紫外线灭菌

紫外线灭菌 （一）目的要求 了解紫外线灭菌的原理和 （二）基本原理 紫外线灭菌是用紫外线灯进行的。波长为200~300nm的紫外线都有杀菌能力，其中以260nm的杀菌力最强。在波长一定的条件下， 紫外线的杀菌效率与强度和时间的乘积成正比。紫外线杀菌机理主要 是因为它诱导了胸腺嘧啶二聚体的形成和DNA链的交联，从而抑制 了DNA的复制。另一方面，由于辐射能使空气中的氧电离成[O]，再使O2氧化生成臭氧（O3）或使水（H2O）氧化生成过氧化氢（H2O2）。O3和H2O2均有杀菌作用。紫外线穿透力不大，所以，只适用于无菌 室，接种箱，手术室内的空气及物体面的灭菌。紫外线灯距照射物 以不超过1.2m为宜。 此外，为了加强紫外线灭菌效果，在打开紫外灯以前；可在无菌室内(或接种箱内)喷洒3%～5%石炭酸溶液，一方面使空气中附着有微生物的 尘埃降落，另一方面也可以杀死一部分细菌。无菌室内的桌面、凳子 可用2%～3%的来苏尔擦洗，然后再开紫外灯照射，即可增强杀菌效 果，达到灭菌目的。 （三）器材 1．培养基 牛肉膏蛋白胨平板。 2．溶液或试剂 3%~5%石炭酸或2%~3%来苏尔溶液。 3．仪器或其他用具 紫外线灯。 （四）操作步骤 l．单用紫外线照射 （1）在无菌室内或在接种箱内打开紫外线灯开关，照射30min，将开关关闭。 （2）将牛肉膏蛋白胨平板盖打开15min，然后盖上皿盖。置37?培养24h。共做三套。 （3）检查每个平板上生长的菌落数。如果不超过4个，说明灭菌效果良好，否则，需延长照射时间或同时加强其他。 2．化学消毒剂与紫外线照射结合使用 （1）在无菌室内，先喷洒3%～5%的石炭酸溶液，再用紫外线灯照射 15imn。 （2）无菌室内的桌面，凳子用2%～3%来苏尔擦洗，再打开紫外线灯 照射15min。 （3）检查灭菌效果[方法同“单用紫外线照射”(3)]。 因紫外线对眼结膜及视神经有损伤作用，对皮肤有刺激作用，故 不能直视紫外线灯光下工作。 （五）实验报告 1．结果 两种灭菌效果于下表中 处理方法 平板菌落数 1 2 3 灭菌效果比较 紫外线照射 3%～5%石炭酸+紫外线照射 2%～3%来苏尔+紫外线照射