仙灵骨葆胶囊中淫羊藿的含量测定

仙灵骨葆胶囊中淫羊藿的含量测定 ? 66?中国临床实用医学2008年2月第2卷第2期 ChinaClinPracMed,Feb2007,Voi.2,No.2 2.5动脉硬化斑块分布特点在2型DM组中,双下肢动 脉硬化斑块多发生于主干及其分支,显示为弥漫性或多节段 性病变,而且多严重累及股浅动脉以下远端血管,尤以胫前, 足背动脉为着.有多数病程较短的患者,胫前,足背动脉内 膜出现此较早的沙砾样改变.而对照组斑块多发生于动脉 分叉部位,且范围小,病变局限. 3讨论 近年来,随着高频,高分辨率超声及彩色多普勒血流显 像(CDFI)的广泛应用,超声检查血管病变获得越来越满意 的效果,已成为2型DM下肢血管病变早期诊断的重要 手段. 2型DM患者下肢动脉病变的早期形态学改变主要是内 膜粗糙,IMT增厚,导致管壁顺应性降低,与单纯的动脉硬化 疾病相似.但是DM患者动脉硬化发生早,几率高,进展快, 本组也反映了这一点.1986年意大利学者Pignoli首次用 高分辨率超声测量动脉内膜和中膜厚度,探讨IMT与动脉硬 化的关系.而IMT代了动脉壁内膜,中膜复合体厚度,是 动脉硬化早期的形态学改变.内膜增厚先于斑块形成,动脉 壁增厚是斑块形成的初步条件.由此可见,超声检查可以 在2型DM患者下肢动脉病变早期就可以明确诊断,便于I临 床对2型DM患者动脉硬化早期发现并早期干预,对于延缓 或阻止进一步发展具有非常重要的临床意义. 2型DM患者由于在长期的高血糖作用下,动脉内膜受 损害,血管壁上的蛋白质发生非酶糖化以及糖化产物生成增 多,血管壁的结构蛋白发生变化,并在糖代谢异常旁路转化 作用下,使三酰甘油水平明显增高,血浆HDL—C生成减少, 清除LDLC的能力下降,使动脉硬化和血管病变进一步加 重.2型DM的病程越长,发生下肢动脉硬化斑块率超 高.在本组病例中,2型DM患者斑块检出率较对照组明 显增高,而且发生动脉狭窄及闭塞亦较对照组增高,存在着 差异有统计学意义(P<0.05).动脉硬化斑块的二维声像 图特征具有以下几种形态:?内膜毛糙型;?软斑型;?硬 斑型;?混合斑块型.所有斑块的存在均可致动脉血管不 同程度的狭窄,进而导致动脉血流动力学发生相应改变.而 在斑块的基础上,发生血栓形成或斑块的脱落又可导致下游 动脉栓塞,使血流中断,而造成严重后果.所以彩色多普勒 超声对观察血管粥样硬化具有预报的意义,可根据斑块大 小,位置,形态等声像图特征,推测斑块形成的久暂,计算血 管狭窄率等,对于评估血管病变的程度有其积极的意义,使 治疗更具有针对性. I艋床和文献报道2型DM患者的动脉的硬化发生率高, 进度快,病情重,主要累及下肢远端血管.与本组检查结 果相一致,而且病变显示为弥漫性,多节段性特点,而对照组 多为血管分叉处,且多为单发,局灶性病变,这可能与解剖结 构有关.2型DM患者的下肢动脉病变的这种分布特殊性及 生物学特征,决定其发生血管狭窄或闭塞多在股浅动脉以下 的远端血管,再加上常伴有周围神经病变而致患者I临床症状 常不明显,如果已出现糖尿病足症状再治疗往往已为时过 晚,截肢常不可避免.因此,早期诊断糖尿病性血管病变对 改善预后,提高生存率及生活质量都有重要意义.彩色多普 勒超声是一种敏感性高,分辨率好,检查方便,可进行重复动 态观察,对于早期发现病变,预防和治疗,评估疗效,具有很 高的临床应用价值. 参考文献 [1]pignoliP,TremoliE,poliA,eta1.Intimalplusmedialthicknessof thearterialwall:adirectmeasurementwithultrasoundimaging.Cir culatiom.1986,74(6):1399?1406. 2]PratiP,Vanuzzo0,CasaroliM,eta1.ReproducibilityofinVOVOca? rotidintimamedialthicknessmeasurements.Areview.Stroke,1997, 28:665. 3]金文胜,潘长玉,陆葡明,等.葡萄糖耐量减低与动脉粥样硬 化.中华内分泌代谢杂志,2004,20:138. 4]曹永吉,李卫东.2型糖尿病下肢血管病变形态学特点研究,实 用心脑肺血管杂志,2004,12(4):12. 5]郑敏,李春梅,贾冬林,等.2型糖尿病患者下肢血管病变的超 声检查对预防下肢坏疽发生的意义.中国临床康复杂志,2004, 16(8):27. (收稿日期:2008-01.16) 仙灵骨葆胶囊中淫羊藿的含量测定 沈司京 ? 临床研究? 【摘要】目的建立仙灵骨葆胶囊中淫羊藿的含量测定.方法采用高效液相色谱法Lichro— spherC柱(5m,150×4.6mm);流动相:甲醇一1.5%冰乙酸水溶液(55:45);检测波长:270nm;流速: 1.0mL/min;柱温:30~C.结果在0.262mg/ml,1.310mg/ml范围内,线性关系良好,平均回收率为 98.5%.结论本方法简便,准确,灵敏,重现性好,专属性强,可用于该产品的质量控制. 【关键词】高效液相色谱法;仙灵骨葆胶囊;淫羊藿;含量测定 仙灵骨葆肠溶胶囊是由淫羊藿,续断,丹参,知母,补骨 脂,地黄六味中药组成的复方制剂,具有滋补肝肾,活血通 络,强筋壮骨的功效,常用于肝肾不足,瘀血阻络所致骨质疏 松症等症….该方药味众多,成分复杂,其性质各不相同,为 保证本制剂的科学性和质量稳定,现将与本品有关的淫羊藿 作者单位:100041北京大学首钢医院药剂科 质量研究工作综述如下. 1仪器与试药 1.1仪器戴安高效液相色谱仪,UVD340U二极管阵列检 测器,戴安色谱工作站,756PC型紫外分光光度计(上海光谱 仪器有限公司);色谱柱:LichrospherC.R柱(5m,150×4.6 mm)(江苏汉邦科技有限公司). 1.2试药淫羊藿苷对照品(批号:111640200401中国药 虽临床实用医学2008年2月第2卷第2期ChinaClinPracMed,Feb2007,V01.2,N0.2 品生物制品检定所提供);仙灵骨葆肠溶胶囊(批号:060102, 051261,051257由嘉事宏润药业有限公司提供).甲酸:天津 市福晨化学试剂厂,(批号:20040726);冰醋酸:天津市天新 精细化工开发中心,(批号:20050107);苯:天津市东丽区天 大化学试剂厂,(批号:200501l8);以上试药均为分析纯. 2方法与结果 2.1色谱条件LichrospherCl8柱(5m,150x4.6mm);流 动相:甲醇一1.5%冰乙酸水溶液(55:45);检测波长:270nm; 流速:1.0m1/miti:柱温:3O?. 2.2溶液的制备 2.2.1淫羊藿对照品配制精密称取淫羊藿苷对照品,加 甲醇制成1.3lrflg/ml的对照品溶液.精密吸取对照品溶液 群哩生正L————盟——————_l箫 ] 'l {I { 一一, ..' 一,一—, 一一,一一… .cI3r'…dI】tf'-34]? A.淫羊藿苷对照品 ? 67? 5l,注入液相色谱仪.保留时间Rt:7.966rain,分离度Rs =10.78. 2.2.2供试品溶液的配制取仙灵骨葆肠溶胶囊内容物 lg,研细,置于具塞锥形瓶中,精密称定,精密加入甲醇20 ml,密塞,称定重量,超声处理lh,放冷,再称定重量,用甲醇 补足减失的重量,摇匀,滤过.精密量取续滤液l0ml,并转 移至l0ml量瓶中,即得.精密吸取供试品溶液5l,注入液 相色谱仪.保留时间Rt=8.1llrain,分离度Rs=8.17. 2.2.3阴性对照溶液的配制取仙灵骨葆淫羊藿阴性胶囊 内容物lg,研细,置于具塞锥形瓶中,精密称定,以下操作同 仙灵骨葆肠溶胶囊.阴性样品在与对照品和供试品相对应 的位置上无吸收峰. 一j B.仙灵骨葆肠溶胶囊供试品 蕞——-_- {21. m J6{I {l jI L;" { 55}一…一 0:'0,04c'』,{一1L.01… C.淫羊藿阴性样品 图1淫羊藿含量测定专属性液相色谱图 2.3曲线的绘制精密称取淫羊藿苷对照品l3.1mg,于0,2,4,8,12h进样测定,结果淫羊藿积分面积的RSD为 置l0ml容量瓶中,加甲醇使溶解,并稀释至刻度,摇匀.制0.8%,表明供试品溶液在12h内稳定. 成1.3lmg/ml淫羊藿苷甲醇溶液.精密量取以上对照品溶2.6检测限和定量限为保证含量测定的准确,须确定供 液:0.4ml,0.8ml,1.2ml,1.6ml,2.0m1分别置于2ml容量试品中被测物能被检测出的最低量和被定量测定的最低量. 瓶中,用甲醇稀释至刻度,摇匀,质量浓度分别为0.262,采用信躁比法,当淫羊藿苷浓度为26.2g/ml时,信躁比为 0.524,0.786,1.048,1.310rflg/ml的对照品溶液.各精密量3:l,则淫羊藿苷的检测限为26.2g/ml;当淫羊藿苷浓度为 取5l注入液相色谱仪,记录色谱图,测定峰面积.以峰面39.3g/ml时,信躁比为l0:l,则淫羊藿苷的定量限为39.3 积值(A)对浓度(c)进行线性回归,得回归方程,A=168.523l,z异/ml. l1887C一2.98247619r=0.999572,结果表明,在0.262mg/2.7回收率试验分别取3份仙灵骨葆肠溶胶囊内容物各 ml—1.310mg/ml范围内,进样量与峰面积呈良好的线性0.5g,研细,置于具塞锥形瓶中,精密称定,分别加入一定浓 关系.度的淫羊藿苷对照品溶液,水浴蒸干,精密加入甲醇20ml, 2.4精密度试验精密量取淫羊藿苷对照品溶液(1.3l密塞,称定重量,超声处理lh,放冷,再称定重量,用甲醇补 rflg/m1)溶液20l注入液相色谱仪,重复进样6次,记录色足减失的重量,摇匀,滤过. 精密量取续滤液l0ml,并转移 谱图,计算相对标准偏差,结果RSD为0.43%(11=6).至l0ml量瓶中,即得.各精密量 取5l注入液相色谱仪, 2.5稳定性实验取供试品溶液(批号:060102)一份,分别记录色谱图结果见表l.试验 结果表明,该法的准确度较好. 表1回收率试验 2.8样品的测定取仙灵骨葆肠溶胶囊内容物lg,研细, 精密称定,置于具塞锥形瓶中,精密加入甲醇20ml,密塞,称 定重量,超声处理lh,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的 重量,摇匀,滤过.精密量取续滤液l0ml,并转移至l0ml量 瓶中,即得.另取淫羊藿苷对照品,用甲醇制成每lml中含 淫羊藿苷1.3lmg的溶液,作为对照品溶液.取供试品溶液 与对照品溶液各51分别注入液相色谱仪,记录色谱图,按 外标法以峰面积计算.结果见表2. 表2三批样品含量测定结果 批号含量(mg/g) 060102 051261 05l257 3讨论 根据以上试验,所测三批仙灵骨葆肠溶胶囊中淫羊藿的 平均含量为7.452mggg,因此可暂规定仙灵骨葆肠溶胶囊中 淫羊藿的含量不得少于7.4mg/g.《中华人民共和国药典》 (2005年版一部)对药材或试剂中的淫羊藿的含量测定方法 均采用高效液相色谱法,目前高效液相色谱已逐渐成为中药 检验的最重要分析手段,在中药及天然药物有效成分含量测 定中发挥日益重要的作用.本文使用这种测定方法,经各项 试验考察,结果表明该方法简便易行,结果准确,重现性好, 可有效控制该制剂的质量,并为探寻其作用的物质基础提供 依据. 参考文献 [1]韩广轩,等.淫羊藿化学成分研究进展.药学实践杂志,2002,20 (6):359?361. [2]《中国药典)2000年版"淫羊藿". (收稿日期:2008-01?13) ?如如 携 777