薄荷中薄荷油的提取分离与鉴定

薄荷中薄荷油的提取分离与鉴定 班级:制药工程 姓名:朱愿 学号:1360614536 摘要: 薄荷油是重要的中药原料，近几年人们对它的研究越来越多，本文主要综述薄荷油的最新研究进展，阐述比较几种提取薄荷油的方法，并选出最优的。利用GC-MS鉴定薄荷油同分异构成分，并展望发展前景。 关键词: 薄荷;薄荷油;提取方法;GC-MS;同分异构 1 引言 薄荷为唇形科薄荷属多年生宿根草本植物，又名水薄荷、苏薄荷、鱼香草、人丹草、升阳草、夜息花等。全株具有浓烈的清凉香味，其地上部分干燥后可以 [1]入药，是我国传统的中药之一。薄荷用途很广，可用于医药、食品、化妆品、香料、烟草工业等。作为中药，其味辛性凉，可用于风热感冒、风温初起、头痛、 [2]目赤、喉痹、咽喉肿痛、口舌生疮、牙痛、荨麻疹、风疹等。 薄荷油是薄荷中的主要化学成分。薄荷新鲜叶含挥发油0(8,,1,，干茎叶中含1(3,,2,。薄荷挥发油中主要成分为左旋薄荷醇，含量62,,87,，还含左旋薄荷酮、异薄荷酮、胡薄荷酮、胡椒酮、胡椒烯酮、二氢香芹酮、乙酸薄荷酯、乙酸癸酯、乙酸松油酯、反式乙酸香芹酯、苯甲酸甲酯、d一蒎烯、8一蒎烯、p一侧柏烯、柠檬烯、右旋月桂烯、顺式一罗勒烯、反式一罗勒烯、莰烯、1，2一薄荷烯、反式一石竹烯、p一波旁烯、2 [3]一已醇、3一戊醇、3一辛醇、d一松油醇、芳樟醇、桉叶素、对伞花烃、香芹酚。薄荷 [4]中还含有黄酮类、有机酸、氨基酸以及其他成分等。其药理作用主要有清凉止痒、抗早孕、抗着床、利胆、抑制回肠平滑肌、促透、祛痰、抗真菌、抗病毒等，在医药方面有着很广泛的应用，所以对薄荷油的研究是必要和重要的。 2 方法与结果 2.1 提取方法 2.1.1 水蒸气蒸馏法提取 称取粉碎好的薄荷200g;置挥发油提取器中，加水1000ml，按《中国药典》2000版附录D挥发油测定法提取挥发油。提取6h,收集薄荷油。用无水硫酸钠脱水，滤纸过滤。 2.1.2 冷浸法提取称取 薄荷粉末20g，用600ml石油醚温浸泡3次，每次用200ml溶剂，浸泡时间为3h/次，合并提取液，将滤液在旋转蒸发仪上蒸去石油醚，以下同2.1.1项处理。 2.1.3 超临界CO法提取 薄荷粉末1.3kg，装入萃取釜。在萃取压力为9MPa,萃取温2 CO流量为25L/h的条件下，萃取1.5h，收集薄荷油，以下同2.1.1项处理。 度为50C，2 2.2 薄荷油出油率 薄荷油出油率 比较按上述方法分别提取薄荷油，并计算出油率。水蒸气蒸馏法提取薄荷油的得率为1.15%，冷浸法提取薄荷油的得率为1.27%，超临界CO法提取薄荷油的得率2 为2.43%。 2.3 薄荷醇含量测定 2.3.1 对照品溶液的制备 精密称取薄荷醇对照品1.5mg于1ml容量瓶中，对醋酸乙酯至刻度，摇匀，即得浓度为1.5mg/ml的对照品溶液。 2.3.2 样品溶液的制备 准确称取按上述方法提取得到的薄荷油适量，置于5ml容量瓶中，加醋酸乙酯至刻度，摇匀，即得样品溶液。 2.3.3 气相色谱条件 色谱柱为ZB -WAX弹性石英毛细管柱(30mm *0.25mm,0.25um),柱温80?恒温2min,程序升温6?/min至170?;气化室温度240?;载气为 [5]高纯N2(99.99%);检测温度240?(FID);分流比20:1。 2.3.4 曲线的绘制 分别为精密吸取2.3.1项下对照品溶液1，2，3，4，5，6ul注入气相色谱仪测定，以峰面积为纵坐标，进样量(ug)为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程y=1E+06X+73107,r=0.9998。结果表明在1.5~9.0ug范围内，对照品进样量与峰面积呈良好的线性关系。 2.3.5 稳定性实验 取水蒸气蒸馏法提取得到的薄荷油样品溶液，分别于0，2，4，6，10，12h进行测定，每次进样2ul，结果表明薄荷醇峰面积的RSD为1.26%，因此可以在12h内进行测定。 2.3.6 精密度实验 选取水蒸气提取所得薄荷油样品，在相同的色谱条件下重复进样 6次， 2ul/次。结果表明薄荷醇色谱峰为RSD为1.02%。 2.3.7 重复性实验 取水蒸气蒸馏法提取所得薄荷油样品，平行取6份进行测定，结果表明薄荷醇平均含量为78.31%，RSD为1.73%，说明样品测定具有较好的重现性。 2.3.8 回收率实验 精密称取已知薄荷醇含量的水蒸气蒸馏法提取得到的薄荷油样品5份，分别加入2.3.1项下薄荷醇对照品适量进行测定，并计算回收率结果平均回收率为97.34%，RSD为2.05%。 2.3.9 样品含量测定 按上述色谱条件，对2.3.2项下的样品溶液进行测定，结果见表1。由表1可知三种提取方法得到的薄荷油中薄荷醇含量高低顺序依次是冷浸法〉水蒸气蒸馏法〉超临界CO法。薄荷醇得率的大小顺序为超临界CO法〉冷浸法〉水蒸气蒸馏法 22 2.4 结果讨论: 表1 不同提取方法提取的薄荷油中薄荷醇含量的比较 % 提取方法 出油率 薄荷醇含量 薄荷醇得率 水蒸气蒸馏法 1.15 78.31 0.90 冷浸法 1.27 80.15 1.02 超临界CO2法 2.43 72.96 1.77 薄荷醇得率%=出油率*薄荷醇含量*100% 冷浸法提取薄荷油操作简单，但提取时间长，溶剂用量大，提取效率不高，相对于水蒸气蒸馏法冷浸法提取薄荷油的出油率和薄荷醇含量比较高。在薄荷油的现实生产，通常采用水蒸气蒸馏法进行生产，因为冷浸法使用了有机溶剂，容易造成溶剂残留。水蒸气蒸馏法是将水蒸气通入不溶或难溶于水，但有一定挥发性的有机物质中，使该有机物质在低于100?下，随着水蒸气一起蒸馏出来。其具有设备简单，操作安全，不污染环境，成本低，避免了提取过程中有机溶剂残留对油质造成影响特点，是有效提取中药挥发油的重要方法，但由于存在原料易受热易焦化，或使成分发生变化，所得到挥发油芳香气味也可变味，往往降低作为香料的局限性，降低其使用价值。水蒸气蒸馏法提取挥发油由于经济适用，因此在生产中应用较广。 三种提取方法中，超临界CO法提取薄荷油的出油率最高。这是由于超临界CO提取22过程在密闭系统中进行，操作温度低，因此搌烯类成分不易损失，热不稳定成分及易氧化的组分也不受到破坏，同时部分高沸点的成分也被提取出来。不仅如此，超临界CO法可以2 有效的防止热敏性物质的氧化和逸散。在萃取物中保持着药用植物的有效成分，而且能把高沸点，低挥发性，易热解的物质在远低于其沸点温度下萃取出来，它也是最干净的提取方法，由于全过程不用有机溶剂，因此萃取物绝不残留的溶剂物质，从而防止了提取过程中对人体有害物的存在和对环境的污染，保证了100%的纯天然性。 超临界CO法提取的薄荷油出油率得率高，而且具有操作温度低，无毒害，效率高。2 操作简单等优点，能够保证有效成分及产品质量的稳定性及安全性，同时有不会对环境造成 [6]污染。因此，薄荷油的提取方法中，超临界CO法是最理想的方法。 2 说道超临界CO提取法，它是目前化学研究方面较新的提取技术，应用十分广阔，不2 仅在医药工业中，可用于中草药有效成分的提取，热敏性生物制品药物的精制，及脂质类混合物的分离，在食品工业中，啤酒花的提取，天然及合成香料的精制，化学工业中混合物的分离等。 我个人观点是薄荷由于质地柔软疏松，药材在加工、干燥、贮存的过程易散失;随着科技的发展，中药现代化过程的推进，以及人们对其身健康的重视，要求我们不断的提高中药制剂的质量，确保中药的疗效，因此我们中药的提取中首先要抓好原料药的质量，合理的进行贮存、干燥和浸泡，不断改进实验设备，完善挥发油的提取方法，采用实验与实际相结合的原则，根据不同的目的，具备的条件采取不同的提取方法。 3 鉴定检测 从引言部分我们已经知道薄荷油中有很多成分，有些是同分异构体，所以许多研究人员对其主要成分做了检测鉴定。以便我们更好的将对薄荷油的研究应用到医学中，为人类造福。 对于薄荷油成分的鉴定一般用GC-MS，用注射器取制好的薄荷油样品2μL注入气相色谱仪进行GC-MS分析，1min后计算机进行数据采集，溶剂延迟6min。 色谱条件为:色谱柱HP-5弹性石英毛细管柱，进样室温度240?，色质接口管道温度210?。柱前压3.5kpa,分流进样分压比3:1。载气He。柱温程序升温:初始温度60?，停留1min，然后以10?/min速率升至250?，停20min。 质谱条件:EI离子源，电子能量70eV收集电流200μA，源温220?，源真空0.1mPa，分析器真空1μPa，质量扫描范围33-500amu，分辨率1000。 可以发现薄荷油中有几组薄荷醇和薄荷酮的同分异构体，制药的学生应该都知道，同分异构化合物由于结构的差异可以导致化学性能的极大差异，尤其是在药性方面。 4 结论: 本文综述了国内外近期对于薄荷油的研究成果，主要介绍了提取方法以及鉴定测试等内容，阅览综述的过程我发现目前我国薄荷研究主要集中在药理作用、挥发油和非挥发性成分提取、繁殖培育、栽培管理的研究。薄荷的研究偏向于其挥发性成分的研究，而对于其非挥发性成分的研究甚少，在挥发性成分的研究则偏向于薄荷油的提取，然而在提取工艺中，用超声波法和微波法提取芳香油的研究国内尚未见有报道。虽然薄荷的发展前景很好，但是针对其有效利用成分研究不平衡，应该进一步增加其他成分的研究，使得薄荷能够被充分利用，提高其附加值，促进经济作物的发展。 参考文献 [1]宋魁,谭勇,龚昌禄,等.天然香料植物——薄荷[J].现代农业科技,2009(1):105-106. [2]陆燕.薄荷的药用价值及作用[J].首都医药,2007(8):44. [3]梁呈元，李维林，张涵庆，等(薄荷化学成分及其药理作用研究进展[J](中国野生植物资源，2003，22(3):9,12( [4]黄泰康(常用中药成分与药理[M](北京:中国医药科技出版社，1994:1 828( [5]王成港，王春龙，刘衡，等(气相色谱法测定薄荷油中薄荷油的含量[J](中草药，2004，35(11):1 252,1 253( [6]徐平如; 杨忠林; 邵友元;化工技术与开发[J] , 2011(2):135.