸灌服小鼠,测定l日 最大给药量。以高、中、低3个剂量的活血定眩丸灌服大鼠连续6 周,观察大鼠的生长发育、血液学、血液生化学、脏器系数、组织病 理学变化及停药后2周上述指标的变化。结果小鼠2次/d灌服活血 定眩丸的最大给药148.8 g生药/kg体重, 此剂量相当于临床成人每 日口服剂量0.224 2 g生药/kg体重的663倍。长期毒性实验显示, 大鼠摄食量、活动、体重、血液学、生化指标检查、脏器重量系数、 病理学检查均未见明显异常,与对照组相比均无明显差异。结论活血 定眩丸的急性毒性和长期毒性实验均未见有明显毒性反应。 【关键词】 活血定眩丸 毒理学 急性毒性 长期毒性 Abstract:Objective To observe the acute toxicity of HuoXueDingXuan Pill (HXDX) on mice and its long-term toxicity on rats.MethodsThe maximum administration dosage(MAD) of HXDX DOC格式论文,方便您的复制修改删减 was tested by gastric infusion of two times in mice. Three groups of rats were administered with repeated gastric infusion of HXDX for 6 weeks. Body weight, hematological and hematobiochemical parameters, coefficient and histomorphological figure of organs were examined in 6th week and 2 weeks after the cessation of HXDX.ResultsThe maximum tolerance dose in a day was more than 148.8 g/kg(crude drug) which was equivalent to 663 times of clinical daily dosage(0.2242 g/kg). There is no significant difference in food, behavior, weight, hematological and hematobiochemical parameters, coefficient and histomorphological figure of organs between the experimental and the control group. ConclusionToxicity of the drug was not observed in acute or chronic toxicity tests. Key words,HuoXueDingXuan Pill; Toxicology; Acute toxicity; Long-term toxicity 活血定眩丸是由炙黄芪、生石决明、桑寄生、菊花、天麻 等15味中药组成,具有活血通络、定眩止痛、补益肝肾的功效。主 要用于治疗椎动脉型颈椎病引起的头晕、耳鸣、颈项僵硬、肩背酸痛, 手臂麻木等症,临床上具有很好的疗效。实验研究明活血定眩丸能 有效改善椎动脉型颈椎病动物模型的血液流变学,1,。为了解该药的 安全性并为临床用药提供理论依据,进行了毒理学研究。现报道如下。 DOC格式论文,方便您的复制修改删减 1 器材 1.1 动物KM小鼠,SPF级,雌雄各半,体重(20?2)g,合格证号,SCXK,甘,2004-0006-0000025,Wistar大鼠80只,SPF级,雌雄各半,体重(90?10)g,合格证号,SCXK,甘,2004-0006-0000025,由甘肃中医学院实验动物中心提供。 1.2 药物活血定眩丸,由甘肃中医学院附属医院提供,批号070501,因丸剂中含有一定量的辅料,动物实验配制供试样品浓度达不到实验要求的剂量,故采用与丸剂相同工艺方法制得该药的浸膏,1 g浸膏相当于2.242 g生药,,实验前用蒸馏水配制成实验所需浓度用于急性和长期毒性实验。 1.3 仪器 CD-1200型血细胞分析仪,美国,雅培,,ALCYON 300型全自动生化分析仪,美国,雅培,,电子显微镜BX60-32FB3-F01型,日本,OLYMPUS,,切片机RM2135型,德国,徕卡,,全自动组织包埋机TEC-V.CM-JZ型(日本,樱花),自动组织脱水剂VIP-JJZ-JZ型,日本,樱花,。 2 方法与结果,2,4, 2. 1 小鼠急性毒性实验 2.1.1 方法 经对小鼠预试验,结果显示不能测出活血定眩丸剂对小鼠的LD50,故进行对动物的最大给药量测定。取KM小鼠40只,雌雄各半,按体重随机分为两组,分别为给药组和空白对照组,每组20只。 DOC格式论文,方便您的复制修改删减 于禁食12 h后,不禁水,,给药组以最大给药浓度,1.86 g生药/ml,,0.4 ml/10 g体重的给药体积,对照组以等体积的生理盐水,灌胃2次/d,间隔6 h,给药后观察14 d,动物的死亡及毒副反应症状。实验结束时,将全部动物处死,解剖,肉眼观察各主要脏器组织病变情况。计算小鼠口服活血定眩丸的最大给药量。 2.1.2 结果 1日内灌服活血定眩丸148.8 g生药/kg体重后,动物活动、进食进水、毛发未见任何异常。观察14 d动物无死亡。肉眼尸检未见主要脏器组织明显异常。由此可见,活血定眩丸小鼠口服最大给药量148.8 g生药/kg体重。此剂量相当于临床成人,按60 kg计,每日口服剂量0.224 2 g生药/kg体重的663倍。体重变化情况见表1。表1 活血定眩丸对急性毒性实验小鼠体重的影响(略) 结果显示,给药组与对照组小鼠的体重变化无显著性差异。 2.2 大鼠长期毒性实脸 2.2.1 方法 取Wistar大鼠80只,按体重随机分为4组,雌雄各半,每组20只,分别为活血定眩丸高、中、低剂量组和空白对照组,给药量分别为每日22.42,11.21,2.242 g生药/kg,分别相当于临床日用药剂量的100倍,50倍,10倍,,给药体积为1.5 ml/100 g体重,各剂量组用等体积不等浓度给药,空白对照组给予等体积生理盐水溶液1次/d,每周给药7 d,连续灌服6周。给药前及给药期间每周称体重1次,并按平均体重调整给药剂量,实验期间每天观察 DOC格式论文,方便您的复制修改删减 大鼠一般状态、体征、摄食量、饮水及粪便状况。发现有中毒反应的动物应取出单笼饲养,重点观察。发现死亡或濒死动物应及时尸检。于末次给药结束后24 h,每组取一半的大鼠从腹主动脉取血,检查血液学和血液生化学指标,取血后,立即剖取脑、心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、胸腺、睾丸、子宫等脏器称重,根据体重计算器官重量系数,并对心、肝、脾、肺、肾、脑、胃、小肠、大肠、垂体、脊髓、骨髓、淋巴结、膀胱、睾丸、附睾、卵巢、子宫、胸腺、肾上腺等组织做病理学检查。 2.2.2 结果 用药组及对照组大鼠在8周实验期间均未见异常症状,动物的活动、体重、摄食量、大便和毛发光泽程度等未见异常。80只大鼠无一死亡。 活血定眩丸剂对大鼠体重增长的影响,在活血定眩丸连续给药及停药恢复期间,各组大鼠体重变化一致,无明显异常。结果见表2。表2 活血定眩丸剂对实验大鼠体重的影响(略) 结果显示,给药6周及停药2周后,活血定眩丸各给药组大鼠体重变化与对照组相似,未见明显的体重改变。 活血定眩丸剂对大鼠血液学的影响 ,活血定眩丸剂连续给药42 d时各剂量组大鼠外周血象检查均在正常范围。结果见表3。表3 活血定眩丸剂对实验大鼠血液学的影响(略) DOC格式论文,方便您的复制修改删减 结果显示,给药6周及停药2周后,活血定眩丸各给药组大鼠各项血液学指标与对照组相似,未见明显改变。 活血定眩丸剂对大鼠血液生化指标的影响,活血定眩丸剂连续给药6周及停药恢复2周时,各剂量组与空白对照组比较无明显差异。实验结果见表4。表4 活血定眩丸剂对实验大鼠血生化指标的影响(略) 结果显示,给药6周及停药2周后,活血定眩丸各给药组大鼠各项血液生化学指标与对照组相似,未见明显血液生化学改变。 活血定眩丸对大鼠主要脏器重量系数的影响,连续给药6周及停药2周,各组动物体质、脏器质量无显著性差异,其脏器系数,g/100g体重,亦无显著性差异。结果见表5。 表5 活血定眩丸对大鼠脏器系数的影响(略) 结果显示,给药6周及停药2周后,活血定眩丸各给药组大鼠脏器系数与对照组相似,未见明显的脏器系数改变。 活血定眩丸对大鼠重要器官组织病理形态的影响,连续给药6周及停药恢复2周后,放血处死各组大鼠,尸解对脏器进行肉眼观察未发现异常现象。给药各组动物各个脏器组织病理切片检查未见明显病变,主要脏器的病理切片见图1,10,。说明活血定眩丸高, DOC格式论文,方便您的复制修改删减 中,低3个剂量连续服用6周,对大鼠主要脏器无明显器质性损伤。 3 结论 活血定眩丸成人临床每日用量为0.224 2 g生药/kg体重,小鼠1日口服最大给药量为148.80 g生药/kg。相当于成人用量的663倍。表明该药无明显急性毒性作用。 活血定眩丸以22.42,11.21,2.242 g生药/kg体重3个剂量灌胃(分别为成年人临床日用剂量100,50,10倍),1次/d,连续给药6周,与灌胃蒸馏水的空白对照组比较,对大鼠一般状态(外观形态、活动、饮食、大便形状等)、生长发育(体重增大)、外周血象、血液生化、病理学检查未见明显毒性作用,停药恢复2周后亦未见明显的迟缓毒性反应。实验结果表明,该药长期使用不会引起机体结构和功能的改变,无毒副作用,提示按临床规定的疗程、剂量用药时是安全的。 【参考文献】 ,1,宋敏,蒋宜伟,邱 桐.活血定眩丸对椎动脉型颈椎病兔血液流变学,ET,NO的影响,J,.甘肃中医学院学报,2005,22(6),23. ,2,谢秀琼.中药新试剂开发与应用,第3版,M,.北京,人民卫生出版社,2006: 721. ,3,中华人民共和国卫生部药政管理局.中药新药研究指 DOC格式论文,方便您的复制修改删减 南(药学、药理学、毒理学),M,.北京,人民卫生出版社,1994,199. ,4,国家食品药品监督管理局.中药新药研究的技术要求,S,.1999.